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•
10:45 min
June 20th, 2020
DOI :
10.3791/60945-v
Chapters
0:04
Introduction
0:33
Cleaning and Silanizing the Glass
1:26
Spin-Coating the Glass Substrate
2:40
Photolithography, Etching, and Cleaning
3:47
Fabricating the Microchamber Array Device
5:04
Generating the Femtoliter Droplet Array (FemDA)
6:35
Image Data Analysis
8:45
Results: Cell-Free Protein Synthesis in FemDA
10:07
Conclusion
Transcript
液滴から100万以上のユニフォームが指サイズの基板上に生成されます。そして、単一のDNA分子は、各液滴にランダムに分布しています。タンパク質の収率は、液滴中の分子の数に比例します。
我々の技術は、複雑なタンパク質の発現と精製なしに酵素活性の迅速かつ定量的な測定に使用することができます。まず、カバーグラスを染色ラックにセットし、8つの水酸化ナトリウムモルにラックを置きます。カバーガラスと染色ラックを室温で15分間超音波処理します。
水酸化ナトリウムから染色ラックを取り
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Summary
プロトコルの全体的な目標は、無細胞タンパク質合成に使用できる1cm2平面基板上に100万個以上の順序付け、均一、安定した、生体適合性のフェムトリットル液滴を準備することです。
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