Name: an image guided transapical mitral valve leaflet puncture model of controlled volume overload from mitral regurgitation in the rat
Uploaded: 2020-05-19T14:30:00
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Este trabalho foi financiado pela subvenção 19PRE34380625 e 14SDG20380081 da American Heart Association to D. Corporan e M. Padala, respectivamente, concede HL135145, HL133667 e HL140325 dos Institutos Nacionais de Saúde para M. Padala, e financiamento de infra-estrutura do Centro Cardíaco Carlyle Fraser no Emory University Hospital Midtown para M. Padala.

Os procedimentos foram aprovados pelo Programa de Cuidados e Uso de Animais da Universidade Emory sob o protocolo número EM63Rr, data de aprovação 06/06/2017.
1. Preparação pré-cirúrgica
<ol><li>O vapor esteriliza os instrumentos cirúrgicos antes do procedimento.</li>
	<li>No dia do procedimento, transfira ratos da casa para a cirurgia, e pese-os.</li>
	<li>Desenhe medicamentos pré-operatórios e pós-operatórios de acordo com o peso: duas doses de Carprofen (2,5 mg/kg cada), uma d...

<ol>
	<li>Nkomo, V. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Burden+of+valvular+heart+diseases:+a+population-based+study.">Burden of valvular heart diseases: a population-based study.</a> Lancet. 368 (9540), 1005-1011 (2006).</li><li>Zamorano, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanism+and+Severity+of+Mitral+Regurgitation:+Are+There+any+Differences+Between+Primary+and+Secondary+Mitral+Regurgitation?.">Mechanism and Severity of Mitral Regurgitation: Are There any Differences Between Primary and Secondary Mitral Regurgitation?.</a> The Journal of Heart Valve Disease. 25 (6), 724-729 (2016).</li><li>Grossman, W., Jones, D., McLaurin, L. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wall+stress+and+patterns+of+hypertrophy+in+the+human+left+ventricle.">Wall stress and patterns of hypertrophy in the human left ventricle.</a> Journal of Clinical Investigation. 56 (1), 56-64 (1975).</li><li>Carabello, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Concentric+versus+eccentric+remodeling.">Concentric versus eccentric remodeling.</a> Journal of Cardiac Failure. 8 (6), S258-S263 (2002).</li><li>Braunwald, E., Welch, G. H., Sarnoff, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hemodynamic+effects+of+quantitatively+varied+experimental+mitral+regurgitation.">Hemodynamic effects of quantitatively varied experimental mitral regurgitation.</a> Circulation Research. 5 (5), 539-545 (1957).</li><li>Sasayama, S., Kubo, S., Kusukawa, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hemodynamic+and+angiocardiographic+studies+on+cardiodynamics:+experimental+mitral+insufficiency.">Hemodynamic and angiocardiographic studies on cardiodynamics: experimental mitral insufficiency.</a> Japanese Circulation Journal. 34 (6), 513-530 (1970).</li><li>Hennein, H., Jones, M., Stone, C., Clark, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Left+ventricular+function+in+experimental+mitral+regurgitation+with+intact+chordae+tendineae.">Left ventricular function in experimental mitral regurgitation with intact chordae tendineae.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 105 (4), 624-632 (1993).</li><li>Stumpe, K. O., S&#246;lle, H., Klein, H., Kr&#252;ck, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanism+of+sodium+and+water+retention+in+rats+with+experimental+heart+failure.">Mechanism of sodium and water retention in rats with experimental heart failure.</a> Kidney International. 4 (5), 309-317 (1973).</li><li>Abassi, Z., Goltsman, I., Karram, T., Winaver, J., Hoffman, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aortocaval+fistula+in+rat:+A+unique+model+of+volume-overload+congestive+heart+failure+and+cardiac+hypertrophy.">Aortocaval fistula in rat: A unique model of volume-overload congestive heart failure and cardiac hypertrophy.</a> Journal of Biomedicine and Biotechnology. 2011 (January), 1-13 (2011).</li><li>Corporan, D., Onohara, D., Hernandez-Merlo, R., Sielicka, A., Padala, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temporal+changes+in+myocardial+collagen,+matrix+metalloproteinases,+and+their+tissue+inhibitors+in+the+left+ventricular+myocardium+in+experimental+chronic+mitral+regurgitation+in+rodents.">Temporal changes in myocardial collagen, matrix metalloproteinases, and their tissue inhibitors in the left ventricular myocardium in experimental chronic mitral regurgitation in rodents.</a> American Journal of Physiology - Heart and Circulatory Physiology. 315 (5), H1269-H1278 (2018).</li><li>Onohara, D., Corporan, D., Hernandez-Merlo, R., Guyton, R. A., Padala, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitral+Regurgitation+Worsens+Cardiac+Remodeling+in+Ischemic+Cardiomyopathy+in+an+Experimental+Model.">Mitral Regurgitation Worsens Cardiac Remodeling in Ischemic Cardiomyopathy in an Experimental Model.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. , (2019).</li><li>Garcia, R., Diebold, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simple,+rapid,+and+effective+method+of+producing+aortocaval+shunts+in+the+rat.">Simple, rapid, and effective method of producing aortocaval shunts in the rat.</a> Cardiovascular Research. 24 (5), 430-432 (1990).</li><li>Brower, G. L., Janicki, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contribution+of+ventricular+remodeling+to+pathogenesis+of+heart+failure+in+rats.">Contribution of ventricular remodeling to pathogenesis of heart failure in rats.</a> American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 280 (2), H674-H683 (2001).</li><li>McCutcheon, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+changes+in+the+molecular+signature+of+adverse+left+ventricular+remodeling+in+patients+with+compensated+and+decompensated+chronic+primary+mitral+regurgitation.">Dynamic changes in the molecular signature of adverse left ventricular remodeling in patients with compensated and decompensated chronic primary mitral regurgitation.</a> Circulation Heart Failure. 12 (9), (2019).</li><li>McCutcheon, K., Manga, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Left+ventricular+remodeling+in+chronic+primary+mitral+regurgitation.">Left ventricular remodeling in chronic primary mitral regurgitation.</a> Cardiovascular Journal of Africa. 29 (1), 51-64 (2018).</li></ol>

É relatado um modelo de roedor reprodutível de RM grave com boa sobrevida (93,75% de sobrevivência após a cirurgia) e sem complicações pós-operatórias significativas. Imagens em tempo real com ecocardiografia transesofágica e introdução de uma agulha no coração pulsante para perfurar o folheto mitral são viáveis e podem ser ensinadas. A RM grave foi produzida com o tamanho da agulha de 23 G neste estudo, que pode ser variado conforme desejado usando uma agulha menor ou maior. A RM induzida neste modelo cri...

A regurgitação mitral (RM) é uma lesão comum da válvula cardíaca, diagnosticada em 1,7% da população geral dos EUA e em 9% da população idosa maior que 65 anos1. Nesta lesão da válvula cardíaca, o fechamento inadequado dos folhetos da válvula mitral em sístole, causa regurgitação de sangue do ventrículo esquerdo no átrio esquerdo. A RM pode ocorrer devido a várias etiologias; no entanto, as lesões primárias da válvula mitral (RM primária) são diagnosticadas e tratadas com maior freqüência em comparação com a RM secundária2. A RM primária isolada é frequentemente resultado da degeneração miomatosa da válvula mitral, resultando em alongamento dos folhetos ou chordae tendineae, ou ruptura de alguns chordae, que contribuem para a perda de coaptação sistólica da válvula.
A RMr resultante dessas lesões da válvula eleva o volume sanguíneo preenchendo o ventrículo esquerdo em cada batimento cardíaco, aumentando o estresse da parede diastólica final e fornecendo um estressor hemodinâmico que incita a adaptação cardíaca e a remodelagem. A remodelagem cardíaca nesta lesão é frequentemente caracterizada por um alargamento significativo da câmara3,4, hipertrofia de parede leve, com função contratativa preservada por períodos prolongados de tempo. Uma vez que a fração de ejeção é frequentemente preservada, a correção da RM usando meios cirúrgicos ou transcateter é muitas vezes retardada, até o início de sintomas como dispnéia, insuficiência cardíaca e arritmias. No entanto, a RM não corrigida está associada a altos riscos de eventos adversos cardíacos, embora atualmente o conhecimento sobre as mudanças ultraestruturais subjacentes a esses eventos seja desconhecido.
Os modelos animais de RM fornecem um modelo valioso para investigar tais alterações ultraestruturais no coração, e estudar a progressão longitudinal da doença. Anteriormente, os pesquisadores induziram a RM em animais de grande porte, incluindo suínos, cães e ovelhas, criando um shunt ventriculo-atrial externo5, ruptura intracardíaca do acorde6, ou perforação defolheto7. Embora as técnicas cirúrgicas sejam mais fáceis em animais de grande porte, esses estudos têm sido limitados ao acompanhamento subcrônico em um pequeno tamanho amostral, devido aos altos custos de realização desses estudos em animais de grande porte. Além disso, a análise molecular dos tecidos desses modelos é muitas vezes desafiadora devido a anticorpos específicos de espécies limitadas e bibliotecas de genomas anotados para alinhamento.
Pequenos modelos animais de RM podem fornecer uma alternativa adequada para estudar esta lesão valvar e seu impacto na remodelagem cardíaca. Historicamente, o modelo de rato de fístula aorto-caval (ACF) de sobrecarga de volume cardíaco tem sido usado. Descrita pela primeira vez em 1973 por Stumpe et al.8, uma fístula arterio-venosa é cirurgicamente criada para contornar o sangue arterial de alta pressão da aorta descendente para a veia cava inferior de baixa pressão. A alta taxa de fluxo na fístula induz uma drástica sobrecarga de volume em ambos os lados do coração, causando hipertrofia ventricular direita e esquerda significativa e disfunção ocorrida dentro de dias após a criação do ACF9. Apesar de seu sucesso, a ACF não imita a hemodinâmica da RM, uma sobrecarga de volume de baixa pressão, que eleva a pré-carga, mas também reduz a pós-carga. Devido a tais limitações do modelo ACF, buscou-se desenvolver e caracterizar um modelo de RM que imitasse melhor a sobrecarga de volume de baixa pressão.
Aqui descrevemos o protocolo para um modelo de punção de folheto de válvula mitral para criar RM grave em ratos10,11. Uma agulha hipodérmica foi introduzida no coração de rato batendo, e avançou para o folheto da válvula mitral anterior sob orientação ecocardiográfica em tempo real. A técnica é altamente reproduzível e um modelo relativamente bom que imita a RM como visto em pacientes. A gravidade da RM é controlada pelo tamanho da agulha usada para perfurar o folheto mitral e a gravidade da RM pode ser avaliada utilizando-se a ecocardiografia transesofágica (TEE).

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>23G needle</td>
			<td>Mckesson</td>
			<td>16-N231</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>25G needle, 5/8 inch</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>1031797</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 vicryl</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>J496H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-0 prolene</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>8307H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>70% ethanol</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>350600</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ACE Light Source</td>
			<td>Schott</td>
			<td>A20500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ACUSON AcuNav Ultrasound probe</td>
			<td>Biosense Webster</td>
			<td>10135936</td>
			<td>8Fr Intracardiac echo probe</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ACUSON PRIME Ultrasound System</td>
			<td>Siemens</td>
			<td>SC2000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>1073829</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blunted microdissecting scissors</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS5990</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>99628</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carprofen</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>7847425</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chest tube (16G angiocath)</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>SR-OX1651CA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable Surgical drapes</td>
			<td>Med-Vet</td>
			<td>SMS40</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electric Razor</td>
			<td>Oster</td>
			<td>78400-XXX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gentamycin</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>78057791</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heat lamp with table clamp</td>
			<td>Braintree Scientific</td>
			<td>HL-1 120V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hemostatic forceps, curved</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS7341</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hemostatic forceps, straight</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS7110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Induction chamber</td>
			<td>Braintree Scientific</td>
			<td>EZ-1785</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Injection Plug, Cap, Luer Lock</td>
			<td>Exel</td>
			<td>26539</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>6679401725</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mechanical ventilator</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>Inspira ASV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microdissecting forceps</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS5135</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microdissecting spring scissors</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS5603</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle holder</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS6417</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>No. 15 surgical blade</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>1642</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Non-woven sponges</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>446036</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Otoscope</td>
			<td>Welch Allyn</td>
			<td>23862</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oxygen</td>
			<td>Airgas Healthcare</td>
			<td>UN1072</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pulse Oximeter</td>
			<td>Nonin Medical</td>
			<td>2500A VET</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Retractor, Blunt 4x4</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS6524</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rodent Surgical Monitor</td>
			<td>Indus Instruments</td>
			<td>113970</td>
			<td>The integrated platform allows for monitoring of vital signs and surgical warming</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scale</td>
			<td>Salter Brecknell</td>
			<td>LPS 150</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel Handle</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS9843</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silk suture 3-0</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>220263</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small Animal Anesthesia System</td>
			<td>Ohio Medical</td>
			<td>AKDL03882</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile saline (0.9%)</td>
			<td>Baxter</td>
			<td>281322</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sugical Mask</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>188696</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical cap</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>852952</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical gloves</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>854486</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe 10mL</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>1031801</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe 1mL</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>1031817</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultra-high frequency probe</td>
			<td>Fujifilm Visualsonics</td>
			<td>MS250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrasound gel</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>150690</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VEVO Ultrasound System</td>
			<td>Fujifilm Visualsonics</td>
			<td>VEVO 2100</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an image guided transapical mitral valve leaflet puncture model of controlled volume overload from mitral regurgitation in the rat

A regurgitação mitral (Mr) é uma lesão de válvula cardíaca amplamente prevalente, que causa remodelagem cardíaca e leva à insuficiência cardíaca congestiva. Embora os riscos de RM não corrigido e seu prognóstico ruim sejam conhecidos, as alterações longitudinais na função cardíaca, estrutura e remodelação são incompletamente compreendidas. Essa lacuna de conhecimento limitou nossa compreensão do tempo ideal para a correção da RM, e o benefício que a correção precoce versus tardia da RM pode ter no ventrículo esquerdo. Para investigar os mecanismos moleculares que estão por trás da remodelação ventricular esquerda no cenário da RM, modelos animais são necessários. Tradicionalmente, o modelo de fístula aorto-caval tem sido usado para induzir a sobrecarga de volume, que difere de lesões clinicamente relevantes, como mr. Mr. representa um estressor hemodinâmico de baixo volume de pressão, que requer modelos animais que imitam essa condição. Aqui, descrevemos um modelo de roedor de RM grave em que o folheto anterior da válvula mitral de rato é perfurado com uma agulha 23G, em um coração batendo, com orientação de imagem ecocardiográfica. A gravidade da RM é avaliada e confirmada com ecocardiografia, e a reprodutibilidade do modelo é relatada.

Viabilidade e reprodutibilidade O modelo de RM proposto é altamente reproduzível, com um orifício bem definido no folheto mitral alcançado em 100% dos ratos utilizados neste estudo. A Figura 6A retrata a direção da agulha como ela é inserida na válvula mitral. A Figura 6B retrata um furo no folheto da válvula mitral de um rato representativo explantado 2 semanas após...

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An Image Guided Transapical Mitral Valve Leaflet Puncture Model of Controlled Volume Overload from Mitral Regurgitation in the Rat

Um modelo de roedor de sobrecarga de volume do coração esquerdo da regurgitação mitral é relatado. A regurgitação mitral da gravidade controlada é induzida pelo avanço de uma agulha de dimensões definidas no folheto anterior da válvula mitral, em um coração pulsante, com orientação de ultrassom.

Um modelo de punção de folheto de válvula mitral transapical guiada por imagem de sobrecarga de volume controlada da regurgitação mitral no rato

Mitral regurgitation (MR) is a widely prevalent heart valve lesion, which causes cardiac remodeling and leads to congestive heart failure. Though the ...

A regurgitação mitral é uma doença comum da válvula que leva à insuficiência cardíaca. Este modelo de MR de rato pode ajudar a aprofundar nossa compreensão dos mecanismos subjacentes da insuficiência cardíaca. Este modelo pode ser usado para induzir mr em um coração batendo imitando a hemodinâmica observada em pacientes com esta lesão da válvula e tornando este modelo clinicamente relevante.A experiência de microcirurgia e manuseio ajudará na replicação deste protocolo e familiaridade com imagens ecocardiográficas e interpretação de imagem são aspectos fundamentais para a colocação bem sucedida da agulha. Por se trata de uma técnica guiada por imagens, a demonstração visual dos métodos pode auxiliar na compreensão do procedimento. Depois de realizar uma toracotomia esquerda de acordo com os protocolos padrão em um rato sprague-Dawley adulto de 350 a 400 gramas, use uma sutura PROLENE 6-0 e um suporte de microagulé para colocar uma sutura de corda de bolsa no ápice do ventrículo esquerdo.Amarre suavemente a sutura apical para estabilizar o ápice e insira uma agulha de calibre 23 lavada com soro fisiológico e com uma torneira na extremidade distal no centro da sutura de corda e na cavidade ventricular esquerda. Usando uma mão para guiar a agulha, use a outra mão para manipular simultaneamente a sonda transesofágica de eco para obter uma visão de eco ideal para visualizar a agulha. Usando orientação de ultrassom em tempo real, avance a agulha em direção ao lado ventricular do folheto mitral anterior.Uma vez confirmada a posição da agulha, avance a agulha em um movimento fino através do folheto da válvula. Uma vez através do folheto, retire a agulha na câmara ventricular esquerda longe da válvula mitral e tenha um assistente ligando a imagem do Doppler colorida para confirmar o sr ajustado da sonda de eco conforme necessário para obter uma melhor visão. Uma vez confirmado o MR, retraia totalmente a agulha da cavidade ventricular esquerda e amarre suavemente a sutura de corda de bolsa.Em seguida, use uma gaze estéril para absorver qualquer sangue no ápice e na cavidade torácica. Após cinco a 10 minutos de função cardíaca estável, use uma sutura vicríl interrompida 4-0 para aproximar as costelas enquanto reduz a isofluree para 2%Em seguida, insira um tubo torácico no sexto espaço intercostal e fixe o tubo nas cortinas estéreis para evitar o avanço inadvertido do tubo na cavidade torácica, em seguida, finalize aproximando as costelas. Use uma sutura contínua para fechar a camada muscular com a isoflurano a 1,5% e a camada de pele com o isoflurane a 1%Conecte uma seringa de bloqueio de 10 mililitros de luter inclinada ao tubo torácico e drene de 10 a 12 mililitros de ar da cavidade torácica antes de remover o tubo.Uma vez que o tubo é removido, administre uma dose subcutânea final de Carprofen. Depois de desligar o isoflurano, continue a ventilação mecânica enquanto o rato desmamaia da anestesia monitorando os sinais vitais. No início da respiração espontânea, desligue a ventilação para testar a capacidade do rato de manter tal respiração e uma boa saturação de oxigênio da cavidade periférica.Uma vez que o rato é capaz de manter os níveis de saturação de oxigênio capilar periférico sem a ventilação, corte as suturas de ancoragem para o tubo endotraqueal e extubar o animal. Quando o rato estiver ambulatorial, transfira o animal para uma gaiola limpa com roupas de cama mínimas e continue monitorando os sinais vitais com um monitor de saturação de oxigênio capilar periférico portátil. Três horas depois de acordar, administre buprenorfina.Duas semanas após a cirurgia, coloque o rato anestesiado na posição de decúbito direito e insira uma sonda de ultrassom intracardiac de oito mega-hertz 8-francês com uma pequena quantidade de gel aplicada na ponta no esôfago do animal. Utilizando imagens doppler coloridas na visão de duas câmaras, visualize o ventrículo esquerdo e o átrio esquerdo e meça a área do átrio esquerdo e do jato MR para permitir o cálculo da fração da área do jato MR, conforme indicado. Para aproximar a área do orifício regurgitante, use o diâmetro externo da agulha para calcular a área de agulha de calibre 23 utilizando a fórmula.Obtenha imagens de doppler de onda contínua com o portão Doppler no orifício do jato regurgitante e rastreie a forma de onda para calcular o tempo de velocidade integral do jato regurgitante. Use a fórmula para estimar o volume mr. Em seguida, gire a sonda eco lateralmente no sentido horário para obter a imagem do Doppler da veia pulmonar e meça as velocidades de onda sistólica e diastólica usando a equação para calcular a razão.Nestas imagens, pode-se observar a direção da agulha ao ser inserida na válvula mitral. Aqui, o orifício deixado no folheto da válvula mitral em um rato representativo explantado duas semanas após o procedimento é mostrado. Em duas semanas após a cirurgia, os corações de ratos com Mr são esféricos e severamente dilatados e um jato mr vívido é aparente com uma área média de cerca de 21 milímetros quadrados e um tempo médio de velocidade integral de cerca de 40 centímetros.A fração de MR normalizada é tipicamente de cerca de 42%, o que é considerado grave de acordo com as diretrizes da Sociedade Americana de Ecocardiografia. A gravidade do MR é adequada para induzir a reversão do fluxo pulmonar com uma diminuição na relação sistólica/diastólica de cerca de 0,9 na linha de base para aproximadamente menos 0,7 em duas semanas. A imagem em tempo real com ecocardiografia transesofágica e a introdução de uma agulha no coração batendo para perfurar o folheto mitral é um procedimento cirúrgico viável que pode ser ensinado.Nosso modelo pode ser combinado com cardiomiopatias ventriculares para estudar a remodelagem cardíaca e facilita a investigação do impacto do início precoce versus início tardio do MR na remodelagem cardíaca.

Research

JoVE Journal

Medicine

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De alta freqüência Ecocardiografia de alta resolução: primeira evidência de não-invasivos Medida repetida de Strain miocárdico, contratilidade, e regurgitação mitral no coração Isquemia-reperfundidos murino

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Medicina

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Dimensionamento da válvula guiada por tomografia computadorizada quadridimensional para substituição da válvula pulmonar transcateter

The measurements of the right ventricle (RV) and pulmonary artery (PA), for selecting the optimal prosthesis size for transcatheter pulmonary valve ...

Transcatheter Pulmonary Valve Replacement from Autologous Pericardium with a Self-Expandable Nitinol Stent in an Adult Sheep Model

Substituição da válvula pulmonar transcateter de pericárdio autólogo com um Stent nitinol auto-expansível em um modelo de ovelha adulto

Transcatheter pulmonary valve replacement has been established as a viable alternative approach for patients suffering from right ventricular outflow ...

Fully Endoscopic Mitral Valve Repair with Percutaneous Cannulation of Groin Vessels

Plástica Totalmente Endoscópica da Valva Mitral com Canulação Percutânea dos Vasos da Virilha

Endoscopic mitral valve surgery (EMS) has become a standard of care at specialized heart centers, further reducing surgical trauma compared to a ...

Modified Arteriovenous Fistula Surgery to Establish the RV Volume Overload Mouse Model

Establishment and Confirmation of a Postnatal Right Ventricular Volume Overload Mouse Model

Establishment and Confirmation of a Postnatal Right Ventricular Volume Overload Mouse Model (Video) | JoVE 

Estabelecimento e Confirmação de um Modelo de Sobrecarga de Volume do Ventrículo Direito Pós-Natal em Camundongos

Right ventricular (RV) volume overload (VO) is common in children with congenital heart disease. In view of distinct developmental stages,the RV ...

Modified Heterotopic Abdominal Heart Transplantation and a Novel Aortic Regurgitation Model in Rats

Transplante Cardíaco Heterotópico Abdominal Modificado e um Novo Modelo de Regurgitação Aórtica em Ratos

Over the past 50 years, many researchers have reported heterotopic abdominal heart transplantation in mice and rats, with some variations in the surgical ...