Denna video kommer att visa dissekering teknik och relevanta anatomiska landmärken för de stora bäckenhålorna ganglion och tillhörande autonoma nerver i den manliga och kvinnliga råtta. Den första dissektionen visas för vänster sida av en hanråtta omedelbart postmortem. Tillgång till buken och bäckenet genom en ventrala mittlinjen snitt.
Flytta försiktigt bukorganen till ena sidan med hjälp av tövövippor eller bomullstippade applikatorer. Notera placeringen av de ventrala lober i prostatakörteln och urinblåsan. Flytta sädesblåsiken till kontralateralsidan.
Skär vas deferens att ge bättre tillgång till området overlying ganglion. Från denna punkt av dissektionen, vävnaden får inte torka ut så håll vävnaden fuktig med fysiologisk koksaltlösning. För att visualisera ganglion, noggrant rensa bort vävnader nära och överliggande ganglion.
Använd vid behov ett upprullningsdon för att hålla dissektionsfältet klart. Ta bort en närliggande aggregat av fettvävnad och öppna laterala fascia av bäckenet. Identifiera bäckenhålorna nerv genom visualisera den inre iliaca andan och det är fina grenen projicerar mot de stora bäckenhålorna ganglion och urinblåsan.
Denna gren löper parallellt med och ibland inbäddade i bäckenhålorna nerven sedan korsar ganglion. Placera försiktigt fina tippade vinklade tång under bäckennerven och skjut krafttrådarna tillsammans för att frigöra den från omgivande vävnad. Det kan också vara möjligt att isolera bäckenhålorna nerv från det lilla fartyget som löper parallellt med den.
Identifiera cavernous nerv genom att följa bäckenhålorna nerv till dess korsning med ganglion följ sedan cavernous nerv som den färdas över prostata och sedan caudally mot cavernous organ penis. Identifiera var hypogastric nerven ansluter ganglion vid denna kranial kanten efter att ha rest tillsammans med urinledaren. Identifiera de stora bäckenhålorna ganglion och bekräfta placeringen av varje större nerv.
Identifiera tillbehörsnerven vid den ventrala kanten av ganglionen som projicerar mot urin- och reproduktions-tarmkanalen. För att ta bort de stora bäckenhålorna ganglion med dess associerade nerver, försiktigt glida typpor mellan ganglion och den underliggande prostatakörteln vara noga med att inte punktera den tunna kapseln i prostata. Rensa eventuella slutliga anslutningar med omgivande vävnader skär sedan varje nerv.
Flytta ganglion med sina nerver till lämplig lösning för ditt experiment och bekräfta att var och en av de viktigaste nerverna är intakta. Den andra dissektionen visas för vänster sida av en honråtta omedelbart postmortem. Flytta försiktigt bukorganen till ena sidan och att man kan lägga till platsen för livmoderhornet, urinblåsan och ändtarmen.
Skär äggstocks- och livmoderkärlen och dra tillbaka livmoderhornet. Ange peritoneal rymden och försiktigt rensa bort ett aggregat av fettvävnad som ligger nära livmoderns livmoderhalsen. Identifiera den laterala väggen i livmoderns livmoderhalsen bara caudal till dess korsning med livmoderhornen.
Denna region är det primära landmärket för att definiera de stora bäckenhålorna ganglion plats på djurets rostrocaudal axel. Försiktigt bort all vävnad som hindrar fullständig bild av de neurala strukturerna samtidigt som man undviker skador på större fartyg. Identifiera bäckenhålorna nerv genom att hitta den inre iliaca anda och dess fina grenen projektering mot de stora bäckenhålorna ganglion och urinblåsan.
Denna gren löper parallellt med och ibland inbäddade i bäckenhålorna nerven sedan tvärs ganglion. Identifiera hypogastric nerv där den ansluter ganglion vid dess kraniala kanten efter att ha rest tillsammans med urinledaren. Identifiera cavernous nerv genom att följa bäckenhålorna nerv till dess korsning med ganglion sedan följa cavernous nerv som den färdas caudally längs laterala väggen i livmoderhalsen mot slidan.
Tillbehöret nerverna är svåra att se men projektet från den mediala aspekten av de stora bäckenhålorna ganglion. Slutligen identifiera de stora bäckenhålorna ganglion och bekräfta placeringen av varje större nerv. För att ta bort de stora bäckenhålorna ganglion med dess associerade nerver, försiktigt glida tänjor mellan ganglion och den underliggande livmoderhalsen och störa eventuella kopplingar mellan ganglion och livmoderhalsen.
Rensa eventuella slutliga anslutningar med omgivande vävnader för längden på nerver som krävs för experimentet sedan skära varje nerv. Flytta ganglion med sina nerver till lämplig lösning för ditt experiment och bekräfta att var och en av de viktigaste nerverna är intakta. Ett exempel på de stora bäckenhålorna ganglion struktur illustreras här visar flera funktioner i formaldehyd-fast ganglier med konventionella immunohistokemi.
Denna bild visar hela stora bäckenhålorna ganglion med dess associerade nerver visualiseras som en full tjocklek hela fästet. Denna bild visar en cryosection immunolabeled att visa noradrenergic nervceller genom sitt uttryck av tyrosin hydroxylas. Denna bild visar kolinerga nervceller visualiseras genom deras uttryck av neuronal kväveoxid syntas.
Sammanfattningsvis, detta protokoll och relaterade scheman ge forskare som är intresserade av bäckenhålorna visceral funktion med verktyg för att identifiera och dissekera de stora bäckenhålorna ganglion i manliga och kvinnliga råttor. Dessa färdigheter kan tillämpas på många typer av in vitro och in vivo experimentell manipulation.
