Preparation of Mammalian Cells for SMLM (Single-Molecule Localization Microscopy) Imaging
2:10
Equipment Preparation
3:22
Data Acquisition
4:18
Data Analysis and Single-Molecule Tracking
5:31
Results: SMLM Imaging Using BODIPY Conjugates
6:38
Conclusion
Transcript
Il nostro protocollo descrive l'uso di coloranti BODIPY convenzionali per microscopia a super risoluzione utilizzando i loro stati radi e spostati verso il rosso. Questo ci permette di studiare organelli e biomolecole in cellule viventi con risolu
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I coniugati BODIPY convenzionali possono essere utilizzati per la microscopia per la localizzazione a singola molecola a cellule vive (SMLM) attraverso lo sfruttamento dei loro dimeri di stato del suolo con formazione transitoria e spostata verso il rosso. Vi presentiamo un protocollo SMLM ottimizzato per tracciare e risolvere i lipidi neutri subcellulari e gli acidi grassi nelle cellule viventi di mammiferi e lieviti alla scala nanoscopica della lunghezza.