यह वीडियो पुरुष और महिला चूहे में प्रमुख पेल्विक गैंगलियन और संबद्ध स्वायत्त नसों के लिए विच्छेदन तकनीक और प्रासंगिक शारीरिक स्थलों को दिखाएगा। पहला विच्छेदन एक पुरुष चूहे के बाईं ओर तुरंत पोस्टमॉर्टम के लिए दिखाया गया है। वेंट्रल मिडलाइन चीरा के माध्यम से पेट और श्रोणि तक पहुंचें।
धीरे-धीरे संदंश या कपास इत्तला दे दी applicators का उपयोग कर एक तरफ पेट के अंगों को स्थानांतरित करें। प्रोस्टेट ग्रंथि और मूत्राशय के वेंट्रल लोब्स के स्थान पर ध्यान दें। सेमिनल वेसिकल को कॉन्ट्रालेट्रल साइड में ले जाएं।
गैंगलियन को ओवरलिंग क्षेत्र तक बेहतर पहुंच प्रदान करने के लिए वास डिफेरेन्स को काटें। विच्छेदन के इस बिंदु से, ऊतक को सूखना नहीं चाहिए इसलिए ऊतक को शारीरिक नमकीन के साथ नम रखें। गैंगलियन की कल्पना करने के लिए, गैंगलियन के पास और ओवरलि होने वाले ऊतकों को सावधानीपूर्वक साफ करें।
यदि आवश्यक हो, तो विच्छेदन क्षेत्र को स्पष्ट रखने के लिए एक रिट्रैक्टर का उपयोग करें। एडिपोस ऊतक के पास के कुल को हटा दें और श्रोणि के पार्श्व प्रावरणी को खोलें। आंतरिक इलियाक नस की कल्पना करके पेल्विक तंत्रिका की पहचान करें और यह प्रमुख पेल्विक गैंगलियन और मूत्राशय की ओर पेश करने वाली अच्छी शाखा है।
यह शाखा पेल्विक तंत्रिका के भीतर समानांतर चलती है और कभी-कभी एम्बेडेड होती है फिर गैंगलियन को पार करती है। धीरे-धीरे पेल्विक तंत्रिका के नीचे ठीक इत्तला दी कोण संदंश रखें और इसे आसपास के ऊतकों से मुक्त करने के लिए संदंश को स्लाइड करें। इसके समानांतर चल रहे छोटे पोत से पेल्विक नर्व को अलग करना भी संभव हो सकता है।
गैंगलियन के साथ अपने जंक्शन पर श्रोणि तंत्रिका का पालन करके गुफानुमा तंत्रिका की पहचान करें, फिर गुफानुमा तंत्रिका का पालन करें क्योंकि यह प्रोस्टेट में यात्रा करता है और फिर लिंग के गुफानुमा निकायों की ओर cauली होता है। पहचानें कि हाइपोगैस्ट्रिक तंत्रिका मूत्रवर्धक के साथ यात्रा करने के बाद इस कपाल किनारे पर गैंगलियन में कहां मिलती है। प्रमुख पेल्विक गैंगलियन की पहचान करें और प्रत्येक प्रमुख तंत्रिका के स्थान की पुष्टि करें।
मूत्र और प्रजनन क्षेत्रों की ओर प्रक्षेपित गैंगलियन के वेंट्रल किनारे पर सहायक नसों की पहचान करें। अपनी संबंधित नसों के साथ प्रमुख पेल्विक गैंगलियन को हटाने के लिए, धीरे-धीरे गैंगलियन और अंतर्निहित प्रोस्टेट ग्रंथि के बीच संदंश स्लाइड करें जो प्रोस्टेट के पतले कैप्सूल को पंचर न करने के लिए सावधान रहें। आसपास के ऊतकों के साथ किसी भी अंतिम कनेक्शन को साफ करें फिर प्रत्येक तंत्रिका को काट लें।
अपने प्रयोग के लिए उपयुक्त समाधान के लिए अपनी नसों के साथ गैंगलियन ले जाएँ और पुष्टि करें कि मुख्य नसों में से प्रत्येक बरकरार हैं। दूसरा विच्छेदन मादा चूहे के बाईं ओर तुरंत पोस्टमॉर्टम के लिए दिखाया गया है। गर्भाशय सींग, मूत्राशय और मलाशय के स्थान को नोट करते हुए पेट के अंगों को धीरे-धीरे एक तरफ ले जाएं।
ओवेरियन और गर्भाशय के जहाजों को काटें और गर्भाशय के सींग को वापस लें। पेरिटोनियल स्पेस दर्ज करें और गर्भाशय गर्भाशय ग्रीवा के पास स्थित एडिपोस ऊतक के एक कुल को धीरे-धीरे साफ करें। गर्भाशय गर्भाशय ग्रीवा की पार्श्व दीवार की पहचान करें बस गर्भाशय सींग के साथ अपने जंक्शन के लिए कौडल।
यह क्षेत्र जानवर की रोस्ट्रोकाउडल धुरी पर प्रमुख पेल्विक गैंगलियन स्थान को परिभाषित करने के लिए प्राथमिक मील का पत्थर है। प्रमुख जहाजों को नुकसान से बचने के दौरान तंत्रिका संरचनाओं के पूर्ण दृश्य को बाधित करने वाले किसी भी ऊतक को सावधानीपूर्वक हटा दें। आंतरिक इलियाक नस और प्रमुख पेल्विक गैंगलियन और मूत्राशय की ओर पेश करने वाली इसकी ठीक शाखा को ढूंढकर पेल्विक तंत्रिका की पहचान करें।
यह शाखा पेल्विक तंत्रिका के भीतर समानांतर चलती है और कभी-कभी एम्बेडेड होती है फिर गैंगलियन को पार करती है। हाइपोगैस्ट्रिक तंत्रिका की पहचान करें जहां यह मूत्रवर्धक के साथ यात्रा करने के बाद अपने कपाल किनारे पर गैंगलियन में मिलती है। गैंगलियन के साथ अपने जंक्शन पर श्रोणि तंत्रिका का पालन करके गुफानुमा तंत्रिका की पहचान करें, फिर गुफानुमा तंत्रिका का पालन करें क्योंकि यह योनि की ओर गर्भाशय ग्रीवा की पार्श्व दीवार के साथ कौड़ी यात्रा करता है।
सहायक नसों को देखना मुश्किल है लेकिन प्रमुख पेल्विक गैंगलियन के मध्यीय पहलू से परियोजना है। अंत में, प्रमुख पेल्विक गैंगलियन की पहचान करें और प्रत्येक प्रमुख तंत्रिका के स्थान की पुष्टि करें। अपनी संबंधित नसों के साथ प्रमुख पेल्विक गैंगलियन को हटाने के लिए, धीरे-धीरे गैंगलियन और अंतर्निहित गर्भाशय ग्रीवा के बीच संदंश स्लाइड करें और गैंगलियन और गर्भाशय ग्रीवा के बीच किसी भी कनेक्शन को बाधित करें।
प्रयोग के लिए आवश्यक नसों की लंबाई के लिए आसपास के ऊतकों के साथ किसी भी अंतिम कनेक्शन को साफ करें फिर प्रत्येक तंत्रिका को काट लें। अपने प्रयोग के लिए उपयुक्त समाधान के लिए अपनी नसों के साथ गैंगलियन ले जाएँ और पुष्टि करें कि मुख्य नसों में से प्रत्येक बरकरार हैं। प्रमुख पेल्विक गैंगलियन संरचना का एक उदाहरण यहां दिखाया गया है जिसमें पारंपरिक इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री का उपयोग करके फॉर्मेल्डिहाइड-फिक्स्ड गैंगलिया की कई विशेषताएं दिखाई गई हैं।
यह छवि पूरी मोटाई पूरे माउंट के रूप में कल्पना की अपनी संबद्ध नसों के साथ पूरे प्रमुख श्रोणि गैंगलियन से पता चलता है। यह छवि टायरोसिन हाइड्रोक्सिलेज की अभिव्यक्ति द्वारा नोराड्रेनर्जिक न्यूरॉन्स को प्रदर्शित करने के लिए एक क्रायोसेक्शन इम्यूनोलेबल दिखाती है। यह छवि न्यूरोनल नाइट्रिक ऑक्साइड सिंथेस की अभिव्यक्ति द्वारा कल्पना कोलिनेर्गिक न्यूरॉन्स दिखाती है।
अंत में, यह प्रोटोकॉल और संबंधित योजनाएं पुरुष और मादा चूहों में प्रमुख पेल्विक गैंगलियन की पहचान करने और विच्छेदन करने के लिए उपकरणों के साथ पेल्विक आंत समारोह में रुचि रखने वाले शोधकर्ताओं को प्रदान करती हैं। इन कौशलों को कई प्रकार के इन विट्रो और वीवो प्रयोगात्मक हेरफेर में लागू किया जा सकता है।