Este video mostrará la técnica de disección y los puntos de referencia anatómicos relevantes para el ganglio pélvico principal y los nervios autonómicos asociados en la rata macho y hembra. La primera disección se muestra para el lado izquierdo de una rata macho inmediatamente postmortem. Acceda al abdomen y la pelvis a través de una incisión ventral de la línea media.
Mueva suavemente los órganos abdominales hacia un lado usando fórceps o aplicadores con punta de algodón. Observe la ubicación de los lóbulos ventrales de la glándula prostática y la vejiga urinaria. Mueva la vesícula seminal al lado contralateral.
Corte los vasos deferens para proporcionar un mejor acceso a la zona que supera el ganglio. Desde este punto de la disección, el tejido no debe secarse, así que mantenga el tejido húmedo con solución salina fisiológica. Para visualizar el ganglio, limpie cuidadosamente los tejidos cerca y superando el ganglio.
Si es necesario, utilice un retractor para mantener el campo de disección despejado. Retire un agregado cercano de tejido adiposo y abra la fascia lateral de la pelvis. Identifique el nervio pélvico visualizando la vena ilíaca interna y es una rama fina que se proyecta hacia el ganglio pélvico principal y la vejiga.
Esta rama corre paralela y a veces incrustada dentro del nervio pélvico y luego atraviesa el ganglio. Coloque suavemente fórceps en ángulo con punta fina debajo del nervio pélvico y deslice los fórceps para liberarlo del tejido circundante. También puede ser posible aislar el nervio pélvico del pequeño vaso que corre paralelo a él.
Identifique el nervio cavernoso siguiendo el nervio pélvico hasta su unión con el ganglio y luego siga el nervio cavernoso mientras viaja a través de la próstata y luego caudalmente hacia los cuerpos cavernosos del pene. Identifique dónde se une el nervio hipogástrico en este borde craneal después de viajar junto al uréter. Identifique el ganglio pélvico principal y confirme la ubicación de cada nervio principal.
Identificar los nervios accesorios en el borde ventral del ganglio que se proyecta hacia las vías urinaria y reproductiva. Para extirpar el ganglio pélvico principal con sus nervios asociados, deslice suavemente los fórceps entre el ganglio y la glándula prostática subyacente teniendo cuidado de no perforar la cápsula delgada de la próstata. Limpie las conexiones finales con los tejidos circundantes y luego corte cada nervio.
Mueva el ganglio con sus nervios a la solución adecuada para su experimento y confirme que cada uno de los nervios principales está intacto. La segunda disección se muestra para el lado izquierdo de una rata hembra inmediatamente postmortem. Mueva suavemente los órganos abdominales hacia un lado observando la ubicación del cuerno uterino, la vejiga urinaria y el recto.
Cortar los vasos ováricos y uterinos y retraer el cuerno uterino. Introduzca el espacio peritoneal y despeje suavemente un agregado de tejido adiposo situado cerca del cuello uterino. Identificar la pared lateral del cuello uterino sólo caudal a su unión con los cuernos uterinos.
Esta región es el punto de referencia principal para definir la ubicación principal del ganglio pélvico en el eje rostrocaudal del animal. Retire cuidadosamente cualquier tejido que impida la visión completa de las estructuras neurales evitando daños a los vasos principales. Identifique el nervio pélvico encontrando la vena ilíaca interna y su rama fina que se proyecta hacia el ganglio pélvico principal y la vejiga.
Esta rama corre paralela y a veces incrustada dentro del nervio pélvico y luego transversa el ganglio. Identifique el nervio hipogástrico donde se une al ganglio en su borde craneal después de viajar junto al uréter. Identifique el nervio cavernoso siguiendo el nervio pélvico hasta su unión con el ganglio y luego siga el nervio cavernoso mientras viaja caudalmente a lo largo de la pared lateral del cuello uterino hacia la vagina.
Los nervios accesorios son difíciles de ver, pero se proyectan desde el aspecto medial del ganglio pélvico mayor. Por último, identifique el ganglio pélvico principal y confirme la ubicación de cada nervio principal. Para extirpar el ganglio pélvico principal con sus nervios asociados, deslice suavemente los fórceps entre el ganglio y el cuello uterino subyacente y interrumpa cualquier conexión entre el ganglio y el cuello uterino.
Limpie las conexiones finales con los tejidos circundantes para las longitudes de los nervios necesarios para el experimento y luego corte cada nervio. Mueva el ganglio con sus nervios a la solución adecuada para su experimento y confirme que cada uno de los nervios principales está intacto. Un ejemplo de la estructura del ganglio pélvico principal se ilustra aquí mostrando varias características de los ganglios fijados por formaldehído usando inmunohistoquímica convencional.
Esta imagen muestra todo el ganglio pélvico principal con sus nervios asociados visualizados como un soporte entero de espesor completo. Esta imagen muestra una criosis inmunoeticionada para demostrar neuronas noradrenérgicas por su expresión de tirosina hidroxilasa. Esta imagen muestra neuronas colinérgicas visualizadas por su expresión de óxido nítrico neuronal sintasa.
En conclusión, este protocolo y los esquemas relacionados proporcionan a los investigadores interesados en la función visceral pélvica las herramientas para identificar y diseccionar el ganglio pélvico principal en ratas macho y hembra. Estas habilidades se pueden aplicar a muchos tipos de manipulación experimental in vitro e in vivo.
