このビデオは、男性と女性のラットの主要な骨盤神経節および関連する自律神経の解剖技術および関連する解剖学的ランドマークを示す。最初の解剖は、直後に死後の雄ラットの左側に示される。腹側中線切開を通して腹部と骨盤にアクセスする。
鉗子または綿の先端の適用器を使用して、腹部の器官を片側にそっと動かします。前立腺と膀胱の腹側葉の位置に注意してください。半角の小胞を反対側に移動します。
ギャングリオンの上の領域へのより良いアクセスを提供するために、vasの延期をカットします。解剖のこの時点から、組織は乾燥してはならないので、生理食塩水で組織を湿らせておいてください。ガングリオンを視覚化するには、ガングリオンの近くや上に組織を慎重に取り除きます。
必要に応じて、解剖フィールドを明確に保つためにレトラクターを使用します。脂肪組織の近くの凝集体を取り除き、骨盤の側面筋膜を開きます。内部腸骨静脈を視覚化することによって骨盤神経を識別し、それは主要な骨盤神経節と膀胱に向かって突き出て細かい枝です。
この枝は骨盤神経に平行に動き、時には骨盤神経の中に埋め込まれ、神経節を横断する。骨盤神経の下に細かい先端の斜め鉗子をそっと置き、鉗子をスライドさせて周囲の組織から解放する。また、それに平行に走っている小さな血管から骨盤神経を単離することもできる。
骨盤神経を神経節との接合部に従って海綿神経を特定し、前立腺を横切って海綿神経に従い、陰茎の海綿体に向かって尾行する。尿管と一緒に移動した後、この頭蓋の端で低胃神経が神経節に加わる場所を特定する。主要な骨盤神経節を特定し、各主要な神経の位置を確認します。
泌尿器管と生殖管に向かって突き出た神経節の腹側の端にある補助神経を特定する。関連する神経を伴う主要な骨盤神経節を除去するには、前立腺の薄いカプセルを穿刺しないように注意して、神経節と基礎となる前立腺との間に鉗子をそっとスライドさせる。周囲の組織との最終的な接続をクリアし、各神経を切断します。
神経を持つ神経節を実験に適した解決策に移動し、主要な神経のそれぞれが無傷であることを確認します。2回目の解剖は、すぐに死後の雌ラットの左側に示されている。子宮の角、膀胱および直腸の位置を示す片側に腹部器官を穏やかに移動する。
卵巣と子宮の血管を切断し、子宮ホーンを引っ込めます。腹腔に入り、子宮頸部の近くに位置する脂肪組織の凝集体を静かに取り除きます。子宮頸部の側面を識別するだけで子宮の角との接合に尾を向ける。
この領域は、動物のロストロカウダル軸上の主要な骨盤神経節の位置を定義するための主要なランドマークです。主要な血管への損傷を避けながら、神経構造の完全なビューを妨げる組織を慎重に除去します。主要な骨盤神経節と膀胱に向かって突き出た内部腸骨静脈とその微細な枝を見つけることによって骨盤神経を識別する。
この枝は骨盤神経に平行に動き、時には骨盤神経の中に埋め込まれ、その後神経節を横取りする。尿管と一緒に移動した後、頭蓋の端で神経節が結合する低胃神経を特定する。骨盤神経を神経節との接合部に従って海綿神経を特定し、子宮頸部の側面壁に沿って膣に向かって突き出て海綿神経に従う。
付属神経は見えにくいが、主要な骨盤神経節の内側の側面から投影する。最後に、主要な骨盤神経節を特定し、各主要な神経の位置を確認します。関連する神経を持つ主要な骨盤神経節を取り除くには、神経節と基礎となる子宮頸部の間の鉗子をそっとスライドさせ、神経節と子宮頸部の間の接続を混乱させる。
実験に必要な神経の長さのために周囲の組織との最終的な接続をクリアし、各神経を切断します。神経を持つ神経節を実験に適した解決策に移動し、主要な神経のそれぞれが無傷であることを確認します。主要な骨盤神経節構造の一例を、従来の免疫組織化学を用いたホルムアルデヒド固定神経節のいくつかの特徴を示す図示する。
この画像は、その関連する神経を持つ主要な骨盤神経節全体を完全な厚さ全体のマウントとして視覚化した。この画像は、チロシンヒドロキシラーゼの発現によってノラアドレナリン性ニューロンを実証するために免疫標識されたクライオセクションを示しています。この画像は、ニューロン一酸化窒素合成酵素の発現によって視覚化されたコリン作動性ニューロンを示す。
結論として、このプロトコルおよび関連する回路図は、骨盤内臓機能に関心を持つ研究者に、雄および雌ラットの主要な骨盤神経節を同定し解剖するためのツールを提供する。これらのスキルは、多くの型のインビトロおよびインビボ実験操作に適用することができる。
