Name: identification of neutrophil extracellular traps in paraffin-embedded feline arterial thrombi using immunofluorescence microscopy
Uploaded: 2020-03-29T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Identification of Neutrophil Extracellular Traps in Paraffin-Embedded Feline Arterial Thrombi using Immunofluorescence Microscopy at JoVE.com

Die Studie wurde von Mitteln der University of California, Davis, Center for Companion Animal Health (CCAH 2018-30-F) unterstützt. Die Autoren möchten Dr. Kevin Woolard für den Einsatz des Fluoreszenzmikroskops würdigen.

Alle hier beschriebenen Methoden wurden in Übereinstimmung mit den Richtlinien des Institutional Animal Care and Use Committee an der University of California, Davis, durchgeführt. Nekropsien und Biopsien von Geweben wurden mit Zustimmung der Eigentümer durchgeführt.
1. Gewebefixierung, Einbettung und Schnitt
<ol><li>Dissect out der aortenbifurkation, einschließlich der absteigenden Aorta, Femoralarterie, und die gemeinsamen Iliasarterien (Abbildung 1A), ku...

<ol>
	<li>Maron, B. J., Fox, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypertrophic+cardiomyopathy+in+man+and+cats.">Hypertrophic cardiomyopathy in man and cats.</a> Journal of Veterinary Cardiology: The Official Journal of the European Society of Veterinary Cardiology. 17, 6-9 (2015).</li><li>Payne, J. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prognostic+indicators+in+cats+with+hypertrophic+cardiomyopathy.">Prognostic indicators in cats with hypertrophic cardiomyopathy.</a> Journal of Veterinary Internal Medicine. 27 (6), 1427-1436 (2013).</li><li>Borgeat, K., Wright, J., Garrod, O., Payne, J. R., Fuentes, V. 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F. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophil+Extracellular+Traps+in+Arterial+and+Venous+Thrombosis.">Neutrophil Extracellular Traps in Arterial and Venous Thrombosis.</a> Seminars in Thrombosis and Hemostasis. 45 (1), 86-93 (2019).</li><li>Li, R. H. L., Johnson, L. 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C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+alternative+fixation-processing+method+for+preembedding+ultrastructural+immunocytochemistry+of+cytoplasmic+antigens:+the+GBS+(glutaraldehyde-borohydride-saponin)+procedure.">An alternative fixation-processing method for preembedding ultrastructural immunocytochemistry of cytoplasmic antigens: the GBS (glutaraldehyde-borohydride-saponin) procedure.</a> The Journal of Histochemistry and Cytochemistry: Official Journal of the Histochemistry Society. 31 (6), 791-798 (1983).</li><li>Davis, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterizing+and+Diminishing+Autofluorescence+in+Formalin-fixed+Paraffin-embedded+Human+Respiratory+Tissue.">Characterizing and Diminishing Autofluorescence in Formalin-fixed Paraffin-embedded Human Respiratory Tissue.</a> The Journal of Histochemistry and Cytochemistry: Official Journal of the Histochemistry Society. 62 (6), 405-423 (2014).</li><li>Banerjee, B., Miedema, B. E., Chandrasekhar, H. 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Wir beschreiben ein Protokoll zur Identifizierung von NETs in festen kardiogenen arteriellen Thromben mit einem Doppel-Immunolabeling-Protokoll und einer Immunfluoreszenzmikroskopie. Obwohl nur kardiogene arterielle Thromben gefärbt wurden, konnte dieses Protokoll theoretisch für andere Thrombentypen und andere Tierarten verwendet werden. Die Identifizierung von NETs innerhalb des felinen arteriellen Thrombens deutet darauf hin, dass NETs bei Derene bei Katzen eine Rolle spielen können.
Der...

Katzen mit hypertropher Kardiomyopathie sind dem Risiko lebensbedrohlicher thromboembolischer Komplikationen1,2ausgesetzt. Trotz der hohen Morbidität und Mortalität im Zusammenhang mit fein kardiogener arterieller Thromboembolie (CATE) ist die zugrunde liegende Pathophysiologie von CATE bei Katzen schlecht verstanden. Es gibt auch begrenzte diagnostische und therapeutische Instrumente zur Behandlung und Identifizierung von Katzen, die von diesem verheerenden Zustand bedroht sind3.
Zusätzlich zu seiner Rolle bei der angeborenen Immunität haben Neutrophilen gezeigt, dass sie eine Rolle bei der Thrombose spielen, indem sie neutrophile extrazelluläre Fallen (NETs) freisetzen, die webartige Netzwerke zellfreier DNA (cfDNA) sind, die mit Histonen und granulären Proteinen wie Neutrophilenase (NE) und Myeloperoxidase verkrustet sind. Neutrophile durchlaufen NETs Bildung als Reaktion auf systemische Entzündung, direkte Begegnung mit Krankheitserregern, und Interaktion mit aktivierten Blutplättchen4,5,6,7. Bei Hunden, neutrophil-abgeleitete DNA hat sich gezeigt, dass GerinnselLyse hemmen, während NET-Proteine die Gerinnselbildung beschleunigen. Die Fähigkeit von NETs, zirkulierende Zellen und Gerinnungskomponenten zu fangen, ist auch der Schlüssel zu ihren thrombogenen Eigenschaften8,9,10,11,12.
NETs werden durch Kolokalisierung von extrazellulären neutrophilen Proteinen, Histonen und cfDNA nachgewiesen. Aus diesem Grund ist die Identifizierung und Quantifizierung von NETs in festen Geweben durch Immunfluoreszenz von deparaffiniertem Gewebe dem traditionellen Hämatoxylin- und Eosinfleck (H&E) mit Hellfeldmikroskopie4,5überlegen. Mehrere Studien am Menschen mit Immunfluoreszenzmikroskopie identifizierten NETs als strukturelle Komponenten von koronaren arteriellen Thromben, zerebralen Schlaganfall-Thromben, Atherothrombose und venösem Thrombi13,14,15,16,17. Bis heute wurde eine standardisierte Methode zur Erkennung und Quantifizierung von NETs in Katzenthromben nicht beschrieben. Da die Identifizierung von NETs in transinenkardiinen arterienförmigen Thromben zukünftige translationale Forschung entolieren kann, beschreiben wir Techniken der NET-Identifikation und -Bewertung in paraffin-eingebetteten arteriellen Thromben bei Katzen.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>4,6-Diamidino-2-phenylin (DAPI)</td>
			<td>Life Technologies Corporation</td>
			<td>D1306</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 594 Streptavidin conjugate</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Catalog # S11227</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-citrullinated histone H3 antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>Ab5103</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EVOS FL Cell Imaging System</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>AMEFC4300</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EVOS Imaging System Objective 10x</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>AMEP4681</td>
			<td>NA 0.25, WD 6.9/7.45 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EVOS Imaging System Objective 20x</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>AMEP4682</td>
			<td>NA 0.40, WD 6.8 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EVOS Imaging System Objective 40x</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>AMEP4699</td>
			<td>NA 0.75, WD 0.72 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat anti-rabbit Alexa Fluor 488 antibody</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Catalog # A32723</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat serum</td>
			<td>Jackson Immuno Research Labs</td>
			<td>Catalog # NC9660079. Manufacturer Part # 005-000-121</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neutrophil elastase antibody</td>
			<td>Bioss Antibodies</td>
			<td>Bs-6982R-Biotin</td>
			<td>Rabbit polyclonal Antibody, Biotin conjugated</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NP40</td>
			<td>Pierce</td>
			<td>Product # 28324. Lot # EJ64292</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Positive charged microscope slides</td>
			<td>Thomas Scientific</td>
			<td>Manufacturer No. 1354W-72</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rabbit serum</td>
			<td>Life Technology</td>
			<td>Catalog # 10510</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Target Retrieval Solution</td>
			<td>Agilent Dako</td>
			<td>S2367</td>
			<td>TRIS/EDTA, pH 9 (10x)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TrueVIEW Autofluorescence Quenching Kit</td>
			<td>Vector Laboratories</td>
			<td>SP-8400</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

identification of neutrophil extracellular traps in paraffin-embedded feline arterial thrombi using immunofluorescence microscopy

Neutrophile extrazelluläre Fallen (NETs), bestehend aus zellfreier DNA (cfDNA) und Proteinen wie Histonen und neutrophiler Elastase (NE), werden von Neutrophilen als Reaktion auf systemische Entzündungen oder Krankheitserreger freigesetzt. Obwohl NETs bisher gezeigt haben, dass sie die Gerinnselbildung verstärken und die Fibrinolyse bei Menschen und Hunden hemmen, ist die Rolle von NETs bei Katzen mit kardiogener arterieller Thromboembolie (CATE), einer lebensbedrohlichen Komplikation, die zur hypertrophen Kardiomyopathie sekundär ist. , ist unbekannt. Eine standardisierte Methode zur Identifizierung und Quantifizierung von NETs in kardiogenen arteriellen Thromben bei Katzen wird unser Verständnis ihrer pathologischen Rolle in CATE fördern. Hier beschreiben wir eine Technik zur Identifizierung von NETs in formaldehydfixierten und paraffin-eingebetteten Thromben innerhalb der Aortenverzweigung, die während der Nekropsie extrahiert wird. Nach der Deparaffinierung mit Xylol wurden Aortenschnitte indirekt wärmeinduzierte Antigenabrufungen unterzogen. Abschnitte wurden dann blockiert, permeabilisiert, und ex vivo NETs wurden durch Kolokalisierung von zellfreier DNA (cfDNA), citrulliniertem Histon H3 (citH3) und neutrophiler Elastase (NE) mittels Immunfluoreszenzmikroskopie identifiziert. Um die Immundetektion von NETs in Thromben zu optimieren, wurde die Autofluoreszenz von Gewebeelementen durch die Verwendung eines Autofluoreszenz-Quenching-Verfahrens vor der Mikroskopie eingeschränkt. Diese Technik könnte ein nützliches Werkzeug sein, um NETs und Thrombose bei anderen Arten zu studieren und bietet neue Einblicke in die Pathophysiologie dieses komplexen Zustandes.

Mit diesem Protokoll zur Deparaffinierung, wärmeinduzierten Antigenabruf ungegnet und doppelte Immunkennzeichnung von Paraffin-eingebettetem Thromben identifizierten wir neTs zum ersten Mal in feline CATE. Thrombi innerhalb der aortenigen Bifurkation wurden durch Fluoreszenzmikroskopie und Hellfeldmikroskopie mittels Standard-H&E-Färbung und Phasenkontrastmikroskopie lokalisiert. Bei der Hellfeldmikroskopie bestand der transinale arterielle Thrombi aus roten Blutkörperchen, Leukozyten, Fibrin und Blutplättchen (<stro...

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Identification of Neutrophil Extracellular Traps in Paraffin-Embedded Feline Arterial Thrombi using Immunofluorescence Microscopy

Wir beschreiben eine Methode zur Identifizierung neutrophiler extrazellulärer Fallen (NETs) in formaldehydfixierten und paraffin-eingebetteten kardiogenen arterieogenen arteriellen Thromben mit wärmeinduziertem Antigen-Retrieval und einem doppelten Immunlabeling-Protokoll.

Identifizierung von Neutrophilen extrazellulären Fallen in Paraffin-Embedded Feline Arteriellen Thrombi mittels Immunfluoreszenzmikroskopie

Neutrophil extracellular traps (NETs), composed of cell-free DNA (cfDNA) and proteins like histones and neutrophil elastase (NE), are released by ...

Dieses Protokoll der Parafinisierung gefolgt von Antigen-Retrieval von Paraffin-eingebetteten Aortenschnitten kann ein nützliches Werkzeug sein, um die Rolle von neutrophilen trizellulären Fallen bei der Feinthrombose zu untersuchen. Der Nachweis von neutrophilen trizellulären Fallen durch Immunfluoreszenz in festem und paraffinintegriertem Gewebe ist konventionellen histologischen Stents wie HNE überlegen, da sie den gleichzeitigen Nachweis sicherer ERDNA und extrazellulärer Proteine ermöglichen. Dieses Protokoll kann in anderen Thrombentypen und in anderen Tierarten verwendet werden.Die Identifizierung von neutrophilen extrazellulären Fallen innerhalb der katzenarteriellen Thromben deuten darauf hin, dass sie bei Derene eine Rolle bei der Thrombose bei Katzen spielen können. Die hier vorgestellten Protokolle sind Leitlinien. Wir empfehlen den Ermittlern dringend, die Dauer und die Bedingungen des Antigen-Rückholvorgangs anzupassen, um ein zufriedenstellendes Signal zu liefern.Um ein automatisiertes System zur Deparaffinierung und Rehydrierung der Abschnitte auf Glasschlitten zu verwenden, legen Sie die Glasgletten in Regale. Drei Minuten lang vollständig in 100-prozentige Saline untertauchen. Wiederholen Sie diesen Schritt zweimal.Spülen Sie nicht zwischen den Schritten. Untertauchen Sie bei Raumtemperatur dreimal dreimal für jeweils drei Minuten vollständig in abnehmenden Ethanolkonzentrationen. Zwei Minuten lang vollständig in entionisiertes Wasser tauchen und noch einmal wiederholen.Nach der Behandlung mit TBST füllen Sie das Reservoir mit entionisiertem Wasser, das auf 100 Grad Celsius erhitzt wird. Lassen Sie die Dampfkammer für 20 Minuten ausdemieren. Auf einer Wärmeplatte die handelsübliche Antigen-Retrievallösung mit Tris und EDTA bei pH 9,0 bis 95 bis 97 Grad Celsius erhitzen.Stellen Sie sicher, dass es nicht kocht. Suberge die Gleitet vollständig in der beheizten Antigen-Retrieval-Lösung und setzen Sie den Einsatz der externen Heizung über den Dampfer für 20 Minuten. Als nächstes waschen Sie die Dias dreimal mit TBST für fünf Minuten.Platzieren Sie nun die Abschnitte in Blockierpuffer 1. Zwei Stunden bei Raumtemperatur unter sanftem Schaukeln zwischen 30 und 50 U/min inkubieren. Ohne Waschen, sofort 100 Mikroliter verdünnter Kaninchen polyklonal anti-human citrullinierter Histon H3 Antikörper direkt auf die Rutsche auftragen.Legen Sie auf jedem Abschnitt einen Abdeckzettel auf, um eine gleichmäßige Verteilung des Antikörpergemischs zu ermöglichen. 12 bis 16 Stunden bei vier Grad Celsius mit sanftem Schaukeln bebrüten. Danach waschen Sie die Dias dreimal mit TBST für jeweils fünf Minuten.Um Antikörper aufzutragen, verwenden Sie eine Pipette und verteilen Sie gleichmäßig 100 Mikroliter Ziegenanti-Kaninchen-Antikörper konjugiert alexa Fluor 488. Bedecken Sie die Dias mit Zinnfolie und bebrüten Sie die Dias eine Stunde bei Raumtemperatur unter sanftem Schaukeln. Nach dem Waschen mit TBST nach dem Manuskript, inkubieren die Abschnitte in Sperrpuffer 2 über Nacht bei vier Grad Celsius unter sanftem Schaukeln.Schützen Sie vor dem Licht. Waschen Sie mit TBST dreimal für jeweils fünf Minuten. Blockieren Sie die Abschnitte im Sperrpuffer 3 wie bisher bei Raumtemperatur für zwei Stunden unter sanftem Schaukeln.Inkubieren Sie die Abschnitte mit Biotin laded ployclonal Kaninchen anti-human entrophil elastase Antikörper bei vier Grad Celsius für 12 bis 16 Stunden, wie zuvor beschrieben. Nach dem Waschen mit TBST inkubieren die Rutschen mit Alexa Fluor 594 Streptavidin Konjugat für eine Stunde bei Raumtemperatur. Danach einmal fünf Minuten mit TBST waschen.100 Mikroliter Autofluoreszense Quenching Lösungsmischung direkt auf die Abschnitte für eine Minute, wie vom Hersteller angewiesen. Waschen Sie die Dias sofort sechsmal für jeweils 10 Minuten mit TBST. Bedecken Sie jeden Schlitten mit 100 Mikrolitern 300 Nanomolar DAPI für fünf Minuten im Dunkeln.Dann mit TBST fünfmal für jeweils drei Minuten waschen. Tragen Sie einen Tropfen Antifade-Montagemedium direkt auf die Glasrutsche auf, die den Abschnitt umgibt. Legen Sie einen Deckelschlupf sanft auf den Abschnitt, ohne Blasen zu erzeugen.Lassen Sie die Proben über Nacht im Dunkeln bei vier Grad Celsius aushärten. Um Thrombi zu lokalisieren, scannen Sie kranially zu kauarisch entlang der Länge der Aorta, Aortenbifurkation und jeder femeralen Arterie mit Phasenkontrastmikroskopie mit einem 10-fachen Objektiv. Untersuchen Sie zunächst die Abschnitte auf zellfreie DNA mit dem DAPI-Kanal mit der Anregung bei 357 und 44 Nanometern.Identifizieren Sie extrazelluläre neutrophile Elastase und citrullinierte Histon H3 auf den texanischen roten und grünen fluoreszierenden Proteinkanälen. Halten Sie konsistente Belichtungszeit und Gewinne jedes Kanals während der gesamten Aufnahme von Bildern aufrecht, um eine Sättigung der Pixelintensität zu vermeiden. Neutrophile extrazelluläre Fallen werden identifiziert, basierende Kolokalisierung von neutrophiler Elastase, citrulliniertem Histon H3 und zellfreier DNA.Mit Hämatoxylin- und Eosinflecken und Hellfeldmikroskopie bestehen Katzenarterienthromben aus roten Blutkörperchen, Leukozyten, Fibrin und Blutplättchen. NETs erschienen als Netzwerke von tiefvioletten Fäden verschiedener Längen, die nahegelegene Erythrozyten und Leukozyten umgaben. Mit diesem Protokoll ergab die Immunfluoreszenzmikroskopie große Aggregate von NETs, die aus zellfreier DNA, extrazellulärzitrulliniertem Histon H3 und neutrophiler Elastase bestehen.Unter Phasenkontrast in der Immunmikroskopie wurde ein Thrombus als gut abgegrenzte Struktur im Gefäßraum charakterisiert. Thromben wurden jedoch in keiner der Kontrollproben nachgewiesen. Diese Abbildung zeigt eine tiefe Autofluoreszenz von Gerinnselelementen wie Erythrozyten, wenn sie bei der Wellenlänge von 488 Nanometern abgebildet werden.Kurze Autofluoresenabschreckung nach Derimmunodierung erhöhte die Empfindlichkeit von Protein-Co-Lokalisierung und NET-Nachweis auch in Gebieten mit einer Fülle von Erythrozyten signifikant. Die Dauer der Fixierung wirkt sich auf die Immunreaktivität bestimmter Antigene aus. Wir empfehlen eine Fixierung für nicht länger als 24 Stunden par die Dehydrierung und Paraffineinbettung.Alternativ kann methanolfreies Paraformaldehyd verwendet werden, um Artefakt durch Ameisensäure und Ketone durch Oxidation von Formaldehyd zu begrenzen. Um Interferenzen bei der Verwendung von Primärantikörpern derselben Spezies zu vermeiden, haben wir einen zusätzlichen Sperrschritt zur Sättigung aller verbleibenden Bindungsstellen an den sekundären Antikörpern aufgenommen. Die Forscher müssen Negativkontrollen umfassen, die aus Isotyp-Antikörpern, dem Ausschluss von Primärantikörpern und Immun-Labeling-Schritten und biologischen Kontrollen von Katzen ohne Thrombose bestehen.Die Autofluoreszenz von Gewebegrenzen von Thromben kann die mikroskopische Identifizierung von neutrophilen extrazellulären Fallen hämmern. Der Prüfer kann die Fluoreszenz durch den Einsatz von weitroten Fluorophoren minimieren. Diese Technik kann ein wertvolles Werkzeug für die Untersuchung von neutrophilen extrazellulären Fallen in anderen Tierarten sein.Dies kann ein besseres Verständnis der Pathophysiologie der Thrombose bieten.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Neutrophil Extracellular Traps: How to Generate and Visualize Them

Neutrophil Extracellular Traps: So erzeugen und zu visualisieren

Neutrophil granulocytes are the most abundant group of leukocytes in the peripheral blood. As professional phagocytes, they engulf bacteria and kill them ...

Forschung

Immunologie und Infektion

Simplified Human Neutrophil Extracellular Traps (NETs) Isolation and Handling

Simplified Human Neutrophil Extracellular Traps NETs Isolation and Handling

Vereinfachte Menschen Neutrophil Extracellular Traps (NETs) Isolierung und Handhabung

Neutrophil Extracellular Traps (NETs) have been recently identified as part of the neutrophil&#8217;s antimicrobial armamentarium. Apart from their role ...

In Situ Detection of Bacteria within Paraffin-embedded Tissues Using a Digoxin-labeled DNA Probe Targeting 16S rRNA

In Situ Detection of Bacteria within Paraffin-embedded Tissues Using a Digoxin-labeled DNA Probe Targeting 16S rRNA

In-situ-Nachweis von Bakterien in Paraffin eingebetteten Geweben Unter Verwendung eines Digoxin-markierte DNA-Sonde Targeting 16S rRNA

The presence of bacteria within the pocket epithelium and underlying connective tissue in gingival biopsies from patients with periodontitis has been ...

Methods to Study Lipid Alterations in Neutrophils and the Subsequent Formation of Neutrophil Extracellular Traps

Methoden Lipidveränderungen in Neutrophilen und die anschließende Bildung von Neutrophilen Extracellular Traps zu studieren

Lipid analysis performed by high performance thin layer chromatography (HPTLC) is a relatively simple, cost-effective method of analyzing a broad range of ...

Visualizing Macrophage Extracellular Traps Using Confocal Microscopy

Visualisierung von Makrophagen extrazelluläre fallen mit der konfokalen Mikroskopie

A primary method used to define the presence of neutrophil extracellular traps (NETs) is confocal microscopy. We have modified established confocal ...

In Vitro Canine Neutrophil Extracellular Trap Formation: Dynamic and Quantitative Analysis by Fluorescence Microscopy

In Vitro Canine Neutrophil Extracellular Trap Formation: Dynamic and Quantitative Analysis by Fluorescence Microscopy

In-vitro- Eckzahn Neutrophilenzahl extrazelluläre Trap Bildung: Dynamische und Quantitative Analyse von Fluoreszenz-Mikroskopie

In response to invading pathogens, neutrophils release neutrophil extracellular traps (NETs), which are extracellular networks of DNA decorated with ...

Automated Image-Based Quantification of Neutrophil Extracellular Traps Using NETQUANT

Automatisierte bildbasierte Quantifizierung von neutrophilen extrazellulären Fallen mit NETQUANT

Neutrophil extracellular traps (NETs) are web-like antimicrobial structures consisting of DNA and granule derived antimicrobial proteins. ...

Morphological and Compositional Analysis of Neutrophil Extracellular Traps Induced by Microbial and Chemical Stimuli

Morphologische und kompositorische Analyse von neutrophilen extrazellulären Fallen, die durch mikrobielle und chemische Reize induziert werden

Neutrophils function as the first line of cellular defense in an innate immune response by employing diverse mechanisms, such as the formation of ...

Quantifying Myeloperoxidase-DNA and Neutrophil Elastase-DNA Complexes from Neutrophil Extracellular Traps by Using a Modified Sandwich ELISA

Quantifizierung von Myeloperoxidase-DNA- und neutrophilen Elastase-DNA-Komplexen aus extrazellulären Neutrophilenfallen unter Verwendung eines modifizierten Sandwich-ELISA

Certain stimuli, such as microorganisms, cause neutrophils to release neutrophil extracellular traps (NETs), which are basically web-like structures ...

Staining and Imaging to Visualize Neutrophil Extracellular Traps

Immunofluorescence Imaging of Neutrophil Extracellular Traps in Human and Mouse Tissues

Neutrophil Extracellular Traps Imaging in Human and Mouse Tissues (Video) | JoVE

Immunfluoreszenz-Bildgebung von neutrophilen extrazellulären Fallen in menschlichen und Mausgeweben

Neutrophil extracellular traps (NETs) are released by neutrophils as a response to bacterial infection or traumatic tissue damage but also play a role in ...