Name: induction of diffuse axonal brain injury in rats based on rotational acceleration
Uploaded: 2020-05-09T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Induction of Diffuse Axonal Brain Injury in Rats Based on Rotational Acceleration at JoVE.com

המחברים מכירים בהכרת ד ר נתן קלייורין (המחלקה להנדסה מכנית, אוניברסיטת בן-גוריון) על עזרתו במידות ביו-מכניות. כמו כן, אנו מודים לפרופ ' אולינה סוינינסקה, מריאן קונשאבה, מח קריונוסוב, דארנה יאקומנקו ואבגניה גונצ'יק מהמחלקה לפיזיולוגיה, הפקולטה לביולוגיה, אקולוגיה ורפואה, יולס הונchar דניפרו, דניפרו, אוקראינה לתמיכה ותרומות מועילות לדיונים שלנו.

הניסויים נערכו בעקבות המלצות ההצהרות של הלסינקי וטוקיו ולהנחיות לשימוש בבעלי חיים ניסיוניים בקהילה האירופית. הניסויים אושרו על ידי הוועדה לטיפול בבעלי חיים באוניברסיטת בן-גוריון בנגב.
1. הכנת חולדות להליך הניסיוני
הערה: בחירת חולדות מבוגרים זכר הג-דאולי במשק...

<ol>
	<li>Faul, M., Wald, M. M., Xu, L., Coronado, V. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Traumatic+brain+injury+in+the+United+States;+emergency+department+visits,+hospitalizations,+and+deaths,+2002-2006.">Traumatic brain injury in the United States; emergency department visits, hospitalizations, and deaths, 2002-2006.</a> US Government. , (2010).</li><li>Taylor, C. A., Bell, J. M., Breiding, M. J., Xu, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Traumatic+Brain+Injury-Related+Emergency+Department+Visits,+Hospitalizations,+and+Deaths+-+United+States,+2007+and+2013.">Traumatic Brain Injury-Related Emergency Department Visits, Hospitalizations, and Deaths - United States, 2007 and 2013.</a> MMWR Surveillance Summaries. 66, 1-16 (2017).</li><li>Peterson, A. B., Xu, L., Daugherty, J., Breiding, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surveillance+report+of+traumatic+brain+injury-related+emergency+department+visits,+hospitalizations,+and+deaths,+United+States,+2014.">Surveillance report of traumatic brain injury-related emergency department visits, hospitalizations, and deaths, United States, 2014.</a> US Government. , (2014).</li><li>Su, E., Bell, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diffuse+axonal+injury.">Diffuse axonal injury.</a> Translational Research in Traumatic Brain Injury. 57, 41 (2016).</li><li>Hammoud, D. A., Wasserman, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diffuse+axonal+injuries:+pathophysiology+and+imaging.">Diffuse axonal injuries: pathophysiology and imaging.</a> Neuroimaging Clinics. 12, 205-216 (2002).</li><li>Adams, J. H., Graham, D. I., Gennarelli, T. A., Maxwell, W. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diffuse+axonal+injury+in+non-missile+head+injury.">Diffuse axonal injury in non-missile head injury.</a> Journal of Neurology, Neurosurgery, and Psychiatry. 54, 481-483 (1991).</li><li>Slazinski, T., Johnson, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Severe+diffuse+axonal+injury+in+adults+and+children.">Severe diffuse axonal injury in adults and children.</a> Journal of Neuroscience Nursing. 26, 151-154 (1994).</li><li>Gentleman, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Axonal+injury:+a+universal+consequence+of+fatal+closed+head+injury.">Axonal injury: a universal consequence of fatal closed head injury.</a> Acta Neuropathologica. 89, 537-543 (1995).</li><li>Marehbian, J., Muehlschlegel, S., Edlow, B. L., Hinson, H. E., Hwang, D. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Medical+Management+of+the+Severe+Traumatic+Brain+Injury+Patient.">Medical Management of the Severe Traumatic Brain Injury Patient.</a> Neurocritical Care. 27, 430-446 (2017).</li><li>Adams, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diffuse+axonal+injury+in+head+injury:+definition,+diagnosis+and+grading.">Diffuse axonal injury in head injury: definition, diagnosis and grading.</a> Histopathology. 15, 49-59 (1989).</li><li>Xiao-Sheng, H., Sheng-Yu, Y., Xiang, Z., Zhou, F., Jian-ning, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diffuse+axonal+injury+due+to+lateral+head+rotation+in+a+rat+model.">Diffuse axonal injury due to lateral head rotation in a rat model.</a> Journal of Neurosurgery. 93, 626-633 (2000).</li><li>Ross, D. T., Meaney, D. F., Sabol, M. K., Smith, D. H., Gennarelli, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distribution+of+forebrain+diffuse+axonal+injury+following+inertial+closed+head+injury+in+miniature+swine.">Distribution of forebrain diffuse axonal injury following inertial closed head injury in miniature swine.</a> Experimental Neurology. 126, 291-299 (1994).</li><li>Bullock, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Opportunities+for+neuroprotective+drugs+in+clinical+management+of+head+injury.">Opportunities for neuroprotective drugs in clinical management of head injury.</a> Journal of Emergency Medicine. 11, 23-30 (1993).</li><li>Gennarelli, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+brain+injury.">Mechanisms of brain injury.</a> Journal of Emergency Medicine. 11, 5-11 (1993).</li><li>Gennarelli, T. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diffuse+axonal+injury+and+traumatic+coma+in+the+primate.">Diffuse axonal injury and traumatic coma in the primate.</a> Annals of Neurology. 12, 564-574 (1982).</li><li>Xiaoshengi, H., Guitao, Y., Xiang, Z., Zhou, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+morphological+study+of+diffuse+axonal+injury+in+a+rat+model+by+lateral+head+rotation+trauma.">A morphological study of diffuse axonal injury in a rat model by lateral head rotation trauma.</a> Acta Neurologica Belgica. 110, 49-56 (2010).</li><li>Zlotnik, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=beta2+adrenergic-mediated+reduction+of+blood+glutamate+levels+and+improved+neurological+outcome+after+traumatic+brain+injury+in+rats.">beta2 adrenergic-mediated reduction of blood glutamate levels and improved neurological outcome after traumatic brain injury in rats.</a> Journal of Neurosurgical Anesthesiology. 24, 30-38 (2012).</li><li>Boyko, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+Alternative+Model+of+Laser-Induced+Stroke+in+the+Motor+Cortex+of+Rats.">An Alternative Model of Laser-Induced Stroke in the Motor Cortex of Rats.</a> Biological Procedures Online. 21, 9 (2019).</li><li>Boyko, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+neuro-behavioral+profile+in+rats+after+subarachnoid+hemorrhage.">The neuro-behavioral profile in rats after subarachnoid hemorrhage.</a> Brain Research. 1491, 109-116 (2013).</li><li>Ma, J., Zhang, K., Wang, Z., Chen, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progress+of+Research+on+Diffuse+Axonal+Injury+after+Traumatic+Brain+Injury.">Progress of Research on Diffuse Axonal Injury after Traumatic Brain Injury.</a> Neural Plasticity. 2016, 9746313 (2016).</li><li>Medana, I. M., Esiri, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Axonal+damage:+a+key+predictor+of+outcome+in+human+CNS+diseases.">Axonal damage: a key predictor of outcome in human CNS diseases.</a> Brain. 126, 515-530 (2003).</li><li>Tang-Schomer, M. D., Johnson, V. E., Baas, P. W., Stewart, W., Smith, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Partial+interruption+of+axonal+transport+due+to+microtubule+breakage+accounts+for+the+formation+of+periodic+varicosities+after+traumatic+axonal+injury.">Partial interruption of axonal transport due to microtubule breakage accounts for the formation of periodic varicosities after traumatic axonal injury.</a> Experimental Neurology. 233, 364-372 (2012).</li><li>Johnson, V. E., Stewart, W., Smith, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Traumatic+brain+injury+and+amyloid-beta+pathology:+a+link+to+Alzheimer's+disease.">Traumatic brain injury and amyloid-beta pathology: a link to Alzheimer's disease.</a> Nature Reviews Neuroscience. 11, 361-370 (2010).</li><li>Sherriff, F. E., Bridges, L. R., Sivaloganathan, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+detection+of+axonal+injury+after+human+head+trauma+using+immunocytochemistry+for+beta-amyloid+precursor+protein.">Early detection of axonal injury after human head trauma using immunocytochemistry for beta-amyloid precursor protein.</a> Acta Neuropathologica. 87, 55-62 (1994).</li><li>Reichard, R. R., White, C. L., Hladik, C. L., Dolinak, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Beta-amyloid+precursor+protein+staining+of+nonaccidental+central+nervous+system+injury+in+pediatric+autopsies.">Beta-amyloid precursor protein staining of nonaccidental central nervous system injury in pediatric autopsies.</a> Journal of Neurotrauma. 20, 347-355 (2003).</li><li>Gentleman, S. M., Nash, M. J., Sweeting, C. J., Graham, D. I., Roberts, G. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Beta-amyloid+precursor+protein+(beta+APP)+as+a+marker+for+axonal+injury+after+head+injury.">Beta-amyloid precursor protein (beta APP) as a marker for axonal injury after head injury.</a> Neuroscience Letters. 160, 139-144 (1993).</li><li>Smith, D. H., Hicks, R., Povlishock, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Therapy+development+for+diffuse+axonal+injury.">Therapy development for diffuse axonal injury.</a> Journal of Neurotrauma. 30, 307-323 (2013).</li><li>McKenzie, K. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Is+beta-APP+a+marker+of+axonal+damage+in+short-surviving+head+injury.">Is beta-APP a marker of axonal damage in short-surviving head injury.</a> Acta Neuropathologica. 92, 608-613 (1996).</li><li>Wilkinson, A., Bridges, L., Sivaloganathan, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Correlation+of+survival+time+with+size+of+axonal+swellings+in+diffuse+axonal+injury.">Correlation of survival time with size of axonal swellings in diffuse axonal injury.</a> Acta Neuropathologicaogica. 98, 197-202 (1999).</li><li>Thompson, H. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lateral+fluid+percussion+brain+injury:+a+15-year+review+and+evaluation.">Lateral fluid percussion brain injury: a 15-year review and evaluation.</a> Journal of Neurotrauma. 22, 42-75 (2005).</li><li>Alder, J., Fujioka, W., Lifshitz, J., Crockett, D. P., Thakker-Varia, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lateral+fluid+percussion:+model+of+traumatic+brain+injury+in+mice.">Lateral fluid percussion: model of traumatic brain injury in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. , e3063 (2011).</li><li>Povlishock, J., Marmarou, A., McIntosh, T., Trojanowski, J., Moroi, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+acceleration+injury+in+the+rat:+evidence+for+focal+axolemmal+change+and+related+neurofilament+sidearm+alteration.">Impact acceleration injury in the rat: evidence for focal axolemmal change and related neurofilament sidearm alteration.</a> Journal of Neuropathology &amp; Experimental Neurology. 56, 347-359 (1997).</li><li>Heath, D. L., Vink, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+acceleration-induced+severe+diffuse+axonal+injury+in+rats:+characterization+of+phosphate+metabolism+and+neurologic+outcome.">Impact acceleration-induced severe diffuse axonal injury in rats: characterization of phosphate metabolism and neurologic outcome.</a> Journal of Neurotrauma. 12, 1027-1034 (1995).</li><li>Lighthall, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Controlled+cortical+impact:+a+new+experimental+brain+injury+model.">Controlled cortical impact: a new experimental brain injury model.</a> Journal of Neurotrauma. 5, 1-15 (1988).</li><li>Palmer, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Traumatic+brain+injury-induced+excitotoxicity+assessed+in+a+controlled+cortical+impact+model.">Traumatic brain injury-induced excitotoxicity assessed in a controlled cortical impact model.</a> Journal of Neurochemistry. 61, 2015-2024 (1993).</li><li>Hamm, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cognitive+deficits+following+traumatic+brain+injury+produced+by+controlled+cortical+impact.">Cognitive deficits following traumatic brain injury produced by controlled cortical impact.</a> Journal of Neurotrauma. 9, 11-20 (1992).</li><li>Nyanzu, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improving+on+Laboratory+Traumatic+Brain+Injury+Models+to+Achieve+Better+Results.">Improving on Laboratory Traumatic Brain Injury Models to Achieve Better Results.</a> International Journal of Medical Sciences. 14, 494-505 (2017).</li><li>Xiong, Y., Mahmood, A., Chopp, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+traumatic+brain+injury.">Animal models of traumatic brain injury.</a> Nature Reviews Neuroscience. 14, 128-142 (2013).</li><li>Lighthall, J. W., Dixon, C. E., Anderson, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+models+of+brain+injury.">Experimental models of brain injury.</a> Journal of Neurotrauma. 6, 83-97 (1989).</li><li>Meaney, D. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modification+of+the+cortical+impact+model+to+produce+axonal+injury+in+the+rat+cerebral+cortex.">Modification of the cortical impact model to produce axonal injury in the rat cerebral cortex.</a> Journal of Neurotrauma. 11, 599-612 (1994).</li></ol>

פרוטוקול זה מתאר מודל מכרסם של DAI. ב-DAI, האצת סיבוב על המוח גורמת אפקט הטיה המפעיל שינויים סיבי וביוכימיים המובילים לאובדן של תפקוד סיבי בתהליך פרוגרסיבי. שינויי סיבי משניים מיוצרים על ידי פציעה מתיחה מהירה סיבי והם משתנים במידה שלהם ואת חומרת4,5,<sup class="x...

פגיעה מוחית טראומטית (TBI) היא גורם מרכזי למוות ולנכות בארצות הברית. Tbis תורמים כ -30% ממקרי המוות הקשורים לפציעה1,2. הגורמים המובילים של tbi שונים בין קבוצות הגיל וכוללים נפילות, התנגשויות במהירות גבוהה במהלך הספורט, פגיעה עצמית מכוונת, מנוע הרכב קריסות ותקיפות1,2,3.
המוח פגיעה סיבי (DAI) הוא סוג מסוים של tbi הנגרמת על ידי האצת סיבוב, טלטול או פגיעה הפיצוץ של המוח כתוצאה מתנועת הראש בלתי מוגבל ברגע לאחר פציעה4,5,6,7,8. דאי כרוך נזק סיבי נרחב המוביל לפגיעה נוירולוגית ארוכת טווח המשויך התוצאה הגרועה, עיק בריאות הטיפול עלויות, ו 33-64% שיעור תמותה1,2,4,5,9,10,11. למרות מחקר משמעותי לאחרונה לתוך הפתוגנזה של דאי, לא היה קונצנזוס על אפשרויות הטיפול הטוב ביותר11,12,13,14.
בעשורים האחרונים, מודלים ניסיוניים רבים ניסו לשכפל במדויק היבטים שונים של דאי11,12,15,16. עם זאת, מודלים אלה יש מגבלות בהתחשב התצוגה הייחודית של DAI לעומת פציעות מוקד אחרות. אלה דגמים קודמים לא רק לגרום לפציעה סיבי באזורים החומר הלבן אלא גם לגרום לפציעות מוחין מוקד. מבחינה קלינית, דאי מלווה בדימום מידי מיקרו, העשוי להוות גורם מרכזי לנזק לחומר הלבן.
רק שני דגמי בעלי חיים הוכחו לשכפל את התכונות הקליניות מפתח של DAI. Gennarelli ועמיתיו הפיק את המכשיר הראשון סיבוב הראש לרוחב ב 1982, באמצעות האצת שאינם השפעה הסיבוב הראש כדי לגרום לתרדמת עם DAI במודל פרימטים לא אנושי15. זה מודל הפרימטים מועסק סיבוב יחיד על האצה והאטה כדי לתפוס את הראש באמצעות 60 ° בתוך 10-20 ms. טכניקה זו היתה מסוגלת לחקות את התודעה לקויה ונזק האקאליות נרחב שדמה להשפעות של TBI חמור שנצפו במוח האנושי. עם זאת, מודלים פרימטים יקרים מאוד4,11,16. מבוסס בחלקו על הדגם הקודם, מודל חזיר של האצת סיבוב פגיעה במוח תוכנן ב 1994 (רוס ואח ') עם תוצאות דומות14.
אלה שני מודלים בעלי חיים, למרות שהם יצרו מצגות שונות של פתולוגיה טיפוסית, הוסיפו במידה רבה את המושגים של פתוגנזה DAI. סיבוב ראש מהיר מקובל בדרך כלל כשיטה הטובה ביותר לגרימת לדאי, ומכרסמים לספק מודל יקר פחות עבור לימודי סיבוב ראש מהיר11,16. כאן, אנו מאמתים מודל פשוט, מכרסם ואמין של מכרסמים של DAI הגורמת נזק לבנים נרחבים ללא שברים בגולגולת או חבורות. המודל הנוכחי יאפשר הבנה טובה יותר של הפתופסולוגיה של DAI ופיתוח של טיפולים יעילים יותר.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:665px;" width="665">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">0.01 M sodium citrate</td>
			<td style="width:121px;">SIGMA - ALDRICH</td>
			<td style="width:161px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">2.5% normal horse serum</td>
			<td style="width:121px;">SIGMA - ALDRICH</td>
			<td style="width:161px;">H0146</td>
			<td>Liquid</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">4 % buffered formaldehyde solution</td>
			<td style="width:121px;"></td>
			<td style="width:161px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">Anti-Amyloid Precursor Protein, C - terminal antibodyproduced in rabbit</td>
			<td style="width:121px;">SIGMA - ALDRICH</td>
			<td style="width:161px;">Lot 056M4867V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">biotinylated secondary antibody</td>
			<td style="width:121px;">Vector</td>
			<td style="width:161px;">BA-1000-1.5</td>
			<td>10 mM sodium phosphate, pH 7.8, 0.15 M NaCl, 0.08% sodium azide, 3 mg/ml bovine serum albumin</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">bone-cutting forceps</td>
			<td style="width:121px;"></td>
			<td style="width:161px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">DAB Peroxidase (HRP) Substrate Kit (with Nickel), 3,3&#8217;-diaminobenzidine</td>
			<td style="width:121px;">vector laboratory</td>
			<td style="width:161px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">embedding cassettes</td>
			<td style="width:121px;"></td>
			<td style="width:161px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">ethanol 99.9 %</td>
			<td style="width:121px;">ROMICAL</td>
			<td style="width:161px;"></td>
			<td>Flammable Liquid</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">guillotine</td>
			<td style="width:121px;"></td>
			<td style="width:161px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Hematoxylin</td>
			<td style="width:121px;">SIGMA - ALDRICH</td>
			<td style="width:161px;">H3136-25G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Hydrogen peroxide solution</td>
			<td style="width:121px;">Millipore</td>
			<td style="width:161px;">88597-100ML-F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Isofluran, USP 100%</td>
			<td style="width:121px;">Piramamal Critical Care, Inc</td>
			<td style="width:161px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Olympus BX 40 microscope</td>
			<td style="width:121px;">Olympus</td>
			<td style="width:161px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">paraffine</td>
			<td style="width:121px;">paraplast plus leica biosystem</td>
			<td style="width:161px;"></td>
			<td>Tissue embedding medium</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">phosphate-buffered saline (PBS)</td>
			<td style="width:121px;">SIGMA - ALDRICH</td>
			<td style="width:161px;">P5368-10PAK</td>
			<td>Contents of one pouch, when dissolved in one liter of distilled or deionized water, will yield 0.01 M phosphate buffered saline (NaCl 0.138 M; KCl - 0.0027 M); pH 7.4, at 25 &#176;C.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Streptavidin HRP</td>
			<td style="width:121px;">ABCAM</td>
			<td style="width:161px;">ab64269</td>
			<td>Streptavidin-HRP for use with biotinylated secondary antibodies during IHC / immunohistochemistry.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">xylene</td>
			<td style="width:121px;"></td>
			<td style="width:161px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

induction of diffuse axonal brain injury in rats based on rotational acceleration

פגיעה מוחית טראומטית (TBI) היא גורם מרכזי למוות ולנכות. לפזר פציעה סיבי (DAI) הוא המנגנון השולט של פציעה באחוז גדול של מטופלים tbi הדורשים אשפוז. דאי כרוך נזק סיבי נרחב מטלטול, סיבוב או פציעה הפיצוץ, המוביל לפגיעה מהירה סיבי מתיחה ושינויים סיבי משניים המשויכים השפעה ארוכת טווח על התאוששות תפקודית. מבחינה היסטורית, מודלים ניסיוניים של DAI ללא פגיעה מוקד היו קשים לעיצוב. כאן אנו מאמתים מודל פשוט, מכרסם ואמין של מכרסמים של DAI הגורמת נזק לבנים נרחבים ללא שברים בגולגולת או חבורות.

טבלה 1 ממחישה את ציר הזמן של הפרוטוקול. שיעור התמותה במודל זה של דאי היה 0%. מבחן מאן-ויטני הראו כי הגרעון הנוירולוגי היה גדול באופן משמעותי עבור 15 חולדות DAI לעומת 15 חולדות מזויף ב 48 שעות לאחר ההתערבות (Mdn = 1 לעומת 0), U = 22.5, p < 0.001, r = 0.78 (ראה טבלה 2). הנתונים נמדדים בספירות והם מוצג?...

Watch this Scientific Journal Video about Induction of Diffuse Axonal Brain Injury in Rats Based on Rotational Acceleration at JoVE.com

Induction of Diffuse Axonal Brain Injury in Rats Based on Rotational Acceleration

פרוטוקול זה מאמת אמין, קל לבצע ולהציג מכרסם מודל של פגיעה במוח מפוזר סיבי (DAI) הגורמת נזק לבנים נרחבים ללא שברים הגולגולת או חבורות.

אינדוקציה של פגיעה מוחית Axonal בחולדות מבוסס על האצת הסיבוב

Traumatic brain injury (TBI) is a major cause of death and disability. Diffuse axonal injury (DAI) is the predominant mechanism of injury in a large ...

פגיעה מוחית טראומטית היא אחת הסיבות העיקריות למוות ונכות. פגיעה מוחית אקסונאלית מפוזרת היא נזק אקסונאלי נרחב להתפתח לאחר TBI. במחקר זה, אני רוצה להציג את המודל שלנו על אינדוקציה לפזר פגיעה מוחית אקסונאלית מבוסס על מנגנון האצה סיבובית התוצאה TBI.בחר זכר בוגר חולדות ספראג-דאולי במשקל 300 עד 350 גרם. לספק צ'או עכברוש ומים עד ליביום. בצע את כל הניסויים בין השעות 06:00 עד 12:00. המכשיר הונח על שולחן מעבדה כבד ויציב.המכשיר מורכב מהרכיבים הבאים: גליל, משקל ברזל, מנגנון סיבובי המורכב מצינור גלילי וסיכות קיבוע ראש. המשקל מחובר למחרוזת ומוגבה לגובה של 120 ס"מ. המשקל הנופל בחופשיות פוגע בבורג המפעיל את מנגנון הסיבוב.מכשיר סיבוב ראש החולדה שימש לסובב את הראש במהירות מאפס ל-90 מעלות. לאחר אינדוקציה, פגיעה מוחית אקסונאלית מפוזרת, חולדה הועברה לחדר ההתאוששות. F הוא הכוח המוחל על ראשו של בעל החיים בקילוגרמים.קפיטל אם הוא הרגע של הכוח, K לאנרגיה קינטית. מ ' קטן הוא המסה של המשקל הנופל, g עבור תאוצה כבידתית, h לגובה בסנטימרים, ו- D הוא המרחק בין סיכות האוזן בסנטימרים. להערכת גירעון נוירולוגי וגירעונות מודל כיתה, השתמשנו ציון חומרה נוירולוגית בחולדות.אנו מעריכים ניידות, hemiplegia, משימת הליכה קרן, כישלון במשימה הליכה קרן. כישלון של משימת איזון קרן רחב 1.5 ס"מ. יציבות ואיזון קרן, מאמץ על מאזן קרן ברוחב 1.5 ס"מ רפלקסים.48 שעות לאחר פציעה, כל החולדות, פציעה קבוצת ביקורת, היו מאוד הרדמה ו transcardiacally perfused עם 0.9% הפריניזציה מלוחים ואחריו 500 מיליליטר של 4% פורמלדהיד ב 0.1 M פוספט חיץ מלוחים. לאחר זיבול, עריפת ראש נוצרה והמוח הוסר מיד, ולאחר מכן תוקן בתסכום פורמלדהיד 4% במשך 48 שעות. המוח נחסם לאחר מכן לחמישה חלקים מילימטר coronal מפנים הנורה חוש הריח לקליפת המוח החזותית בעוד המוח הקטן וגבעולי המוח נותקו.בעקבות הטמרת הפרפין, חלקים קורונטל ו sagittal נעשו מן התלמוס. מייצרים את הכתם האימונוכימי של חלבון בטא עמילואיד מבשר. קבוצות שונות של חולדות בזמנים שונים מוצגים על התכנית.פגיעה מוחית אקסונאלית מפוזרת בתחילת הניסוי. בזמן 48 שעות, ציון חומרה נוירולוגית נבדק. בזמן 48 שעות, כתמים אימונוכימיים של בטא APP בוצע בכל שתי הקבוצות.גירעון נוירולוגי מאויר 48 שעות לאחר פגיעה מוחית אקסונאלית מפוזרת עבור שתי קבוצות מחקר. בדיקה של מאן-וויטני הצביעה על כך שהגירעון הנוירולוגי היה גדול משמעותית עבור 15 חולדות פגיעה מוחית אקסונאליות מפוזרות בהשוואה ל-15 חולדות תמימות ב-48 שעות לאחר ההתערבות. פוטומיקרוגרפים מייצגים החושפים חיסוניות אקסונאלית ונוירונים בעקבות פגיעה מוחית אקסונאלית מפוזרת מבודדת בחולדות 48 שעות לאחר הפציעה.מחרוזות תאיות קטנות יותר מזוהות עם חלבון בטא עמילואיד מבשר. בקבוצה מזויפת, זה לא זוהה. בעבודה שלנו, פיתחנו מודל חדש פשוט, ניתן לשחזור ואמין לפגיעה מוחית אקסונאלית מפוזרת המבוססת על מנגנון האצה סיבובי.מודל כזה יאפשר הבנה טובה יותר של פתופיזיולוגיה של פגיעה מוחית אקסונאלית מפוזרת ופיתוח טיפולים יעילים יותר. תודה רבה לך על תשומת הלב שלך.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Preparation of Oligomeric &beta;-amyloid1-42 and Induction of Synaptic Plasticity Impairment on Hippocampal Slices

Preparation of Oligomeric ÃƒÅ½Ã‚Â²-amyloid1-42 and Induction of Synaptic Plasticity Impairment on Hippocampal Slices

הכנת Oligomeric β עמילואיד 1-42 ו אינדוקציה של ירידת ערך הפלסטיות הסינפטית על Slices בהיפוקמפוס

Impairment of synaptic connections is likely to underlie the subtle amnesic changes occurring at the early stages of Alzheimer s Disease (AD). ...

Chromatin Immunoprecipitation from Dorsal Root Ganglia Tissue following Axonal Injury

הכרומטין immunoprecipitation מרקמות השורש הגבי הגרעינים בעקבות פציעה axonal

Axons in the central nervous system (CNS) do not regenerate while those in the peripheral nervous system (PNS) do regenerate 
to a limited extent after ...

An Ex Vivo Laser-induced Spinal Cord Injury Model to Assess Mechanisms of Axonal Degeneration in Real-time

An Ex Vivo Laser-induced Spinal Cord Injury Model to Assess Mechanisms of Axonal Degeneration in Real-time

<em&gt; Ex Vivo</em&gt; חוט השדרה מושרה לייזר הפגיעה דגם להערכת מנגנוני axonal הניוון בזמן אמת

Injured CNS axons fail to regenerate and often retract away from the injury site. Axons spared from the initial injury may later undergo secondary axonal ...

In Vivo Functional Brain Imaging Approach Based on Bioluminescent Calcium Indicator GFP-aequorin

In Vivo Functional Brain Imaging Approach Based on Bioluminescent Calcium Indicator GFP-aequorin

בגישת ההדמיה התפקודי של מוח Vivo בהתבסס על סידן Bioluminescent המחוון GFP-aequorin

Functional in vivo imaging has become a powerful approach to study the function and physiology of brain cells and structures of interest. Recently a new ...

Effects of Blast-induced Neurotrauma on Pressurized Rodent Middle Cerebral Arteries

השפעות הפיצוץ-induced Neurotrauma על מכרסם מווסת המזרח התיכון העורקים המוחיים

Though there have been studies on the histopathological and behavioral effects of blast exposure, fewer have been dedicated to blast&#39;s cerebral ...

Activity-based Training on a Treadmill with Spinal Cord Injured Wistar Rats

ההדרכה מבוססי פעילות על הליכון עם חוט השדרה נפגע Wistar חולדות

Spinal cord injury (SCI) results in lasting deficits that include both mobility and a multitude of autonomic-related dysfunctions. Locomotor training (LT) ...

Generation of 3-D Collagen-based Hydrogels to Analyze Axonal Growth and Behavior During Nervous System Development

דור של 3-D הידרוג'לים קולגן מבוססי לנתח צמיחה Axonal התנהגות במהלך פיתוח מערכת העצבים

This protocol uses natural type I collagen to generate three-dimensional (3-D) hydrogel for monitoring and analyzing the axonal growth. The protocol is ...

Assessment of Long-term Depression Induction in Adult Cerebellar Slices

הערכה של האינדוקציה לטווח ארוך של דיכאון פרוסות למבוגרים בלבד

Synaptic plasticity provides a mechanism for learning and memory. For cerebellar motor learning, long-term depression (LTD) of synaptic transmissions from ...

Advanced Diffusion Imaging in The Hippocampus of Rats with Mild Traumatic Brain Injury

הדמיה מתקדמת דיפוזיה בהיפוקמפוס של חולדות עם פגיעה מוחית טראומטית מתון

Mild traumatic brain injury (mTBI) is the most common type of acquired brain injury. Since patients with traumatic brain injury show a tremendous ...

Murine Model of Controlled Cortical Impact for the Induction of Traumatic Brain Injury

מודל מורנה של השפעה בקליפת המוח הנשלטת על אינדוקציה של פגיעה מוחית טראומטית

The Centers for Disease Control and Injury Prevention estimate that almost 2 million people sustain a traumatic brain injury (TBI) every year in the ...