Name: isolation and culture of primary neurons and glia from adult rat urinary bladder
Uploaded: 2020-05-23T14:45:00
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Cette étude a été appuyée par la National Natural Science Foundation of China (Subvention no 81673676) et le Dongguan Science and Technology Bureau (Subvention no 2019622101002). Les auteurs remercient le Dr Maryrose Sullivan (professeure adjointe en chirurgie, Harvard Medical School) pour ses consultations techniques.

Tous les protocoles expérimentaux et les procédures animales étaient conformes aux principes éthiques du Conseil national de recherches du Canada.
1. Préparation des matériaux
<ol><li>Stériliser tous les instruments et ddH 2 Oà l’aided’un autoclave avant d’effectuer l’expérience. Les instruments comprennent, sans s’y limiter, les ciseaux chirurgicaux, les ciseaux ophtalmiques, les forceps, le séparateur de noyau de cuillères, les plats en verre (60-100 mm de d...

<ol>
	<li>Fowler, C. J., Griffiths, D., de Groat, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+neural+control+of+micturition.">The neural control of micturition.</a> Nature Reviews Neuroscience. 9 (6), 453-466 (2008).</li><li>Golbidi, S., Laher, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bladder+dysfunction+in+diabetes+mellitus.">Bladder dysfunction in diabetes mellitus.</a> Frontiers in Pharmacology. 1, 136 (2010).</li><li>Iwasawa, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+Effects+of+Intravenous+Cyclophosphamide+in+Combination+with+Mesna+Provided+Intravenously+and+via+Bladder+Perfusion+in+a+Patient+with+Severe+Multifocal+Motor+Neuropathy.">Long-term Effects of Intravenous Cyclophosphamide in Combination with Mesna Provided Intravenously and via Bladder Perfusion in a Patient with Severe Multifocal Motor Neuropathy.</a> Internal Medicine. 56 (14), 1893-1896 (2017).</li><li>Lange, M. M., van de Velde, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Urinary+and+sexual+dysfunction+after+rectal+cancer+treatment.">Urinary and sexual dysfunction after rectal cancer treatment.</a> Nature Reviews. Urology. 8 (1), 51-57 (2011).</li><li>Lin, C. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nerve+function+and+dysfunction+in+acute+intermittent+porphyria.">Nerve function and dysfunction in acute intermittent porphyria.</a> Brain. 131, 2510-2519 (2008).</li><li>Rantell, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=What+is+the+utility+of+urodynamics,+including+ambulatory,+and+24+h+monitoring,+in+predicting+upper+urinary+tract+damage+in+neuro-urological+patients+and+other+lower+urinary+tract+dysfunction?+ICI-RS+2017.">What is the utility of urodynamics, including ambulatory, and 24 h monitoring, in predicting upper urinary tract damage in neuro-urological patients and other lower urinary tract dysfunction? ICI-RS 2017.</a> Neurourology and Urodynamics. 37, 25-31 (2018).</li><li>Halperin, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diagnosis+and+management+of+Lyme+neuroborreliosis.">Diagnosis and management of Lyme neuroborreliosis.</a> Expert Review of Anti-Infective Therapy. 16 (1), 5-11 (2018).</li><li>Walter, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reliability+of+supraspinal+correlates+to+lower+urinary+tract+stimulation+in+healthy+participants+-+A+fMRI+study.">Reliability of supraspinal correlates to lower urinary tract stimulation in healthy participants - A fMRI study.</a> Neuroimage. 191, 481-492 (2019).</li><li>Leitner, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+infusion-drainage+device+to+assess+lower+urinary+tract+function+in+neuro-imaging.">A novel infusion-drainage device to assess lower urinary tract function in neuro-imaging.</a> BJU International. 119 (2), 305-316 (2017).</li><li>Smith, T. H., Ngwainmbi, J., Grider, J. R., Dewey, W. L., Akbarali, H. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+in-vitro+preparation+of+isolated+enteric+neurons+and+glia+from+the+myenteric+plexus+of+the+adult+mouse.">An in-vitro preparation of isolated enteric neurons and glia from the myenteric plexus of the adult mouse.</a> Journal of Visualized Experiments. (78), e50688 (2013).</li><li>Gordon, J., Amini, S., White, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=General+overview+of+neuronal+cell+culture.">General overview of neuronal cell culture.</a> Methods in Molecular Biology. 1078, 1-8 (2013).</li><li>Roppongi, R. T., Champagne-Jorgensen, K. P., Siddiqui, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Low-Density+Primary+Hippocampal+Neuron+Culture.">Low-Density Primary Hippocampal Neuron Culture.</a> Journal of Visualized Experiments. (122), e55000 (2017).</li><li>Arms, L., Vizzard, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuropeptides+in+lower+urinary+tract+function.">Neuropeptides in lower urinary tract function.</a> Handbook of Experimental Pharmacology. (202), 395-423 (2011).</li><li>Moriyama, Y., Hiasa, M., Sakamoto, S., Omote, H., Nomura, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vesicular+nucleotide+transporter+(VNUT):+appearance+of+an+actress+on+the+stage+of+purinergic+signaling.">Vesicular nucleotide transporter (VNUT): appearance of an actress on the stage of purinergic signaling.</a> Purinergic Signal. 13 (3), 387-404 (2017).</li><li>Chaudhury, A., He, X. D., Goyal, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myosin+Va+plays+a+key+role+in+nitrergic+neurotransmission+by+transporting+nNOS&#945;+to+enteric+varicosity+membrane.">Myosin Va plays a key role in nitrergic neurotransmission by transporting nNOS&#945; to enteric varicosity membrane.</a> American journal of physiology. Gastrointestinal and Liver Physiology. 301 (3), 498-507 (2011).</li><li>Le Berre-Scoul, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+enteric+neuron-glia+coculture+system+reveals+the+role+of+glia+in+neuronal+development.">A novel enteric neuron-glia coculture system reveals the role of glia in neuronal development.</a> The Journal of Physiology. 595 (2), 583-598 (2017).</li><li>Hayashi, H., Yamada, M., Kumai, J., Takagi, N., Nomizu, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biological+activities+of+laminin-111-derived+peptide-chitosan+matrices+in+a+primary+culture+of+rat+cortical+neurons.">Biological activities of laminin-111-derived peptide-chitosan matrices in a primary culture of rat cortical neurons.</a> Archives of Biochemistry and Biophysics. 648, 53-59 (2018).</li><li>Bottenstein, J. E., Sato, G. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Growth+of+a+rat+neuroblastoma+cell+line+in+serum-free+supplemented+medium.">Growth of a rat neuroblastoma cell line in serum-free supplemented medium.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 76 (1), 514-517 (1979).</li><li>Brewer, G. J., Torricelli, J. R., Evege, E. K., Price, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimized+Survival+of+Hippocampal+Neurons+in+B27-Supplemented+Neurobasalm,+a+New+Serum-free+Medium+Combination.">Optimized Survival of Hippocampal Neurons in B27-Supplemented Neurobasalm, a New Serum-free Medium Combination.</a> Journal of Neuroscience Research. 35 (5), 567-576 (1993).</li><li>Kaech, S., Banker, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Culturing+hippocampal+neurons.">Culturing hippocampal neurons.</a> Nature Protocols. 1 (5), 2406-2415 (2006).</li><li>Georgas, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+illustrated+anatomical+ontology+of+the+developing+mouse+lower+urogenital+tract.">An illustrated anatomical ontology of the developing mouse lower urogenital tract.</a> Development. 142 (10), 1893-1908 (2015).</li><li>Adam, M., Potter, A. S., Potter, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Psychrophilic+proteases+dramatically+reduce+single-cell+RNA-seq+artifacts:+a+molecular+atlas+of+kidney+development.">Psychrophilic proteases dramatically reduce single-cell RNA-seq artifacts: a molecular atlas of kidney development.</a> Development. 144 (19), 3625-3632 (2017).</li></ol>

Préparation des plaques L’utilisation de couvercles de verre dans des plaques de culture de 6, 12 ou 48 puits pour des expériences d’imagerie immunofluorescente ou calcique est une opération économique et économe en échantillons. Les cellules se développent bien dans les plaques sans coverslips pendant la préparation des cultures cellulaires primaires. Par conséquent, les coverslips sont dispensables dans des expériences, telles que la tache occidentale ou la réaction en chaîne de poly...

L’appareil urinaire inférieur a deux fonctions principales : stockage périodique d’urine et micturition1. Le système nerveux inférieur des voies urinaires (LUTNS) contrôle ces fonctions et est délicat et sensible à de nombreuses neuropathies, qui peuvent être innées (porphyrie), acquises (maladie de Lyme), secondaires aux états pathologiques (cystopathie diabétique), médicament induit (cystite hémorragique), chirurgie causée (résection abdominopéine), ou blessures causées (lésions traumatiques de la moelleépinière) 2,3,4,5,6,7. Dans les études physiologiques/pathologiques, les expériences in vivo et in vitro sont tout aussi importantes. Alors que la recherche in vivo sur LUTNS a été menée à des niveaux organiques, cellulaires et moléculaires pendant un certain temps, la recherche in vitro sur les neurones primaires de la vessie urinaire est presque inexistante8,9. Bien que la présente étude soit limitée, nous espérons être les pionniers de la recherche dans ce domaine afin que d’autres chercheurs puissent l’améliorer. De cette façon, cette co-culture peut mener à une compréhension cellulaire du dysfonctionnement physiologique dans les phénotypes, tels que le dysfonctionnement de neurone de réservoir souple.
Contrairement aux muscles entériques avec une directionnalité claire des cellules musculaires en couches discrètes, les muscles de la vessie ne sont pas organisés10. Par conséquent, au lieu d’éplucher la couche externe de la vessie, cette méthode propose de digérer toute la vessie pour réduire la difficulté d’opération et raccourcir le temps de prétraitement pour un taux élevé de survie cellulaire.
En suivant cette méthode, nous pouvons obtenir une culture mixte des neurones et d’autres cellules. Les autres cellules sont indispensables car leur présence imite un environnement in vivo11. En outre, ces cellules fournissent les substances qui ne sont pas disponibles dans le milieu.
Cette méthode implique deux étapes pour la digestion. Tout d’abord, collagène de type II est utilisé pour hydrolyser le collagène, suivie par la trypsine, pour dissocier le tissu encellules 10. De cette façon, les tissus vésicaux sont dispersés en cellules individuelles, puis se développent relativement indépendamment. Lorsque la culture des neurones mûrit, les neurones peuvent être utilisés pour l’imagerie ou des tests fonctionnels.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1061px;" width="1061">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:368px;">0.25% trypsin</td>
			<td style="width:279px;">Gibico</td>
			<td style="width:119px;">15050065</td>
			<td style="width:296px;">Enzyme digestion</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">48-well culture plate</td>
			<td>Corning</td>
			<td style="width:119px;">3548</td>
			<td>Coating dish</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">antibiotic/antimycotic</td>
			<td>Gibico</td>
			<td>15240062</td>
			<td>Culture media/Rinse media</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Anti-Glial Fibrillary Acidic Protein Antibody</td>
			<td>Santa Cruz</td>
			<td>sc-33673</td>
			<td>ICC</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">B-27</td>
			<td>Gibico</td>
			<td>17504044</td>
			<td>Culture media</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">BSA Fraction V</td>
			<td>Gibico</td>
			<td>332</td>
			<td>Enzyme digestion</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Choline Acetyltransferase Antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab18736</td>
			<td>ICC</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">CO2 Incubator</td>
			<td>Heraeus</td>
			<td>B16UU</td>
			<td>Cells culture</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Collagenase type II</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>2593923</td>
			<td>Enzyme digestion</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:25px;">DMEM/F-12</td>
			<td>Gibico</td>
			<td>11330032</td>
			<td>Rinse media</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">DYNLL2 Antibody</td>
			<td>Santa Cruz</td>
			<td>sc-13969</td>
			<td>ICC</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Fetal Bovine Serum</td>
			<td>Gibico</td>
			<td>10100147</td>
			<td>Culture media/Rinse media</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Forceps</td>
			<td>Shanghai Jin Zhong Medical Devices</td>
			<td>1383</td>
			<td>10 cm; Sterile operation</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Glass breakers</td>
			<td>Huan Qiu Medical Devices</td>
			<td>1101</td>
			<td>50 ml; Sterile operation</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Glass coverslips</td>
			<td>WHB Scientific</td>
			<td>WHB-48-CS</td>
			<td>Coating dish</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Glass dishes</td>
			<td>Huan Qiu Medical Devices</td>
			<td>1177</td>
			<td>100 mm; Sterile operation</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Goat Anti-Rat IgG(H+L), Mouse ads-Alexa Fluor 488</td>
			<td>Southernbiotech</td>
			<td>3050-30</td>
			<td>ICC</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Goat Anti-Rat IgG(H+L), Mouse ads-Alexa Fluor 555</td>
			<td>Southernbiotech</td>
			<td>3050-30</td>
			<td>ICC</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Hoechst 33342</td>
			<td>BD</td>
			<td>561908</td>
			<td>ICC</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Laminar flow bench</td>
			<td>Su Jie Medical Devices</td>
			<td>CB 1400V</td>
			<td>Sterile operation</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Laminin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>L2020</td>
			<td>Coating dish</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">L-glutamine</td>
			<td>Gibico</td>
			<td>25030081</td>
			<td>Culture media</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">MAP-2 Antibody</td>
			<td>Affinity</td>
			<td>AF5156</td>
			<td>ICC</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Murine GDNF</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>AF45044</td>
			<td>Culture media</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Neurobasal-A Medium</td>
			<td>Gibico</td>
			<td>10888022</td>
			<td>Culture media</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Ophthalmic scissors</td>
			<td>Shanghai Jin Zhong Medical Devices</td>
			<td>J21010</td>
			<td>12.5 cm; Sterile operation</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Pipettes</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td style="width:119px;">3120000240</td>
			<td>100-1000 ul; Reagent and sample pipetting</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Pipettes</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td style="width:119px;">3120000267</td>
			<td>10-100 ul; Reagent and sample pipetting</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Poly-D-lysine</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P7280</td>
			<td>Coating dish</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Refrigerated centrifuge</td>
			<td>Ping Fan Instrument</td>
			<td>TGL-16A</td>
			<td>Enzyme digestion</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Shaking incubator</td>
			<td>Haimen Kylin-Bell Lab Instruments</td>
			<td style="width:119px;">T8-1</td>
			<td>Enzyme digestion</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">SLC17A9 Antibody</td>
			<td>MBL International</td>
			<td>BMP079</td>
			<td>ICC</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Spoons nucleus divider</td>
			<td>Shanghai Jin Zhong Medical Devices</td>
			<td>YZR030</td>
			<td>12 cm; Sterile operation</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Substance P Antibody</td>
			<td>Santa Cruz</td>
			<td>sc-58591</td>
			<td>ICC</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Surgical scissors</td>
			<td>Shanghai Jin Zhong Medical Devices</td>
			<td>J21130</td>
			<td>16 cm; Sterile operation</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Surgical towel</td>
			<td>Fu Kang Medical Devices</td>
			<td>5002</td>
			<td>40 x 50 cm; Sterile operation</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Synapsin-1 Antibody</td>
			<td>CST</td>
			<td>5297T</td>
			<td>ICC</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Tubulin beta Antibody(&#946;-III-tubulin)</td>
			<td>Affinity</td>
			<td>AF7011</td>
			<td>ICC</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

isolation and culture of primary neurons and glia from adult rat urinary bladder

Les voies urinaires inférieures ont deux fonctions principales, à savoir le stockage périodique de l’urine et la micturition; ces fonctions sont 20 grâce à la neurorégulation centrale et périphérique. Bien que des recherches approfondies sur le système nerveux des voies urinaires inférieures aient été menées, la plupart des études se sont concentrées sur la culture primaire. Ce protocole introduit une méthode pour l’isolement et la culture des neurones vésicaux et des gliales des rats Sprague-Dawley. Dans cette méthode, les neurones et les gliales ont été incubés dans un incubateur de 37 °C, 5 % de CO2 pendant 5 à 7 jours. En conséquence, ils sont devenus des formes matures adaptées aux expériences ultérieures connexes d’immunofluorescence. Des cellules ont été morphologiquement observées utilisant un microscope optique. Les neurones, les vésicules synaptiques et les gliales ont été identifiés par β-III-tubulin et MAP-2, Synapsin-1 et GFAP colorant, respectivement. Pendant ce temps, l’immunocytochimie a été exécutée sur plusieurs protéines neurotransmetteur-connexes, telles que l’acétyltransferase de choline, DYNLL2, et SLC17A9.

Dans le processus de la culture cellulaire primaire, les cellules acquises étaient rondes avec des limites claires et claires avant l’état ci-joint. Au fur et à mesure que les neurones grandissaient, les dendrites et les axones ont commencé à être distincts. Après 5-7 jours de culture, les neurones ont atteint une forme mûre avec de longues projections, qui étaient idéales pour l’imagerie ou les études de fonction. Bien que la plupart des impuretés et des débris cellulaires aient pu être enlevés en rai...

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Isolation and Culture of Primary Neurons and Glia from Adult Rat Urinary Bladder

Ce protocole tente d’établir un protocole reproductible pour les neurones primaires et l’isolement glia de la vessie de rat pour d’autres expériences cellulaires.

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The lower urinary tract has two main functions, namely, periodic urine storage and micturition; these functions are mediated through central and ...

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Generation of Neurospheres from Mixed Primary Hippocampal and Cortical Neurons Isolated from E14-E16 Sprague Dawley Rat Embryo

Génération de neurosphères à partir de neurones hippocampes et corticales primaires mixtes isolées de l'embryon de rat Sprague Dawley E14-E16

Primary neuron culture is an essential technique in the field of neuroscience. To gain deeper mechanistic insights into the brain, it is essential to have ...