टेलीओस्ट की घ्राण तंत्रिका से अतिरिक्त बहु-इकाई रिकॉर्डिंग

यह समुद्री मछली में घ्राण संवेदनशीलता का आकलन करने के लिए सबसे मजबूत और संवेदनशील तरीका है क्योंकि यह सीएनएस द्वारा किसी भी प्रसंस्करण से पहले विशुद्ध रूप से संवेदी संकेत रिकॉर्ड करता है। इस तकनीक के मुख्य फायदे इसकी संवेदनशीलता है और इसे बाहरी लवणता से स्वतंत्र एक अलग वातावरण से आसानी से एक अलग प्रजाति में स्थानांतरित किया जा सकता है। नियंत्रण पानी तैयार करने के लिए, चारकोल-फ़िल्टर किए गए समुद्री जल का एक लीटर एकत्र करें और पीएच जांच के लिए पीएच जांच का उपयोग करें।

पीएच 8.2 के आसपास होना चाहिए। यदि ऐसा नहीं है, तो वायुमंडलीय हवा के साथ समुद्री जल को तब तक बुलबुला करें जब तक कि 8.2 का पीएच न पहुंच जाए। इसके बाद, पानी की क्षारीयता को मापने के लिए एक क्षारीयता टिटर का उपयोग करें, फिर पानी के तापमान और लवणता को मापें।

उच्च कार्बन डाइऑक्साइड के पानी को तैयार करने के लिए, वांछित पीएच तक पहुंचने तक कार्बन डाइऑक्साइड के साथ बुदबुदाने से पहले कण निष्क्रिय चारकोल फिल्टर के माध्यम से समुद्री जल के एक लीटर को फ़िल्टर करें। पीएच की जांच करने के लिए पीएच जांच का उपयोग करें, जो लगभग 7.7 होना चाहिए, फिर पानी की क्षारीयता को मापने और पानी के तापमान और लवणता को मापने के लिए एक क्षारीय टिटर का उपयोग करें। नियंत्रण और उच्च कार्बन डाइऑक्साइड के पानी दोनों में कार्बन डाइऑक्साइड के दबाव को निर्धारित करने के लिए, पानी में कार्बन डाइऑक्साइड के मापदंडों की गणना करने और इनपुट विंडो में पानी की लवणता, तापमान, दबाव, कुल क्षारीयता और पीएच मूल्यों को जोड़ने के लिए डिज़ाइन किया गया एक सॉफ्टवेयर प्रोग्राम खोलें।

फिर कार्बन डाइऑक्साइड के दबाव को निर्धारित करने के लिए स्थिरांक, तराजू और इकाइयों का चयन करें, और प्रक्रिया पर क्लिक करें। पूंछ चुटकी के लिए प्रतिक्रिया की कमी से sedation के एक उपयुक्त स्तर की पुष्टि करने के बाद, एक तकिया मॉडल के लिए अनुकूलित समर्थन पर एनेस्थेटाइज्ड मछली जगह है और मछली के मुंह में एक उचित आकार सिलिकॉन ट्यूब जगह है । ट्यूब एक पनडुब्बी पंप से जुड़ा हुआ है और वातित समुद्री जल और पानी युक्त संवेदनाहारी के एक जलाशय को लगभग 100 मिलीलीटर प्रति मिनट प्रति किलोग्राम दर में गिलों पर पंप किया जाता है।

इसके बाद, पार्श्व की मांसपेशी में एक अर्थिंग पिन डालें और पिन को एम्पलीफायर के सिर चरण से कनेक्ट करें। केवल सिर उजागर के साथ नम कपड़े के साथ मछली को कवर और नथुने के भीतर उत्तेजना वितरण प्रणाली के साथ ट्यूब की स्थिति । घ्राण नसों को बेनकाब करने के लिए, आंखों के बीच खोपड़ी की त्वचा और हड्डी को हटाने के लिए ड्रिल और विच्छेदन माइक्रोस्कोप का उपयोग करें।

समुद्री ब्रीम का उपयोग करते समय, आंखों के ठीक पीछे तक खोपड़ी के हिस्से को तुरंत हटाने के लिए एक परिपत्र देखा का उपयोग करें और आंखों के बीच हड्डी को हटाने के लिए ड्रिल का उपयोग करें। एक बार पर्याप्त हड्डी को मंजूरी दे दी गई है, नसों या जहाजों को नुकसान पहुंचाए बिना घ्राण नसों को ओवरलीटिंग वसा और संयोजी ऊतक को हटाने के लिए ठीक संदंश का उपयोग करें। इलेक्ट्रोड को तीन वोल्ट डीसी स्रोत के नकारात्मक ध्रुव से जोड़कर उपयोग करने से पहले साफ करें और 20 से 30 सेकंड के लिए शारीरिक नमकीन में टिप रखें।

छोटे बुलबुले की एक सतत धारा टिप से आ रही देखा जाना चाहिए। पैरिलीन-लेपित टंगस्टन इलेक्ट्रोड को बारी-बारी से वर्तमान एसी प्रीम्प्लिफायर के सिर चरण से कनेक्ट करें। एक बार घ्राण नसों को उजागर कर दिया गया है, माइक्रो जोड़तोड़ का उपयोग करने के लिए एक स्थिति है कि मानक और खाली करने के लिए एक ंयूनतम प्रतिक्रिया के लिए एक अधिकतम प्रतिक्रिया देता है में उपयुक्त घ्राण तंत्रिका में इलेक्ट्रोड डालने के लिए ।

विच्छेदन प्रदान करना सुचारू रूप से चला गया है, महत्वपूर्ण कदम सही स्थिति में इलेक्ट्रोड हो रही है । इसमें समय लग सकता है और इसमें कुछ हद तक परीक्षण और त्रुटि शामिल है। इलेक्ट्रोफिजियोलॉजिकल रीडिंग प्राप्त करने के लिए, एक प्रोत्साहन वितरण प्रणाली स्थापित करने के लिए एक सोनालिका संचालित तीन तरह के वाल्व का उपयोग करें ताकि पानी युक्त उत्तेजना में तेजी से स्विचन की अनुमति मिल सके और सामान्य आउटलेट को घ्राण रोसेट में पानी ले जाने वाली ट्यूब से जोड़ा जा सके।

पृष्ठभूमि समुद्री जल में एक पंक्ति रखें और दूसरी परीक्षण समाधान में। वाल्व ड्राइवर को एनालॉग डिजिटल कनवर्टर के ट्रिगर से कनेक्ट करें और ट्रिगर इवेंट में रिकॉर्डिंग शुरू करने और पूर्व निर्धारित अवधि के लिए जारी रखने के लिए सॉफ्टवेयर को कॉन्फ़िगर करें। तैयारी की स्थिरता की जांच करने के लिए, बार-बार एकीकृत प्रतिक्रिया के आयाम को रिकॉर्ड और मापने के लिए मानक के साथ एक मिनट लगातार उत्तेजनाओं के बीच बीतने की अनुमति देता है।

इसके बाद, नियंत्रण समुद्री जल में अमीनो एसिड के लिए घ्राण तंत्रिका प्रतिक्रियाओं को रिकॉर्ड करें, और एक मिनट को लगातार उत्तेजनाओं के बीच बीतने की अनुमति दें, फिर नियंत्रण पानी के खाली समाधान में नकारात्मक तीसरे मोलर सेरीन को एक बार 10 की प्रतिक्रिया रिकॉर्ड करें। फिर उच्च कार्बन डाइऑक्साइड समुद्री जल में अमीनो एसिड के लिए घ्राण तंत्रिका प्रतिक्रियाओं को रिकॉर्ड करें। एक उच्च कार्बन डाइऑक्साइड पानी खाली समाधान के लिए प्रतिक्रिया और एक नियंत्रण पानी खाली समाधान में नकारात्मक तीसरे मोलर सेरीन के लिए एक बार 10 के लिए प्रतिक्रिया ।

यहां, समुद्र ब्रीम की घ्राण तंत्रिका से दर्ज सकारात्मक और नकारात्मक नियंत्रण उत्तेजनाओं के लिए विशिष्ट प्रतिक्रियाएं दिखाई जाती हैं। उत्तेजना आवेदन के बारे में एक सेकंड के भीतर, गतिविधि में तेजी से वृद्धि आवास की अवधि के बाद देखा जा सकता है, जबकि उत्तेजना अभी भी मौजूद है और आधारभूत गतिविधि के लिए एक वापसी एक बार उत्तेजना समाप्त हो गया है । इसके विपरीत, एक खाली उत्तेजना कम या कोई प्रतिक्रिया उदाहरण भी देते हैं ।

इस विशिष्ट एकाग्रता प्रतिक्रिया वक्र में, यह देखा जा सकता है कि एक गंध की सांद्रता में वृद्धि गतिविधि में तेजी से बड़ी वृद्धि पैदा कर सकती है और इसलिए एकीकृत प्रतिक्रियाओं का आयाम हो सकता है। सामान्यीकृत डेटा और इसी रैखिक प्रतिगमन की साजिश रचने से प्रत्येक जानवर या जानवरों के समूह की एकाग्रता प्रतिक्रियाओं के लिए पता लगाने की सीमा का अनुमान लगाने की अनुमति मिलती है। सिग्मोइडल एकाग्रता प्रतिक्रिया घटता अर्द्ध logarithmically प्लॉट किया जा सकता है, गंध एकाग्रता की गणना की अनुमति है कि ५०% अधिकतम प्रतिक्रिया पर उदाहरण भी देते हैं ।

मछली को यथासंभव स्वस्थ रखना जरूरी है। उदाहरण के लिए, सुनिश्चित करें कि गिल पर्याप्त रूप से सिंचित हैं और रिकॉर्डिंग के दौरान घ्राण एपिथेलियम को गीला रखा जाता है। हमारे लक्ष्यों में से एक के लिए मस्तिष्क में तंत्रिका रास्तों का पता लगाने के लिए जहां संवेदी जानकारी रिले है ।