Short Tandem Target Mimic (STTM) Fragment Amplification
1:40
STTM Purification
2:22
T4 DNA Polymerase Reaction Mix Preparation
3:13
Potato Virus X (PVX)-Based microRNA (miRNA) Silencing (VbMS) Vector Construction
4:55
T4 DNA Polymerase Reaction Setup and STTM Cloning
7:21
Potato Virus-X-Based VbMS Assay
10:07
Results: Representative VbMS of miR165/166 in Tetraploid Potato Species
11:16
Conclusion
Transcript
The traditional approach to analyzing the function of microRNAs in plants primarily relies on the generation of stable knockdown plants. This virus-based microRNA silencing system does not require tedious and time-consuming transformation. Virus-b
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Wir präsentieren ein detailliertes Protokoll für das auf Kartoffelvirus X (PVX) basierende microRNA-Silencing-System (VbMS) zur funktionellen Charakterisierung endogener microRNAs (miRNAs) in Kartoffeln. Target Mimic (TM) Moleküle von miRNA von Interesse werden in den PVX-Vektor integriert und vorübergehend in Kartoffeln exprimiert, um die Ziel-miRNA oder miRNA-Familie zum Schweigen zu bringen.