सशर्त Cas9 स्थिरीकरण का उपयोग कर जीन कार्यों के मूल्यांकन के लिए एक नया टूलकिट

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September 2nd, 2021

DOI :

10.3791/60685-v

September 2nd, 2021

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Polona Šafarič Tepeš^1,2, Raffaella Sordella¹

¹Cold Spring Harbor Laboratory, ²Faculty of Pharmacy, University of Ljubljana

Chapters

0:04

Introduction

1:00

Lentiviral Preparation

2:47

Determining Virus Titer and Transduction Efficacy with Flow Cytometry

4:27

Lentiviral Transduction of Target Cells and Conditional Induction of Cas9 Mediated Gene Editing

6:06

Results: Analysis of Reversibility and Rapidity of Destabilized DD-Cas9 Protein

7:24

Conclusion

Transcript

यह विधि एक छोटे से अणु, शील्ड-1 के तहत तेजी से, तापमान नियंत्रित CRISPR-Cas9 जीन संपादन प्रदान करता है। यह कैस 9 के संविलियन सक्रियण की तुलना करते समय कम ऑफ-टारगेट प्रभाव, लोअर सेल विषाक्तता, और आंतरिक रूप से नियंत्रित जीन संपादन भी प्रदान करता है

Summary

यहां, हम छोटे अणु, शील्ड-1 के तहत क्लस्टर नियमित रूप से इंटरस्पेस्ड शॉर्ट पैलिंड्रोमिक रिपीट-(CRISPR-) संबद्ध प्रोटीन 9 (Cas9) के लौकिक और सशर्त स्थिरीकरण के आधार पर एक जीनोम-संपादन उपकरण का वर्णन करते हैं । विधि सुसंस्कृत कोशिकाओं और पशु मॉडल के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है।

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CRISPR

Cas9