Short Tandem Target Mimic (STTM) Fragment Amplification
1:40
STTM Purification
2:22
T4 DNA Polymerase Reaction Mix Preparation
3:13
Potato Virus X (PVX)-Based microRNA (miRNA) Silencing (VbMS) Vector Construction
4:55
T4 DNA Polymerase Reaction Setup and STTM Cloning
7:21
Potato Virus-X-Based VbMS Assay
10:07
Results: Representative VbMS of miR165/166 in Tetraploid Potato Species
11:16
Conclusion
Transcript
The traditional approach to analyzing the function of microRNAs in plants primarily relies on the generation of stable knockdown plants. This virus-based microRNA silencing system does not require tedious and time-consuming transformation. Virus-b
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Presentiamo un protocollo dettagliato per il sistema di silenziamento dei microRNA (VbMS) basato sul virus della patata X (PVX) per caratterizzare funzionalmente i microRNA endogeni (miRNA) nella patata. Le molecole mimiche bersaglio (TM) di miRNA di interesse sono integrate nel vettore PVX ed espresse transitoriamente in patata per silenziare il miRNA bersaglio o la famiglia di miRNA.