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•
06:52 min
July 22nd, 2020
DOI :
10.3791/61077-v
Chapters
0:04
Introduction
0:36
Cell Culture and Tumorsphere Formation
1:53
RNA Isolation
3:11
RNAseq Profiling and Bioinformatics Analysis
3:45
Driver Gene Selection
4:52
Results: Representative Tumorsphere Protein and Gene Expression Analyses
6:09
Conclusion
Transcript
当社のプロトコルは、RNA-Seqとバイオ情報学的ツールを利用して、茎のような大腸腫瘍球の形成に寄与する過剰発現ドライバー遺伝子を迅速に明らかにしました。このプロトコルは、選択的大腸癌における癌幹細胞の分子機構を調べる、微分発現遺伝子およびシグナル経路をスクリーニングするために使用される。培養7日目には、デジタル細胞イメージングシステムを備えた反転顕微鏡を使用して、腫瘍球の直径を観察し、測定します。
腫瘍球が直径100マイクロメートル以上に達したら、0.25%トリプシンで培養を
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Summary
ここで提示される、大腸HT29細胞由来の確立された癌幹細胞様細胞を維持する過剰発現ドライバ遺伝子を発見するためのプロトコルである。RNAAseqは、標的腫瘍細胞の生存に関与する潜在的なメカニズムを解明するための遺伝子発現網を調査およびスクリーニングするために実施した。
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