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•
11:40 min
April 17th, 2020
DOI :
10.3791/61039-v
Chapters
0:04
Introduction
0:32
Generation of Recombinant Virus
4:00
Plaque Isolation of Recombinant Viruses
7:02
Gel Electrophoresis of Viral dsRNA
9:11
Results: Characteristics of the Recombinant Strains rSA11/wt and rSA11/NSP3-2A-3xFL-UnaG
10:58
Conclusion
Transcript
このプロトコルは、組換えロタウイルスを作るための信頼性の高い効率的な逆遺伝学システムを記述する。また、蛍光マーカータンパク質を発現する組換えロタウイルスの作り方についても説明します。この方法は、最小限の数のプラスミドを必要とする単純であり、別々のフッ素タンパク質だけでなく、ウイルスタンパク質を発現する組換えロタウイルスを生成することができます。
BHKT7細胞を12ウェルプレートに播種し始めます。細胞の新鮮なコンフルエント単層をPBSでリンスします。次に、トリプシン-EDTA溶
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Summary
プラスミドDNAからの組換えロタウイルスの生成は、ロタウイルス複製および病因の研究、およびロタウイルス発現ベクターおよびワクチンの開発に不可欠なツールを提供する。本明細書において、蛍光レポータータンパク質を発現する株を含む組換えロタウイルスを生成するための簡略な逆遺伝学アプローチについて述べる。
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