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•
07:49 min
June 8th, 2020
DOI :
10.3791/60950-v
Chapters
0:04
Introduction
1:24
Preparation of Mammalian Cells for SMLM (Single-Molecule Localization Microscopy) Imaging
2:10
Equipment Preparation
3:22
Data Acquisition
4:18
Data Analysis and Single-Molecule Tracking
5:31
Results: SMLM Imaging Using BODIPY Conjugates
6:38
Conclusion
Transcript
我々のプロトコルは、そのまばらな、赤シフト状態を使用して超解像顕微鏡のための従来のBODIPY染料の使用を記述する。これにより、30ナノメートルの分解能で生きている細胞のオルガネラや生体分子を研究することができます。この方法の利点は、そのシンプルさと、単一分子信号の長期的なソースを提供する異なる利用可能なBODIPYコンジュゲートの汎用性です。
我々の実証されたアプリケーションは、脂肪肝疾患や2型糖尿病などの疾患の洞察を得るために重要になる可能性があり、脂質滴と脂肪酸を回折限界
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Summary
従来のBODIPYコンジュゲートは、一過性形成、赤シフト地盤状態ダイマーの開発を通じて、生細胞単一分子局在化顕微鏡(SMLM)に使用することができます。我々は、生きている哺乳類および酵母細胞における細胞内中性脂質および脂肪酸をナノスコピック長さスケールで追跡し、解決するための最適化されたSMLMプロトコルを提示する。
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