Name: an image guided transapical mitral valve leaflet puncture model of controlled volume overload from mitral regurgitation in the rat
Uploaded: 2020-05-19T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about An Image Guided Transapical Mitral Valve Leaflet Puncture Model of Controlled Volume Overload from Mitral Regurgitation in the Rat at JoVE.com

Dit werk werd gefinancierd door subsidie 19PRE34380625 en 14SDG20380081 van de American Heart Association naar D. Corporan en M. Padala respectievelijk, verleent HL135145, HL133667, en HL140325 van de National Institutes of Health aan M. Padala, en infrastructuur financiering van de Carlyle Fraser Heart Center op Emory University Hospital Midtown naar M. Padala.

De procedures werden goedgekeurd door het Animal Care and Use Program van Emory University onder het protocolnummer EM63Rr, goedkeuringsdatum 06/06/2017.
1. Prechirurgische bereiding
<ol><li>Stoom steriliseren chirurgische instrumenten voorafgaand aan de procedure.</li>
	<li>Op de dag van de procedure, overdracht ratten van huisvesting naar chirurgie, en weeg ze.</li>
	<li>Teken preoperatieve en postoperatieve geneesmiddelen op basis van het gewicht: twee doses Carprofen (elk 2,5 mg/kg), é?...

<ol>
	<li>Nkomo, V. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Burden+of+valvular+heart+diseases:+a+population-based+study.">Burden of valvular heart diseases: a population-based study.</a> Lancet. 368 (9540), 1005-1011 (2006).</li><li>Zamorano, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanism+and+Severity+of+Mitral+Regurgitation:+Are+There+any+Differences+Between+Primary+and+Secondary+Mitral+Regurgitation?.">Mechanism and Severity of Mitral Regurgitation: Are There any Differences Between Primary and Secondary Mitral Regurgitation?.</a> The Journal of Heart Valve Disease. 25 (6), 724-729 (2016).</li><li>Grossman, W., Jones, D., McLaurin, L. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wall+stress+and+patterns+of+hypertrophy+in+the+human+left+ventricle.">Wall stress and patterns of hypertrophy in the human left ventricle.</a> Journal of Clinical Investigation. 56 (1), 56-64 (1975).</li><li>Carabello, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Concentric+versus+eccentric+remodeling.">Concentric versus eccentric remodeling.</a> Journal of Cardiac Failure. 8 (6), S258-S263 (2002).</li><li>Braunwald, E., Welch, G. H., Sarnoff, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hemodynamic+effects+of+quantitatively+varied+experimental+mitral+regurgitation.">Hemodynamic effects of quantitatively varied experimental mitral regurgitation.</a> Circulation Research. 5 (5), 539-545 (1957).</li><li>Sasayama, S., Kubo, S., Kusukawa, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hemodynamic+and+angiocardiographic+studies+on+cardiodynamics:+experimental+mitral+insufficiency.">Hemodynamic and angiocardiographic studies on cardiodynamics: experimental mitral insufficiency.</a> Japanese Circulation Journal. 34 (6), 513-530 (1970).</li><li>Hennein, H., Jones, M., Stone, C., Clark, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Left+ventricular+function+in+experimental+mitral+regurgitation+with+intact+chordae+tendineae.">Left ventricular function in experimental mitral regurgitation with intact chordae tendineae.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 105 (4), 624-632 (1993).</li><li>Stumpe, K. O., S&#246;lle, H., Klein, H., Kr&#252;ck, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanism+of+sodium+and+water+retention+in+rats+with+experimental+heart+failure.">Mechanism of sodium and water retention in rats with experimental heart failure.</a> Kidney International. 4 (5), 309-317 (1973).</li><li>Abassi, Z., Goltsman, I., Karram, T., Winaver, J., Hoffman, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aortocaval+fistula+in+rat:+A+unique+model+of+volume-overload+congestive+heart+failure+and+cardiac+hypertrophy.">Aortocaval fistula in rat: A unique model of volume-overload congestive heart failure and cardiac hypertrophy.</a> Journal of Biomedicine and Biotechnology. 2011 (January), 1-13 (2011).</li><li>Corporan, D., Onohara, D., Hernandez-Merlo, R., Sielicka, A., Padala, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temporal+changes+in+myocardial+collagen,+matrix+metalloproteinases,+and+their+tissue+inhibitors+in+the+left+ventricular+myocardium+in+experimental+chronic+mitral+regurgitation+in+rodents.">Temporal changes in myocardial collagen, matrix metalloproteinases, and their tissue inhibitors in the left ventricular myocardium in experimental chronic mitral regurgitation in rodents.</a> American Journal of Physiology - Heart and Circulatory Physiology. 315 (5), H1269-H1278 (2018).</li><li>Onohara, D., Corporan, D., Hernandez-Merlo, R., Guyton, R. A., Padala, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitral+Regurgitation+Worsens+Cardiac+Remodeling+in+Ischemic+Cardiomyopathy+in+an+Experimental+Model.">Mitral Regurgitation Worsens Cardiac Remodeling in Ischemic Cardiomyopathy in an Experimental Model.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. , (2019).</li><li>Garcia, R., Diebold, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simple,+rapid,+and+effective+method+of+producing+aortocaval+shunts+in+the+rat.">Simple, rapid, and effective method of producing aortocaval shunts in the rat.</a> Cardiovascular Research. 24 (5), 430-432 (1990).</li><li>Brower, G. L., Janicki, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contribution+of+ventricular+remodeling+to+pathogenesis+of+heart+failure+in+rats.">Contribution of ventricular remodeling to pathogenesis of heart failure in rats.</a> American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 280 (2), H674-H683 (2001).</li><li>McCutcheon, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+changes+in+the+molecular+signature+of+adverse+left+ventricular+remodeling+in+patients+with+compensated+and+decompensated+chronic+primary+mitral+regurgitation.">Dynamic changes in the molecular signature of adverse left ventricular remodeling in patients with compensated and decompensated chronic primary mitral regurgitation.</a> Circulation Heart Failure. 12 (9), (2019).</li><li>McCutcheon, K., Manga, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Left+ventricular+remodeling+in+chronic+primary+mitral+regurgitation.">Left ventricular remodeling in chronic primary mitral regurgitation.</a> Cardiovascular Journal of Africa. 29 (1), 51-64 (2018).</li></ol>

Een reproduceerbaar knaagdiermodel van ernstige MR met een goede overleving (93,75% overleving na een operatie) en zonder significante postoperatieve complicaties wordt gemeld. Real-time beeldvorming met transoesofageale echocardiografie en introductie van een naald in het kloppende hart om de mitralisbijsluiter te doorboren is haalbaar en kan worden onderwezen. Ernstige MR werd geproduceerd met de 23 G naald grootte in deze studie, die kan worden gevarieerd zoals gewenst met behulp van een kleinere of grotere naald. MR ...

Mitralre regurgitatie (MR) is een gemeenschappelijke hartklep laesie, gediagnosticeerd in 1,7% van de algemene Amerikaanse bevolking en in 9% van de oudere bevolking ouder dan 65 jaar1. In deze hartklep laesie, onjuiste sluiting van de mitralisklep folders in systole, veroorzaakt regurgitatie van bloed uit de linker ventrikel in het linker atrium. MR kan optreden als gevolg van verschillende etiologieën; echter, primaire laesies van de mitralisklep (primaire MR) worden gediagnosticeerd en vaker behandeld in vergelijking met secundaire MR2. Geïsoleerde primaire MR is vaak een gevolg van myxomatous degeneratie van de mitralisklep, wat resulteert in verlenging van de folders of chordae tendineae, of breuk van sommige chordae, die allemaal bijdragen aan het verlies van systolische kolion tie van de klep.
MR als gevolg van dergelijke kleplaesies verheft het bloedvolume vullen van de linker ventrikel in elke hartslag, het verhogen van het einde diastolische muur stress en het verstrekken van een hemodynamische stressor die aanzet tot hartaanpassing en remodelleren. Cardiale remodelleren in deze laesie wordt vaak gekenmerkt door aanzienlijke kamervergroting3,4, milde wandhypertrofie, met een behouden contractiele functie voor langere tijd. Aangezien de uitwerpfractie vaak wordt bewaard, wordt correctie van MR met chirurgische of transkathetermiddelen vaak vertraagd, tot het begin van symptomen zoals dyspneu, hartfalen en hartritmestoornissen. Echter, ongecorrigeerde MR wordt geassocieerd met een hoog risico op cardiale bijwerkingen, hoewel momenteel kennis over de ultrastructurele veranderingen die ten grondslag liggen aan deze gebeurtenissen onbekend zijn.
Diermodellen van MR bieden een waardevol model om dergelijke ultrastructurele veranderingen in het hart te onderzoeken en de longitudinale progressie van de ziekte te bestuderen. Eerder hebben onderzoekers MR veroorzaakt bij grote dieren, waaronder varkens, honden en schapen, door het creëren van een externe venttriculo-atrialshunt5, intracardiale akkoordbreuk6, of bijsluiter perforatie7. Hoewel chirurgische technieken gemakkelijker zijn bij grote dieren, zijn deze studies beperkt tot subchronische follow-up in een kleine steekproefgrootte, vanwege de hoge kosten van het uitvoeren van dergelijke studies bij grote dieren. Bovendien is moleculaire analyse van weefsel uit deze modellen vaak een uitdaging vanwege beperkte soortenspecifieke antilichamen en geannoteerde genoombibliotheken voor uitlijning.
Kleine diermodellen van MR kunnen een geschikt alternatief bieden om deze kleplaesie en de impact ervan op de cardiale remodelleren te bestuderen. Historisch gezien is het rattenmodel van aorto-caval fistel (ACF) van cardiale volumeoverbelasting gebruikt. Voor het eerst beschreven in 1973 door Stumpe et al.8, een arterio-veneuze fistel is chirurgisch gemaakt om hoge druk arteriële bloed te omzeilen van de dalende aorta in de lage druk inferieure vena cava. De hoge stroomsnelheid in de fistel veroorzaakt een drastische overbelasting van het volume aan beide zijden van het hart, waardoor aanzienlijke rechter- en linkerventriculaire hypertrofie en disfunctie optreedt binnen enkele dagen na het creëren van de ACF9. Ondanks het succes bootst ACF de hemodynamica van MR niet na, een overbelasting van het lagedrukvolume, die voorbelasting verhoogt, maar ook de nabelasting vermindert. Vanwege dergelijke beperkingen van het ACF-model, hebben we geprobeerd om een model van MR te ontwikkelen en te karakteriseren dat de overbelasting van het lagedrukvolume beter nabootst.
Hierin beschrijven we het protocol voor een model van mitralisklep bijsluiter punctie om ernstige MR bij ratten10,,11te creëren. Een hypodermische naald werd geïntroduceerd in het kloppende rat hart, en geavanceerde in de voorste mitralisklep bijsluiter onder real-time echocardiografische begeleiding. De techniek is zeer reproduceerbaar en een relatief goed model dat MR nabootst zoals gezien bij patiënten. Mr ernst wordt gecontroleerd door de grootte van de naald die wordt gebruikt om de mitralisbijsluiter te perforeren en de ernst van MR kan worden beoordeeld met behulp van transoestale echocardiografie (TEE).

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>23G needle</td>
			<td>Mckesson</td>
			<td>16-N231</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>25G needle, 5/8 inch</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>1031797</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 vicryl</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>J496H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-0 prolene</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>8307H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>70% ethanol</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>350600</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ACE Light Source</td>
			<td>Schott</td>
			<td>A20500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ACUSON AcuNav Ultrasound probe</td>
			<td>Biosense Webster</td>
			<td>10135936</td>
			<td>8Fr Intracardiac echo probe</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ACUSON PRIME Ultrasound System</td>
			<td>Siemens</td>
			<td>SC2000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>1073829</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blunted microdissecting scissors</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS5990</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>99628</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carprofen</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>7847425</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chest tube (16G angiocath)</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>SR-OX1651CA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable Surgical drapes</td>
			<td>Med-Vet</td>
			<td>SMS40</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electric Razor</td>
			<td>Oster</td>
			<td>78400-XXX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gentamycin</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>78057791</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heat lamp with table clamp</td>
			<td>Braintree Scientific</td>
			<td>HL-1 120V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hemostatic forceps, curved</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS7341</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hemostatic forceps, straight</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS7110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Induction chamber</td>
			<td>Braintree Scientific</td>
			<td>EZ-1785</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Injection Plug, Cap, Luer Lock</td>
			<td>Exel</td>
			<td>26539</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>6679401725</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mechanical ventilator</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>Inspira ASV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microdissecting forceps</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS5135</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microdissecting spring scissors</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS5603</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle holder</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS6417</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>No. 15 surgical blade</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>1642</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Non-woven sponges</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>446036</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Otoscope</td>
			<td>Welch Allyn</td>
			<td>23862</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oxygen</td>
			<td>Airgas Healthcare</td>
			<td>UN1072</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pulse Oximeter</td>
			<td>Nonin Medical</td>
			<td>2500A VET</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Retractor, Blunt 4x4</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS6524</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rodent Surgical Monitor</td>
			<td>Indus Instruments</td>
			<td>113970</td>
			<td>The integrated platform allows for monitoring of vital signs and surgical warming</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scale</td>
			<td>Salter Brecknell</td>
			<td>LPS 150</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel Handle</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS9843</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silk suture 3-0</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>220263</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small Animal Anesthesia System</td>
			<td>Ohio Medical</td>
			<td>AKDL03882</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile saline (0.9%)</td>
			<td>Baxter</td>
			<td>281322</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sugical Mask</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>188696</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical cap</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>852952</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical gloves</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>854486</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe 10mL</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>1031801</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe 1mL</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>1031817</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultra-high frequency probe</td>
			<td>Fujifilm Visualsonics</td>
			<td>MS250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrasound gel</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>150690</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VEVO Ultrasound System</td>
			<td>Fujifilm Visualsonics</td>
			<td>VEVO 2100</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an image guided transapical mitral valve leaflet puncture model of controlled volume overload from mitral regurgitation in the rat

Mitralre oprisping (MR) is een veel voorkomende hartkleplaesie, die hartherstel veroorzaakt en leidt tot congestief hartfalen. Hoewel de risico's van ongecorrigeerde MR en de slechte prognose bekend zijn, worden de longitudinale veranderingen in hartfunctie, structuur en remodelleren onvolledig begrepen. Deze kenniskloof heeft ons begrip van de optimale timing voor MR-correctie beperkt, en het voordeel dat vroege versus late MR-correctie kan hebben op de linker ventrikel. Om de moleculaire mechanismen te onderzoeken die ten grondslag liggen aan de herbouw van ventriculaire ventriculaire ventriculaire in de setting van MR, zijn diermodellen noodzakelijk. Traditioneel is het aorto-caval fistelmodel gebruikt om volumeoverbelasting te veroorzaken, wat afwijkt van klinisch relevante laesies zoals MR. MR vertegenwoordigt een lagedrukvolumeoverbelasting hemodynamische stressor, die diermodellen vereist die deze aandoening nabootsen. Hierin beschrijven we een knaagdiermodel van ernstige MR waarbij de voorste bijsluiter van de ratmitralisklep is geperforeerd met een 23G-naald, in een kloppend hart, met echocardiografische beeldbegeleiding. De ernst van MR wordt beoordeeld en bevestigd met echocardiografie, en de reproduceerbaarheid van het model wordt gerapporteerd.

Haalbaarheid en reproduceerbaarheid Het voorgestelde MR-model is zeer reproduceerbaar, met een duidelijk gedefinieerd gat in de mitralisfolder die in 100% van de ratten die in deze studie worden gebruikt, wordt bereikt. Figuur 6A toont de richting van de naald als deze in de mitralisklep wordt ingebracht. Figuur 6B toont een gat in de mitralisklep bijsluiter van een representa...

Watch this Scientific Journal Video about An Image Guided Transapical Mitral Valve Leaflet Puncture Model of Controlled Volume Overload from Mitral Regurgitation in the Rat at JoVE.com

An Image Guided Transapical Mitral Valve Leaflet Puncture Model of Controlled Volume Overload from Mitral Regurgitation in the Rat

Een knaagdier model van linker hart volume overbelasting van mitralregurgitatie wordt gemeld. Mitralisregurgitatie van gecontroleerde ernst wordt veroorzaakt door het bevorderen van een naald van gedefinieerde afmetingen in de voorste bijsluiter van de mitralisklep, in een kloppend hart, met echografie.

Een beeld Geleid Transapical Mitral Valve Leaflet Punctie Model van controlled volume overbelasting van Mitral Regurgitation in de Rat

Mitral regurgitation (MR) is a widely prevalent heart valve lesion, which causes cardiac remodeling and leads to congestive heart failure. Though the ...

Mitralis regurgitatie is een veel voorkomende klepziekte die leidt tot hartfalen. Dit rat MR-model kan helpen om ons begrip van de onderliggende mechanismen van hartfalen te bevorderen. Dit model kan worden gebruikt om MR in een kloppend hart na te bootsen de hemodydynamica waargenomen bij patiënten met deze kleplaesie en het maken van dit model klinisch relevant.Microchirurgie en handling ervaring zal helpen bij het repliceren van dit protocol en vertrouwdheid met echocardiografische beeldvorming en beeldinterpretatie zijn belangrijke aspecten voor succesvolle plaatsing van naalden. Aangezien dit een beeldgestuurde techniek is, kan visuele demonstratie van de methoden helpen bij het begrijpen van de procedure. Na het uitvoeren van een linker thoracotomie volgens standaard protocollen in een verdoofde 350 tot 400 gram volwassen Sprague-Dawley rat, gebruik maken van een 6-0 PROLENE hechting en microneedle houder om een pursestring hechting te plaatsen op de top van de linker ventrikel.Voorzichtig tether de apicale hechting om de top te stabiliseren en steek een 23-gauge naald gespoeld met zout en met een stopcock aan het distale uiteinde in het midden van de pursestring hechting en in de linker ventriculaire holte. Met behulp van een hand om de naald stabiel te begeleiden, gebruik de andere hand om tegelijkertijd de trans oesofageale echosonde te manipuleren om een optimale echoweergave te bereiken voor het visualiseren van de naald. Met behulp van real-time echografie begeleiding, vooraf de naald in de richting van de ventriculaire kant van de voorste mitralisfolder.Zodra de naaldpositie is bevestigd, gaat u de naald in één fijne beweging door de klepfolder. Eenmaal door de bijsluiter, trek de naald in de linker ventriculaire kamer uit de buurt van de mitralisklep en hebben een assistent zet kleur Doppler beeldvorming om mr het aanpassen van de echo sonde te bevestigen als dat nodig is om een beter zicht te verkrijgen. Zodra de MR is bevestigd, trek je de naald volledig uit de linker ventriculaire holte en bind je de pursestring hechting voorzichtig vast.Gebruik vervolgens een steriel gaas om bloed op de top en in de borstholte te absorberen. Na vijf tot 10 minuten van stabiele hartfunctie, gebruik maken van een onderbroken 4-0 Vicryl hechting om de ribben benaderen terwijl het verminderen van de isoflurane tot 2%Vervolgens, steek een borstbuis in de zesde intercostale ruimte en zet de buis vast aan de steriele gordijnen om onbedoelde vooruitgang van de buis in de borstholte te voorkomen, dan afwerking ongeveer de ribben. Gebruik een continue hechting om de spierlaag met de isoflurane te sluiten op 1,5%en de huidlaag met de isoflurane op 1%Sluit een 10 milliliter Luer slotklep getipt spuit aan de borst buis en afvoer 10 tot 12 milliliter lucht uit de borstholte voor het verwijderen van de buis.Zodra de buis is verwijderd, toedienen van een laatste onderhuidse dosis Carprofen. Na het uitschakelen van het isoflurane, zet de mechanische ventilatie voort terwijl de rat spenen van de anesthesie die de vitale functies bewaakt. Bij het begin van spontane ademhaling, zet de ventilatie uit om het vermogen van de rat te testen om een dergelijke ademhaling en een goede perifere holte zuurstofverzadiging te behouden.Zodra de rat in staat is om perifere capillaire zuurstofverzadiging niveaus te handhaven zonder de ventilatie, snijd de verankering hechtingen aan de endotracheale buis en extubate het dier. Wanneer de rat ambulant is, breng het dier naar een schone kooi met minimale beddengoed en blijf de vitale functies te controleren met een handheld perifere capillaire zuurstofverzadiging monitor. Binnen drie uur na het ontwaken, dienen buprenorfine.Twee weken na de operatie plaatst u de verdoofde rat in de juiste decubituspositie en plaatst u een acht megahertz 8-Franse intracardiac ultrasone echografiesonde met een kleine hoeveelheid gel die op de punt in de slokdarm van het dier wordt aangebracht. Met behulp van kleur Doppler beeldvorming in de twee-kamer weergave, visualiseren de linker ventrikel en linker atrium en meet het gebied van de linker atrium en MR jet om de berekening van de MR straal gebied fractie mogelijk te maken zoals aangegeven. Om het gebied van de regurgitant opening te benaderen, gebruikt u de buitenste diameter van de naald om het gebied van 23-meter naald te berekenen met behulp van de formule.Verkrijg continue golf Doppler beeldvorming met de Doppler poort bij de opening van de regurgitant jet en traceer de golfvorm om de snelheid tijd integraal van de regurgitant jet berekenen. Gebruik de formule om het MR-volume te schatten. Draai vervolgens de echosonde zijwaarts met de klok mee om de beeldvorming van de longader te verkrijgen en de systolische en diastolische golfsnelheden te meten met behulp van de vergelijking om de verhouding te berekenen.In deze beelden kan de richting van de naald worden waargenomen als deze in de mitralisklep wordt ingebracht. Hier, het gat links in de mitralisklep folder in een representatieve rat uitbeplant op twee weken na de procedure wordt getoond. Na twee weken na de operatie zijn de harten van ratten met MR bolvormig en ernstig verwijd en is een levendige MR-straal zichtbaar met een gemiddeld gebied van ongeveer 21 vierkante millimeter en een gemiddelde snelheidstijd van ongeveer 40 centimeter.De genormaliseerde MR-fractie is meestal ongeveer 42%, wat wordt beschouwd als ernstig volgens de richtlijnen van de American Society of Echocardiography. De ernst van de MR is voldoende om de omkering van de longstroom te induceren met een afname van de systolische/diastolische ratio van ongeveer 0,9 bij aanvang tot ongeveer min 0,7 bij twee weken. Real-time beeldvorming met trans oesofageale echocardiografie en de introductie van een naald in het kloppende hart om de mitralisfolder te doorboren is een haalbare chirurgische ingreep die kan worden onderwezen.Ons model kan worden gecombineerd met ventriculaire cardiomyopathieën om cardiale remodellering te bestuderen en vergemakkelijkt het onderzoek naar de impact van het vroege begin versus het late begin van MR op cardiale remodellering.

Research

JoVE Journal

Medicine

High-frequency High-resolution Echocardiography: First Evidence on Non-invasive Repeated Measure of Myocardial Strain, Contractility, and Mitral Regurgitation in the Ischemia-reperfused Murine Heart

Hoogfrequente hoge resolutie Echocardiografie: eerste bewijs op niet-invasieve Herhaalde Maatregel van myocard Strain, contractiliteit, en mitralisinsufficiëntie in de Ischemie-reperfusie Murine Hart

Ischemia-reperfusion (IR) was surgically performed in murine hearts which were then subjected to repeated imaging to monitor temporal changes in ...

MRI-guided Disruption of the Blood-brain Barrier using Transcranial Focused Ultrasound in a Rat Model

MRI-geleide Verstoring van de bloed-hersen barrière met behulp van Transcraniële Focused Ultrasound in een ratmodel

Focused ultrasound (FUS) disruption of the blood-brain barrier (BBB) is an increasingly investigated technique for circumventing the BBB1-5. The BBB is a ...

Image-guided Convection-enhanced Delivery into Agarose Gel Models of the Brain

Image-guided-convectie verbeterde Levering in agarosegel Modellen van de hersenen

Convection-enhanced delivery (CED) has been proposed as a treatment option for a wide range of neurological diseases. Neuroinfusion catheter CED allows ...

Subclavian Vein Puncture As an Alternative Method of Blood Sample Collection in Rats

Subclavian ader punctie als een alternatieve methode van bloed monster collectie bij ratten

Blood collection with enough blood volume is essential in animal experiments. Blood collection from the tail vein of rats is popular and less stressful ...

A Simplified Stepwise Approach to Echo Guidance during Percutaneous Mitral Valve Repair

Een vereenvoudigde stapsgewijze benadering van echogeleiding tijdens percutane mitralisklepreparatie

Percutaneous transcatheter edge-to-edge reconstruction of the mitral valve is a safe and well-established therapy for severe symptomatic mitral ...

Four-Dimensional Computed Tomography-Guided Valve Sizing for Transcatheter Pulmonary Valve Replacement

Vierdimensionale computertomografiegeleide klepgrootte voor transkatheter pulmonale klepvervanging

The measurements of the right ventricle (RV) and pulmonary artery (PA), for selecting the optimal prosthesis size for transcatheter pulmonary valve ...

Transcatheter Pulmonary Valve Replacement from Autologous Pericardium with a Self-Expandable Nitinol Stent in an Adult Sheep Model

Transkatheter pulmonale klepvervanging van autoloog pericardium met een zelfuitbreidbare Nitinol-stent in een volwassen schapenmodel

Transcatheter pulmonary valve replacement has been established as a viable alternative approach for patients suffering from right ventricular outflow ...

Fully Endoscopic Mitral Valve Repair with Percutaneous Cannulation of Groin Vessels

Volledig endoscopische mitralisklepreparatie met percutane cannulatie van liesvaten

Endoscopic mitral valve surgery (EMS) has become a standard of care at specialized heart centers, further reducing surgical trauma compared to a ...

Modified Arteriovenous Fistula Surgery to Establish the RV Volume Overload Mouse Model

Establishment and Confirmation of a Postnatal Right Ventricular Volume Overload Mouse Model

Establishment and Confirmation of a Postnatal Right Ventricular Volume Overload Mouse Model (Video) | JoVE 

Opstelling en bevestiging van een postnataal muismodel met overbelasting van het rechterventrikelvolume

Right ventricular (RV) volume overload (VO) is common in children with congenital heart disease. In view of distinct developmental stages,the RV ...

Modified Heterotopic Abdominal Heart Transplantation and a Novel Aortic Regurgitation Model in Rats

Gemodificeerde heterotope abdominale harttransplantatie en een nieuw aorta-regurgitatiemodel bij ratten

Over the past 50 years, many researchers have reported heterotopic abdominal heart transplantation in mice and rats, with some variations in the surgical ...