Name: an image guided transapical mitral valve leaflet puncture model of controlled volume overload from mitral regurgitation in the rat
Uploaded: 2020-05-19T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about An Image Guided Transapical Mitral Valve Leaflet Puncture Model of Controlled Volume Overload from Mitral Regurgitation in the Rat at JoVE.com

Detta arbete finansierades av bidrag 19PRE34380625 och 14SDG20380081 från American Heart Association till D. Corporan och M. Padala respektive, bidrag HL135145, HL133667, och HL140325 från National Institutes of Health till M. Padala, och infrastruktur finansiering från Carlyle Fraser Heart Center vid Emory University Hospital Midtown till M. Padala.

Förfarandena godkändes av Animal Care and Use Program vid Emory University under protokollnummer EM63Rr, godkännandedatum 2017-06-06.
1. Förkirurgisk förberedelse
<ol><li>Ångsterilisera kirurgiska instrument före ingreppet.</li>
	<li>På ingreppsdagen, överföra råttor från bostäder till kirurgi, och väga dem.</li>
	<li>Dra preoperativa och postoperativa läkemedel efter vikt: två doser carprofen (2,5 mg/kg vardera), en dos Gentamycin (6 mg/kg) och en dos Buprenorfin (0,02 mg/kg...

<ol>
	<li>Nkomo, V. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Burden+of+valvular+heart+diseases:+a+population-based+study.">Burden of valvular heart diseases: a population-based study.</a> Lancet. 368 (9540), 1005-1011 (2006).</li><li>Zamorano, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanism+and+Severity+of+Mitral+Regurgitation:+Are+There+any+Differences+Between+Primary+and+Secondary+Mitral+Regurgitation?.">Mechanism and Severity of Mitral Regurgitation: Are There any Differences Between Primary and Secondary Mitral Regurgitation?.</a> The Journal of Heart Valve Disease. 25 (6), 724-729 (2016).</li><li>Grossman, W., Jones, D., McLaurin, L. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wall+stress+and+patterns+of+hypertrophy+in+the+human+left+ventricle.">Wall stress and patterns of hypertrophy in the human left ventricle.</a> Journal of Clinical Investigation. 56 (1), 56-64 (1975).</li><li>Carabello, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Concentric+versus+eccentric+remodeling.">Concentric versus eccentric remodeling.</a> Journal of Cardiac Failure. 8 (6), S258-S263 (2002).</li><li>Braunwald, E., Welch, G. H., Sarnoff, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hemodynamic+effects+of+quantitatively+varied+experimental+mitral+regurgitation.">Hemodynamic effects of quantitatively varied experimental mitral regurgitation.</a> Circulation Research. 5 (5), 539-545 (1957).</li><li>Sasayama, S., Kubo, S., Kusukawa, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hemodynamic+and+angiocardiographic+studies+on+cardiodynamics:+experimental+mitral+insufficiency.">Hemodynamic and angiocardiographic studies on cardiodynamics: experimental mitral insufficiency.</a> Japanese Circulation Journal. 34 (6), 513-530 (1970).</li><li>Hennein, H., Jones, M., Stone, C., Clark, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Left+ventricular+function+in+experimental+mitral+regurgitation+with+intact+chordae+tendineae.">Left ventricular function in experimental mitral regurgitation with intact chordae tendineae.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 105 (4), 624-632 (1993).</li><li>Stumpe, K. O., S&#246;lle, H., Klein, H., Kr&#252;ck, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanism+of+sodium+and+water+retention+in+rats+with+experimental+heart+failure.">Mechanism of sodium and water retention in rats with experimental heart failure.</a> Kidney International. 4 (5), 309-317 (1973).</li><li>Abassi, Z., Goltsman, I., Karram, T., Winaver, J., Hoffman, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aortocaval+fistula+in+rat:+A+unique+model+of+volume-overload+congestive+heart+failure+and+cardiac+hypertrophy.">Aortocaval fistula in rat: A unique model of volume-overload congestive heart failure and cardiac hypertrophy.</a> Journal of Biomedicine and Biotechnology. 2011 (January), 1-13 (2011).</li><li>Corporan, D., Onohara, D., Hernandez-Merlo, R., Sielicka, A., Padala, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temporal+changes+in+myocardial+collagen,+matrix+metalloproteinases,+and+their+tissue+inhibitors+in+the+left+ventricular+myocardium+in+experimental+chronic+mitral+regurgitation+in+rodents.">Temporal changes in myocardial collagen, matrix metalloproteinases, and their tissue inhibitors in the left ventricular myocardium in experimental chronic mitral regurgitation in rodents.</a> American Journal of Physiology - Heart and Circulatory Physiology. 315 (5), H1269-H1278 (2018).</li><li>Onohara, D., Corporan, D., Hernandez-Merlo, R., Guyton, R. A., Padala, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitral+Regurgitation+Worsens+Cardiac+Remodeling+in+Ischemic+Cardiomyopathy+in+an+Experimental+Model.">Mitral Regurgitation Worsens Cardiac Remodeling in Ischemic Cardiomyopathy in an Experimental Model.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. , (2019).</li><li>Garcia, R., Diebold, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simple,+rapid,+and+effective+method+of+producing+aortocaval+shunts+in+the+rat.">Simple, rapid, and effective method of producing aortocaval shunts in the rat.</a> Cardiovascular Research. 24 (5), 430-432 (1990).</li><li>Brower, G. L., Janicki, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contribution+of+ventricular+remodeling+to+pathogenesis+of+heart+failure+in+rats.">Contribution of ventricular remodeling to pathogenesis of heart failure in rats.</a> American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 280 (2), H674-H683 (2001).</li><li>McCutcheon, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+changes+in+the+molecular+signature+of+adverse+left+ventricular+remodeling+in+patients+with+compensated+and+decompensated+chronic+primary+mitral+regurgitation.">Dynamic changes in the molecular signature of adverse left ventricular remodeling in patients with compensated and decompensated chronic primary mitral regurgitation.</a> Circulation Heart Failure. 12 (9), (2019).</li><li>McCutcheon, K., Manga, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Left+ventricular+remodeling+in+chronic+primary+mitral+regurgitation.">Left ventricular remodeling in chronic primary mitral regurgitation.</a> Cardiovascular Journal of Africa. 29 (1), 51-64 (2018).</li></ol>

En reproducerbar gnagare modell av svår MR med god överlevnad (93,75% överlevnad efter operation) och utan betydande postoperativa komplikationer rapporteras. Realtid imaging med transesophageal ekokardiografi och införandet av en nål i det bultande hjärtat att punktera mitral broschyren är genomförbara och kan läras ut. Svår MR producerades med 23 G nålstorlek i denna studie, som kan varieras efter önskemål med hjälp av en mindre eller större nål. MR inducerad i denna modell skapar ett lågt tryck volym ...

Mitral uppstötningar (MR) är en vanlig hjärtklaff lesion, diagnostiseras i 1,7% av den allmänna amerikanska befolkningen och i 9% av den äldre befolkningen större än 65 år1. I denna hjärtklaff lesion, felaktig stängning av mitralisklaffen broschyrer i systole, orsakar uppstötningar av blod från den vänstra ventrikeln i det vänstra atriumet. MR kan uppstå på grund av olika etiologier; Primära lesioner i mitralventilen (primär MR) diagnostiseras och behandlas dock oftare jämfört med sekundär MR2. Isolerade primära MR är ofta ett resultat av myxomatous degeneration av mitralisklaffen, vilket resulterar i förlängning av broschyrer eller chordae tendineae, eller bristning av vissa chordae, som alla bidrar till förlusten av systolisk coaptation av ventilen.
MR till följd av sådana ventil skador höjer blodvolymen fylla den vänstra ventrikeln i varje hjärtslag, öka slutet diastolisk vägg stress och ger en hemodynamisk stressfaktor som uppmuntrar hjärt anpassning och remodeling. Hjärt remodeling i denna lesion kännetecknas ofta av betydande kammare utvidgningen3,4, mild vägg hypertrofi, med bevarade contractile funktion under längre tidsperioder. Eftersom utmatningsfraktionen ofta bevaras, är korrigering av MR med kirurgiska eller transkateter medel ofta försenas, tills uppkomsten av symtom som dyspné, hjärtsvikt, och arytmier. Emellertid, okorrigerad MR är associerad med höga risker för hjärt biverkningar, men för närvarande kunskap om de strukturella förändringar som ligger till grund för dessa händelser är okända.
Djurmodeller av MR ger en värdefull modell för att undersöka sådana strukturella förändringar i hjärtat, och studera longitudinell progression av sjukdomen. Tidigare har forskare framkallat MR hos stora djur inklusive grisar, hundar och får, genom att skapa en extern ventriculo-atrial shunt5, intracardiac chordal rupture6, eller broschyr perforering7. Medan kirurgiska tekniker är lättare hos stora djur, dessa studier har begränsats till sub-kronisk uppföljning i ett litet urval storlek, på grund av de höga kostnaderna för att utföra sådana studier på stora djur. Dessutom är molekylär analys av vävnad från dessa modeller ofta utmanande på grund av begränsade artspecifika antikroppar och kommenterade genombibliotek för anpassning.
Små djurmodeller av MR kan ge ett lämpligt alternativ för att studera denna ventilskada och dess inverkan på hjärtremodeling. Historiskt sett har råtta modell av aorto-caval fistel (ACF) av hjärt volym överbelastning använts. Först beskrivs i 1973 av Stumpe et al.8, en arterio-venous fistel skapas kirurgiskt för att kringgå högt tryck kranskärlens blod från fallande stora kroppspulsådern i lågtryck sämre vena cava. Den höga flödet i fisteln inducerar en drastisk volym överbelastning på båda sidor av hjärtat, orsakar betydande höger och vänster Ventrikulärt hypertrofi och dysfunktion inträffar inom några dagar för att skapa ACF9. Trots sin framgång, ACF inte efterlikna hemodynamics av MR, ett lågt tryck volym överbelastning, som höjer förspänning men också minskar efterlast. På grund av sådana begränsningar av ACF-modellen, försökte vi utveckla och karakterisera en modell av MR som bättre härmar lågtrycksvolymen överbelastning.
Häri beskriver vi protokollet för en modell av mitralisklaffsblad punktering för att skapa svår MR hos råttor10,11. En hypodermisk nål infördes i bultande råtta hjärtat och avancerade i främre mitral valve broschyr under realtid ekokardiografiska vägledning. Tekniken är mycket reproducerbar och en relativt bra modell som härmar MR som ses hos patienter. MR svårighetsgrad styrs av storleken på nålen som används för att perforera mitral bipacksedeln och svårighetsgraden av MR kan bedömas med hjälp av transesophageal ekokardiografi (TEE).

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>23G needle</td>
			<td>Mckesson</td>
			<td>16-N231</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>25G needle, 5/8 inch</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>1031797</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 vicryl</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>J496H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-0 prolene</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>8307H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>70% ethanol</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>350600</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ACE Light Source</td>
			<td>Schott</td>
			<td>A20500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ACUSON AcuNav Ultrasound probe</td>
			<td>Biosense Webster</td>
			<td>10135936</td>
			<td>8Fr Intracardiac echo probe</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ACUSON PRIME Ultrasound System</td>
			<td>Siemens</td>
			<td>SC2000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>1073829</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blunted microdissecting scissors</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS5990</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>99628</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carprofen</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>7847425</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chest tube (16G angiocath)</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>SR-OX1651CA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable Surgical drapes</td>
			<td>Med-Vet</td>
			<td>SMS40</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electric Razor</td>
			<td>Oster</td>
			<td>78400-XXX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gentamycin</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>78057791</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heat lamp with table clamp</td>
			<td>Braintree Scientific</td>
			<td>HL-1 120V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hemostatic forceps, curved</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS7341</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hemostatic forceps, straight</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS7110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Induction chamber</td>
			<td>Braintree Scientific</td>
			<td>EZ-1785</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Injection Plug, Cap, Luer Lock</td>
			<td>Exel</td>
			<td>26539</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>6679401725</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mechanical ventilator</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>Inspira ASV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microdissecting forceps</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS5135</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microdissecting spring scissors</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS5603</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle holder</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS6417</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>No. 15 surgical blade</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>1642</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Non-woven sponges</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>446036</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Otoscope</td>
			<td>Welch Allyn</td>
			<td>23862</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oxygen</td>
			<td>Airgas Healthcare</td>
			<td>UN1072</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pulse Oximeter</td>
			<td>Nonin Medical</td>
			<td>2500A VET</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Retractor, Blunt 4x4</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS6524</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rodent Surgical Monitor</td>
			<td>Indus Instruments</td>
			<td>113970</td>
			<td>The integrated platform allows for monitoring of vital signs and surgical warming</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scale</td>
			<td>Salter Brecknell</td>
			<td>LPS 150</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel Handle</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS9843</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silk suture 3-0</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>220263</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small Animal Anesthesia System</td>
			<td>Ohio Medical</td>
			<td>AKDL03882</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile saline (0.9%)</td>
			<td>Baxter</td>
			<td>281322</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sugical Mask</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>188696</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical cap</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>852952</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical gloves</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>854486</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe 10mL</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>1031801</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe 1mL</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>1031817</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultra-high frequency probe</td>
			<td>Fujifilm Visualsonics</td>
			<td>MS250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrasound gel</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>150690</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VEVO Ultrasound System</td>
			<td>Fujifilm Visualsonics</td>
			<td>VEVO 2100</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an image guided transapical mitral valve leaflet puncture model of controlled volume overload from mitral regurgitation in the rat

Mitral uppstötningar (MR) är en utbredd hjärtklaff lesion, som orsakar hjärt remodeling och leder till hjärtsvikt. Även om riskerna för okorrigerad MR och dess dåliga prognos är kända, är de longitudinella förändringarna i hjärtfunktion, struktur och ombyggnad ofullständigt förstådda. Denna kunskap gap har begränsat vår förståelse av den optimala tidpunkten för MR korrigering, och den fördel som tidigt kontra sent MR korrigering kan ha på vänster kammare. För att undersöka de molekylära mekanismer som ligger bakom vänster Ventrikulärt ombyggnad i inställningen av MR, djurmodeller är nödvändiga. Traditionellt har aorto-caval fistel modellen använts för att inducera volym överbelastning, som skiljer sig från kliniskt relevanta skador såsom MR MR representerar ett lågt tryck volym överbelastning hemodynamic stressor, som kräver djurmodeller som efterliknar detta villkor. Häri beskriver vi en gnagare modell av allvarliga MR där den främre broschyren av råtta mitral valvet är perforerad med en 23G nål, i ett bultande hjärta, med echocardiographic bild vägledning. Svårighetsgraden av MR bedöms och bekräftas med ekokardiografi, och reproducerbarheten av modellen rapporteras.

Genomförbarhet och reproducerbarhet Den föreslagna MR-modellen är mycket reproducerbar, med ett väldefinierat hål i mitralbroschyren som uppnåddes hos 100 % av de råttor som används i denna studie. Figur 6A visar nålens riktning när den sätts in i mitralventilen. Figur 6B visar ett hål i mitralventilen broschyr från en representativ råtta explanted vid 2 veckor e...

Watch this Scientific Journal Video about An Image Guided Transapical Mitral Valve Leaflet Puncture Model of Controlled Volume Overload from Mitral Regurgitation in the Rat at JoVE.com

An Image Guided Transapical Mitral Valve Leaflet Puncture Model of Controlled Volume Overload from Mitral Regurgitation in the Rat

En gnagare modell av vänstra hjärtat volym överbelastning från mitral uppstötningar rapporteras. Mitral uppstötningar av kontrollerad svårighetsgrad induceras genom att främja en nål av definierade dimensioner i den främre broschyren av mitralisklaffen, i ett bultande hjärta, med ultraljud vägledning.

En bild guidad transapical Mitral Valve Leaflet Punktering modell av kontrollerad volym överbelastning från Mitral Uppstötningar i Råtta

Mitral regurgitation (MR) is a widely prevalent heart valve lesion, which causes cardiac remodeling and leads to congestive heart failure. Though the ...

Mitral uppstötning är en vanlig ventilsjukdom som leder till hjärtsvikt. Denna råtta MR-modell kan bidra till att främja vår förståelse av de underliggande mekanismerna för hjärtsvikt. Denna modell kan användas för att inducera MR i en slående hjärta härma hemodynamics observerats hos patienter med denna ventil lesion och gör denna modell kliniskt relevant.Microsurgery och hantering erfarenhet kommer att hjälpa till med att replikera detta protokoll och förtrogenhet med echocardiographic bildbehandling och bild tolkning är viktiga aspekter för framgångsrik nål placering. Eftersom detta är en bildstyrd teknik, visuell demonstration av metoderna kan stöd för att förstå förfarandet. Efter att ha utfört en vänster thoracotomy enligt standardprotokoll i en sövd 350 till 400 gram vuxna Sprague-Dawley råtta, använd en 6-0 PROLENE sutur och microneedle hållare att placera en pursestring suture på spetsen av vänster kammare.Försiktigt tjudra den apikala suturen för att stabilisera apex och sätt in en 23 gauge nål spolas med saltlösning och med en stopcock vid den distala änden i mitten av pursestring sutur och in i den vänstra ventrikulärt hålighet. Använda en hand för att stabilt styra nålen, använd den andra handen för att samtidigt manipulera transesofageal eko sond för att uppnå en optimal ekovy för visualisering av nålen. Med hjälp av realtids ultraljud vägledning, föra nålen mot ventrikulärt sidan av den främre mitral bipacksedeln.När nålläget är bekräftat, för nålen i en fin rörelse genom ventilbroschyren. En gång genom bipacksedeln, dra in nålen i den vänstra ventrikulära kammaren bort från mitralklaffen och har en assistent slå på färg Doppler bildframställning för att bekräfta MR justera ekot sonden som behövs för att få en bättre vy. När MR är bekräftat, helt tillbaka nålen från vänster ventrikulärt hålighet och försiktigt binda pursestring suture.Använd sedan en steril gasväv för att absorbera eventuellt blod på toppen och i brösthålan. Efter fem till 10 minuter av stabil hjärt funktion, använd en avbruten 4-0 Vicryl sutur att approximera revbenen samtidigt minska isofluran till 2%Nästa, sätt in ett bröströr i den sjätte intercostal utrymme och säkra röret till de sterila draperier för att undvika oavsiktliga avancemang av röret i brösthålan, sedan avsluta approximera revbenen. Använd en kontinuerlig sutur för att stänga muskellagret med isofluranen vid 1,5%och hudlagret med isofluranen vid 1%Anslut en luerlåsventil på 10 milliliter till bröströret och dränera 10 till 12 milliliter luft från brösthålan innan du tar bort röret.När röret har avlägsnats administrerar du en slutlig subkutan dos av Carprofen. Efter att ha vridt av isofluranen, fortsätt den mekaniska ventilationen medan råttan avvänjer från anestesin som övervakar vitala tecken. Vid början av spontan andning, stäng av ventilationen för att testa råttans förmåga att upprätthålla sådan andning och en bra perifer hålighet syremättnad.När råttan har möjlighet att upprätthålla perifera kapillär syremättnad nivåer utan ventilation, skär ankring suturer till endotrakeal röret och extubate djuret. När råttan är ambulatorisk, överför djuret till en ren bur med minimalt strö och fortsätt att övervaka vitala tecken med en handhållen perifer kapillär syremättnad monitor. Inom tre timmar efter att vakna, administrera buprenorfin.Två veckor efter operationen, placera den sövda råttan i rätt decubitus position och infoga en åtta megahertz 8-franska intracardiac ultraljud sond med en liten mängd gel tillämpas på spetsen i matstrupen av djuret. Använda färg Doppler avbildning i två-kammarvyn, visualisera vänster kammare och vänster atrium och mäta området för vänster atrium och MR jet att möjliggöra beräkning av MR jet area fraktion som anges. För att approximera området på regurgitantsöppningen, använd nålens ytterdiameter för att beräkna området 23 gauge needle med hjälp av formeln.Erhåll kontinuerlig våg Doppler avbildning med Doppler porten vid öppningen av regurgitant jet och spåra vågform för att beräkna hastighetstiden integralen av regurgitant jet. Använd formeln för att uppskatta MR-volymen. Rotera sedan ekot sonden i laterled medurs för att få puls våg Doppler avbildning av pulmonell ven och mäta den systoliska och diastoliska våg hastigheter med hjälp av ekvationen för att beräkna förhållandet.I dessa bilder kan nålens riktning som den sätts in i mitralventilen observeras. Här, hålet kvar i mitralisklaffen bipacksedeln i en representativ råtta explanted vid två veckor efter det att förfarandet visas. Vid två veckor efter operationen, hjärtan från råttor med MR är sfäriska och allvarligt dilaterad och en levande MR jet är uppenbart med en genomsnittlig yta på ca 21 kvadratmillimeter och en genomsnittlig hastighet tid integrerad på ca 40 centimeter.Den normaliserade MR-fraktionen är typiskt ca 42%vilket anses allvarligt enligt riktlinjerna i American Society of Echocardiography. Svårighetsgraden av MR är adekvat för att inducera pulmonell flöde återföring med en minskning av systoliskt/diastoliskt förhållande från ca 0,9 vid baslinjen till cirka minus 0, 7 vid två veckor. Realtidsavbildning med transesofageal ekokardiografi och införandet av en nål i det slående hjärtat att punktera mitral bipacksedeln är en genomförbar kirurgiska ingrepp som kan läras ut.Vår modell kan kombineras med Ventrikulärt kardiomyopatier att studera hjärt remodeling och underlättar undersöka effekterna av tidig debut kontra sent insjuknat i MR på hjärt ombyggnad.

Research

JoVE Journal

Medicine

High-frequency High-resolution Echocardiography: First Evidence on Non-invasive Repeated Measure of Myocardial Strain, Contractility, and Mitral Regurgitation in the Ischemia-reperfused Murine Heart

Högfrekvent Högupplöst Ekokardiografi: första beviset på icke-invasiva Upprepad Mät hjärtinfarkt i stam, kontraktilitet och mitralis-insufficiens i ischemi-reperfused Murine hjärta

Ischemia-reperfusion (IR) was surgically performed in murine hearts which were then subjected to repeated imaging to monitor temporal changes in ...

MRI-guided Disruption of the Blood-brain Barrier using Transcranial Focused Ultrasound in a Rat Model

MR-guidad Rubbning av blod-hjärnbarriären med hjälp Transkraniell fokuserat ultraljud i en råttmodell

Focused ultrasound (FUS) disruption of the blood-brain barrier (BBB) is an increasingly investigated technique for circumventing the BBB1-5. The BBB is a ...

Image-guided Convection-enhanced Delivery into Agarose Gel Models of the Brain

Bildstyrd Konvektion utökad leverans till Agarosgel Modeller av hjärnan

Convection-enhanced delivery (CED) has been proposed as a treatment option for a wide range of neurological diseases. Neuroinfusion catheter CED allows ...

Subclavian Vein Puncture As an Alternative Method of Blood Sample Collection in Rats

Subclavia ven punktering som en alternativ metod för blod provtagning hos råttor

Blood collection with enough blood volume is essential in animal experiments. Blood collection from the tail vein of rats is popular and less stressful ...

A Simplified Stepwise Approach to Echo Guidance during Percutaneous Mitral Valve Repair

En förenklad stegvis metod för ekovägledning under perkutan mitralventilreparation

Percutaneous transcatheter edge-to-edge reconstruction of the mitral valve is a safe and well-established therapy for severe symptomatic mitral ...

Four-Dimensional Computed Tomography-Guided Valve Sizing for Transcatheter Pulmonary Valve Replacement

Fyrdimensionell datortomografistyrd ventilstorlek för transkateter lungventilbyte

The measurements of the right ventricle (RV) and pulmonary artery (PA), for selecting the optimal prosthesis size for transcatheter pulmonary valve ...

Transcatheter Pulmonary Valve Replacement from Autologous Pericardium with a Self-Expandable Nitinol Stent in an Adult Sheep Model

Transkateter lungventil ersättning från autologt perikardium med en självutvidgbar nitinolstent i en vuxen fårmodell

Transcatheter pulmonary valve replacement has been established as a viable alternative approach for patients suffering from right ventricular outflow ...

Fully Endoscopic Mitral Valve Repair with Percutaneous Cannulation of Groin Vessels

Helt endoskopisk mitralventilreparation med perkutan kanylering av ljumskkärl

Endoscopic mitral valve surgery (EMS) has become a standard of care at specialized heart centers, further reducing surgical trauma compared to a ...

Modified Arteriovenous Fistula Surgery to Establish the RV Volume Overload Mouse Model

Establishment and Confirmation of a Postnatal Right Ventricular Volume Overload Mouse Model

Establishment and Confirmation of a Postnatal Right Ventricular Volume Overload Mouse Model (Video) | JoVE 

Etablering och bekräftelse av en postnatal musmodell för överbelastning av högerkammarvolym

Right ventricular (RV) volume overload (VO) is common in children with congenital heart disease. In view of distinct developmental stages,the RV ...

Modified Heterotopic Abdominal Heart Transplantation and a Novel Aortic Regurgitation Model in Rats

Modifierad heterotopisk bukhjärttransplantation och en ny aorta-uppstötningsmodell hos råttor

Over the past 50 years, many researchers have reported heterotopic abdominal heart transplantation in mice and rats, with some variations in the surgical ...