Denne videoen vil vise disseksjonsteknikken og relevante anatomiske landemerker for de store bekkenganglion og tilhørende autonome nerver i hann- og hunnrotten. Den første disseksjonen er vist for venstre side av en hannrotter umiddelbart postmortem. Få tilgang til magen og bekkenet gjennom et ventralt midtlinjet snitt.
Flytt forsiktig bukorganene til den ene siden ved hjelp av tang eller bomullstippede applikatorer. Legg merke til plasseringen av ventrale fliker i prostata og urinblæren. Flytt sædsken til den kontralaterale siden.
Klipp vas deferens for å gi bedre tilgang til området overliggende ganglion. Fra dette punktet av disseksjonen må vevet ikke tørke ut, så hold vevet fuktig med fysiologisk saltvann. For å visualisere ganglion, forsiktig fjerne vev nær og overliggende ganglion.
Bruk om nødvendig en retractor for å holde disseksjonsfeltet klart. Fjern en nærliggende mengde fettvev og åpne bekkenets laterale fascia. Identifiser bekkennerven ved å visualisere den indre iliac venen, og det er fin gren som projiserer mot den store bekkenganglionen og blæren.
Denne grenen går parallelt med og noen ganger innebygd i bekkennerven og krysser deretter ganglionen. Plasser forsiktig fine spisse vinklede tang under bekkennerven og skyv tangen sammen for å frigjøre den fra omkringliggende vev. Det kan også være mulig å isolere bekkennerven fra det lille fartøyet som går parallelt med den.
Identifiser den kavernøse nerven ved å følge bekkennerven til krysset med ganglionen, følg deretter den kavernøse nerven når den beveger seg over prostata og deretter caudally mot penisens kavernøse kropper. Identifiser hvor hypogastrisk nerve slutter seg til ganglionen på denne kraniale kanten etter å ha reist sammen med urineren. Identifiser den store bekkenganglionen og bekreft plasseringen av hver stor nerve.
Identifiser tilbehørsnervene på ventrale kanten av ganglionen som projiserer mot urin- og reproduktive kanaler. For å fjerne den store bekkenganglionen med tilhørende nerver, skyv forsiktig tang mellom ganglionen og den underliggende prostatakjertelen forsiktig med å punktere prostataens tynne kapsel. Fjern eventuelle endelige forbindelser med omkringliggende vev og kutt deretter hver nerve.
Flytt ganglionen med nervene til riktig løsning for eksperimentet ditt og bekreft at hver av hovednervene er intakte. Den andre disseksjonen er vist for venstre side av en kvinnelig rotte umiddelbart postmortem. Flytt forsiktig bukorganene til den ene siden og legg til plasseringen av livmorhornet, urinblæren og endetarmen.
Klipp eggstokkene og livmorkarene og trekk tilbake livmorhornet. Skriv inn det peritoneale rommet og fjern forsiktig bort en mengde fettvev som ligger i nærheten av livmorhalsen. Identifiser sideveggen av livmorhalsen bare caudal til krysset med livmorhornene.
Denne regionen er det primære landemerket for å definere den store bekkenganglionplasseringen på dyrets rostrocaudal akse. Fjern forsiktig ethvert vev som beholder fullstendig visning av nevrale strukturer samtidig som du unngår skade på store fartøy. Identifiser bekkennerven ved å finne den indre iliac venen og dens fine gren som projiserer mot den store bekkenganglionen og blæren.
Denne grenen går parallelt med og noen ganger innebygd i bekkennerven og deretter tverrgående ganglionen. Identifiser hypogastrisk nerve hvor den slutter seg til ganglionen på kranialkanten etter å ha reist sammen med urineren. Identifiser den kavernøse nerven ved å følge bekkennerven til krysset med ganglionen og følg deretter den kavernøse nerven når den reiser caudally langs lateralveggen av livmorhalsen mot skjeden.
Tilbehørsnervene er vanskelige å se, men projiserer fra det mediale aspektet ved den store bekkenganglionen. Til slutt, identifisere den store bekken ganglion og bekrefte plasseringen av hver stor nerve. For å fjerne den store bekkenganglionen med tilhørende nerver, skyv forsiktig tang mellom ganglionen og den underliggende livmorhalsen og forstyrre eventuelle forbindelser mellom ganglionen og livmorhalsen.
Fjern eventuelle endelige forbindelser med omkringliggende vev for lengdene på nerver som kreves for eksperimentet, og kutt deretter hver nerve. Flytt ganglionen med nervene til riktig løsning for eksperimentet ditt og bekreft at hver av hovednervene er intakte. Et eksempel på den store bekkenganglionstrukturen er illustrert her som viser flere funksjoner i formaldehyd-faste ganglier ved hjelp av konvensjonell immunohistochemistry.
Dette bildet viser hele den store bekkenganglionen med sine tilhørende nerver visualisert som en full tykkelse hele mount. Dette bildet viser en kryoseksjon immunolabeled å demonstrere noradrenergic nevroner ved deres uttrykk for tyrosin hydroksylase. Dette bildet viser kolinerge nevroner visualisert ved deres uttrykk for nevronal nitrogenoksid syntase.
Til slutt gir denne protokollen og relaterte skjemaer forskere som er interessert i bekken visceral funksjon med verktøy for å identifisere og dissekere den store bekkenganglion hos mannlige og kvinnelige rotter. Disse ferdighetene kan brukes på mange typer in vitro og in vivo eksperimentell manipulasjon.