Denne video vil vise dissektion teknik og relevante anatomiske vartegn for de store bækken ganglion og tilhørende autonome nerver i den mandlige og kvindelige rotte. Den første dissektion er vist for venstre side af en mandlig rotte straks postmortem. Få adgang til maven og bækkenet gennem en ventral midterlinje snit.
Forsigtigt flytte abdominale organer til den ene side ved hjælp af scelinnte eller bomuld tippet applikatorer. Bemærk placeringen af ventrale lapper i prostata og urinblæren. Flyt skelsættende vesicle til den kontralaterale side.
Skær vas deferens at give bedre adgang til området overliggende ganglion. Fra dette punkt af dissektion, må vævet ikke tørre ud, så holde vævet fugtigt med fysiologisk saltvand. At visualisere ganglion, omhyggeligt rydde væk væv nær og overliggende ganglion.
Brug om nødvendigt en retractor til at holde dissektionsfeltet klart. Fjern en nærliggende samling af fedtvæv og åbn den laterale fascia af bækkenet. Identificer bækkennerven ved at visualisere den interne iliaca vene, og det er fint gren projicere mod de store bækken ganglion og blæren.
Denne gren løber parallelt med og undertiden indlejret i bækkennerven derefter krydser ganglion. Forsigtigt placere fine spidse vinklede snævner under bækkennerven og skub skrænt langs for at befri den fra omgivende væv. Det kan også være muligt at isolere bækkennerven fra det lille fartøj, der løber parallelt med det.
Identificer den hule nerve ved at følge bækkennerven til krydset med ganglionen følg derefter den hule nerve, da den bevæger sig over prostata og derefter caudally mod peniss hule kroppe. Identificer, hvor hypogastrisk nerve slutter sig til ganglion på denne kraniekant efter at have rejst sammen med ureter. Identificer de store bækken ganglion og bekræfte placeringen af hver større nerve.
Identificer tilbehør nerver på ventrale kanten af ganglion projicere mod urin og reproduktive skrifter. For at fjerne de store bækken ganglion med dens tilknyttede nerver, forsigtigt glide forrænker mellem ganglion og den underliggende prostata være omhyggelig med ikke at punktere den tynde kapsel af prostata. Ryd eventuelle endelige forbindelser med omgivende væv derefter skære hver nerve.
Flyt ganglion med nerverne til den rette løsning til dit eksperiment og bekræfte, at hver af de vigtigste nerver er intakt. Den anden dissektion er vist for venstre side af en kvindelig rotte straks postmortem. Forsigtigt flytte abdominale organer til den ene side at notere placeringen af livmoderen horn, urinblære og endetarm.
Skær æggestokkene og livmoderen fartøjer og trække livmoderen horn. Indtast bughinderummet og forsigtigt rydde væk en samlet af fedtvæv placeret i nærheden af livmoderhalsen. Identificer den laterale væg af livmoderhalsen bare caudal til sit kryds med livmoderhorn.
Denne region er det primære vartegn for at definere den store bækken ganglion placering på dyrets rostrocaudal akse. Fjern forsigtigt væv, der hindrer fuldstændig visning af de neurale strukturer og samtidig undgå skader på store fartøjer. Identificer bækkennerven ved at finde den interne iliaca vene og dens fine gren projicere mod de store bækken ganglion og blæren.
Denne gren løber parallelt med og undertiden indlejret i bækkennerven derefter tværgående ganglion. Identificer hypogastrisk nerve, hvor den slutter sig til ganglion på sin kraniekant efter at have rejst sammen med ureter. Identificer den hule nerve ved at følge bækkennerven til krydset med ganglionen følg derefter den hule nerve, da den bevæger sig caudally langs den laterale væg af livmoderhalsen mod skeden.
Tilbehøret nerver er vanskelige at se, men projekt fra den mediale aspekt af de store bækken ganglion. Endelig identificere de store bækken ganglion og bekræfte placeringen af hver større nerve. For at fjerne de store bækken ganglion med dens tilhørende nerver, forsigtigt glide fortriver mellem ganglion og den underliggende livmoderhalsen og forstyrre eventuelle forbindelser mellem ganglion og livmoderhalsen.
Ryd eventuelle endelige forbindelser med omgivende væv for længden af nerver, der kræves til forsøget, skær derefter hver nerve. Flyt ganglion med nerverne til den rette løsning til dit eksperiment og bekræfte, at hver af de vigtigste nerver er intakt. Et eksempel på de store bækken ganglion struktur er illustreret her viser flere funktioner i formaldehyd-faste ganglier ved hjælp af konventionelle immunohistokæmi.
Dette billede viser hele større bækken ganglion med sine tilknyttede nerver visualiseret som en fuld tykkelse hele mount. Dette billede viser en kryosektion immunmærket at demonstrere noradrenerge neuroner ved deres udtryk for tyrosin hydroxylase. Dette billede viser kolinerge neuroner visualiseret ved deres udtryk for neuronal nitrogenoxid syntase.
Afslutningsvis, denne protokol og relaterede skemaer give forskere interesseret i bækken visceral funktion med værktøjer til at identificere og dissekere de store bækken ganglion i mandlige og kvindelige rotter. Disse færdigheder kan anvendes på mange typer af in vitro og in vivo eksperimentelle manipulation.
