Name: improved fecundity and fertility assay for aedes aegypti using 24 well tissue culture plates (eagal plates)
Uploaded: 2021-05-04T12:30:00
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हम वित्तपोषण के लिए टेक्सास एएंडएम एग्रीलाइफ रिसर्च कीट वेक्टर्ड डिजीज ग्रांट प्रोग्राम का शुक्रिया अदा करते हैं । हम पांडुलिपि का मसौदा तैयार करते समय इस विधि और सुझावों को विकसित करने में मदद के लिए एडेलमैन लैब के सदस्यों के साथ-साथ केविन माइल्स लैब के सदस्यों को भी धन्यवाद देते हैं। हम इस पांडुलिपि को बेहतर बनाने के लिए समीक्षकों और संपादकों को उनकी मदद के लिए भी धन्यवाद देते हैं ।

1. प्लेट तैयार करना
<ol><li>24 अच्छी तरह से ऊतक संस्कृति प्लेट lids में ड्रिल छेद (4−6 छेद प्रति अच्छी तरह) एक ~१.६ मिमी (1/16 में) बिट(चित्रा 2)के साथ एक घरेलू ड्रिल का उपयोग कर । नोट: ये छेद ढक्कन पर जमा होने के...

<ol>
	<li>Bond, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimization+of+irradiation+dose+to+Aedes+aegypti+and+Ae.+albopictus+in+a+sterile+insect+technique+program.">Optimization of irradiation dose to Aedes aegypti and Ae. albopictus in a sterile insect technique program.</a> PLoS One. 14 (2), 0212520 (2019).</li><li>Fernandes, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aedes+aegypti+larvae+treated+with+spinosad+produce+adults+with+damaged+midgut+and+reduced+fecundity.">Aedes aegypti larvae treated with spinosad produce adults with damaged midgut and reduced fecundity.</a> Chemosphere. 221, 464-470 (2019).</li><li>Inocente, E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insecticidal+and+Antifeedant+Activities+of+Malagasy+Medicinal+Plant+(Cinnamosma+sp.)+Extracts+and+Drimane-Type+Sesquiterpenes+against+Aedes+aegypti+Mosquitoes.">Insecticidal and Antifeedant Activities of Malagasy Medicinal Plant (Cinnamosma sp.) Extracts and Drimane-Type Sesquiterpenes against Aedes aegypti Mosquitoes.</a> Insects. 10 (11), 373 (2019).</li><li>Marrelli, M. T., Moreira, C. K., Kelly, D., Alphey, L., Jacobs-Lorena, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mosquito+transgenesis:+what+is+the+fitness+cost.">Mosquito transgenesis: what is the fitness cost.</a> Trends in Parasitology. 22 (5), 197-202 (2006).</li><li>da Silva Costa, G., Rodrigues, M. M. S., Silva, A. A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toward+a+blood-free+diet+for+Anopheles+darlingi+(Diptera:+Culicidae).">Toward a blood-free diet for Anopheles darlingi (Diptera: Culicidae).</a> Journal of Medical Entomology. , 217 (2019).</li><li>Gonzales, K. K., Tsujimoto, H., Hansen, I. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+serum+and+BSA,+but+neither+red+blood+cells+nor+hemoglobin+can+support+vitellogenesis+and+egg+production+in+the+dengue+vector+Aedes+aegypti.">Blood serum and BSA, but neither red blood cells nor hemoglobin can support vitellogenesis and egg production in the dengue vector Aedes aegypti.</a> PeerJ. 3, 938 (2015).</li><li>Gonzales, K. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Effect+of+SkitoSnack,+an+Artificial+Blood+Meal+Replacement,+on+Aedes+aegypti+Life+History+Traits+and+Gut+Microbiota.">The Effect of SkitoSnack, an Artificial Blood Meal Replacement, on Aedes aegypti Life History Traits and Gut Microbiota.</a> Scientific Reports. 8 (1), 11023 (2018).</li><li>Tsujimoto, H., Anderson, M. A. E., Myles, K. M., Adelman, Z. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+Candidate+Iron+Transporters+From+the+ZIP/ZnT+Gene+Families+in+the+Mosquito+Aedes+aegypti.">Identification of Candidate Iron Transporters From the ZIP/ZnT Gene Families in the Mosquito Aedes aegypti.</a> Frontiers in Physiology. 9, 380 (2018).</li><li>Ioshino, R. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oviplate:+A+Convenient+and+Space-Saving+Method+to+Perform+Individual+Oviposition+Assays+in+Aedes+aegypti.">Oviplate: A Convenient and Space-Saving Method to Perform Individual Oviposition Assays in Aedes aegypti.</a> Insects. 9 (3), 103 (2018).</li><li>Price, D. P., Schilkey, F. D., Ulanov, A., Hansen, I. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Small+mosquitoes,+large+implications:+crowding+and+starvation+affects+gene+expression+and+nutrient+accumulation+in+Aedes+aegypti.">Small mosquitoes, large implications: crowding and starvation affects gene expression and nutrient accumulation in Aedes aegypti.</a> Parasites &amp; Vectors. 8, 252 (2015).</li><li>Valerio, L., Matilda Collins, C., Lees, R. S., Benedict, M. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Benchmarking+vector+arthropod+culture:+an+example+using+the+African+malaria+mosquito,+Anopheles+gambiae+(Diptera:+Culicidae).">Benchmarking vector arthropod culture: an example using the African malaria mosquito, Anopheles gambiae (Diptera: Culicidae).</a> Malaria Journal. 15 (1), 262 (2016).</li><li>Rueden, C. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ImageJ2:+ImageJ+for+the+next+generation+of+scientific+image+data.">ImageJ2: ImageJ for the next generation of scientific image data.</a> BMC Bioinformatics. 18 (1), 529 (2017).</li></ol>

EAgaL प्लेट एफटी विधि की तुलना में एडीज एजिप्टी में व्यक्तिगत fecundity और प्रजनन क्षमता का संचालन करने के लिए श्रम, समय और स्थान को काफी कम कर देती है। एफटी विधि और ईएएएल प्लेट के बीच प्रारंभिक तुलना के पर...

वेक्टर जनित रोगजनकों से मनुष्यों की रक्षा के लिए मच्छरों का नियंत्रण एक महत्वपूर्ण सार्वजनिक स्वास्थ्य लक्ष्य है, मुख्य रूप से मच्छरों द्वारा किए गए अधिकांश रोगजनकों के लिए प्रभावी टीकों की कमी के कारण । कई अध्ययनों का उद्देश्य क्षेत्र में लागूजनसंख्या कटौती रणनीति1,2,3के साथ मिलकर मच्छरों की फिटनेस को कम करना है। इसमें ट्रांसजेनिक मच्छरों और/या CRISPR/Cas9 नॉकआउट लाइनों को बनाने के लिए व्यापक अध्ययन शामिल हैं । इस तरह के जनसंख्या संशोधन दृष्टिकोणों के लिए व्यक्तिगत फिटनेस मापदंडों का विस्तृत आकलनआवश्यकहै । मादा मच्छरों की फिटनेस का आकलन करने के लिए पारंपरिक प्रयोगशाला तकनीकों में 100 मिलीएल कंटेनरों में संभोग, रक्त-पोषित मादा मच्छरों की व्यक्तिगत रोकथाम शामिल है5,संशोधित 50 एमएल शंकु नली,या ड्रोसोफिला पालन के लिए ट्यूब, नम सतहों को ओसीपोजिशन (यानी अंडे के कागजात)1,2,6,7के लिए नम सतहों का उपयोग करके संशोधित किया गया है। इस तरह के तरीकों के लिए अपेक्षाकृत बड़ी जगह (उदाहरण के लिए, 30 सेमी x 30 सेमी x 10 सेमी: डब्ल्यू एक्स एल एक्स एच 100 ड्रोसोफिला ट्यूब)(चित्रा 1)तक की आवश्यकता होती है, और अंडे और हैचिंग लार्वा की गिनती के लिए व्यक्तिगत अंडे के कागजात में हेरफेर, जो श्रम गहन हो सकता है। यह पांडुलिपि मच्छरों के अंडों को गिनने और 24 अच्छी प्लेटों का उपयोग करके हैच दरों का निर्धारण करने की एक विधि प्रस्तुत करता है और इन मुद्दों को दरकिनार करने के लिए एक ओविपोजिशन सतह के रूप में उठता है8.
समवर्ती, Ioshino एट अल9 एक विस्तृत विधि 12 और 24 अच्छी तरह से प्लेटों का उपयोग करने के लिए व्यक्तिगत महिलाओं से प्राप्त अंडे की गिनती प्रदर्शन वर्णित है । उनके प्रोटोकॉल में समय और स्थान9की बचत में पारंपरिक तरीकों से उल्लेखनीय सुधार का प्रतिनिधित्व किया गया । हालांकि, उनके द्वारा वर्णित प्रोटोकॉल ओविपोजिशन के लिए एक सतह के रूप में गीले फिल्टर पेपर का उपयोग करना जारी रखता है, जिसके लिए प्रत्येक व्यक्तिगत पेपर को गिनती प्राप्त करने के लिए प्रकट करने की आवश्यकता होती है, क्योंकि अंडे अक्सर नीचे या सिलवटों में पाए जाते हैं। उनके प्रोटोकॉल में इमेजिंग प्रौद्योगिकियों का उपयोग या लार्वा गिनती के लिए एक विधि भी शामिल नहीं थी।
प्रस्तुत अंडे की संख्या (यानी, fecundity) और हैच दर (यानी, प्रजनन क्षमता) के लिए फिटनेस परख प्रदर्शन करने के लिए एक बेहतर तरीका है एई के लिए एक 24 अच्छी तरह से ऊतक संस्कृति प्लेट प्रारूप में एक अंडाशय सतह के रूप में agarose का उपयोग कर कि नम सतहों पर oviposit । इन प्लेटों को ईजीजी, आगागुलाब और एलअरवा से "ईएगल" प्लेटें नामित किया गया था। ये 24 अच्छी तरह से प्लेटें अंडे डालने के लिए एक न्यूनतम सतह के साथ व्यक्तिगत मच्छरों को प्रदान करती हैं, इस प्रकार कुछ दिनों के लिए अंडे और रची लार्वा को गिनने और बनाए रखने के लिए आवश्यक समय और प्रयास को सरल और तेजी से कम करती हैं। ईएगल प्लेट ओविपोजिशन सतह के लिए पारदर्शी एगर उठे का उपयोग करती है, जो अंडे के कागजात को संभालने और अंडे और लार्वा खोजने की आवश्यकता को समाप्त करती है जब रची जाती है; प्रत्येक अच्छी तरह से फोटो खिंचवाने के परिणामों का एक दीर्घकालिक संग्रहीत रिकॉर्ड स्थापित करता है और पालन से दोनों समय और अंतरिक्ष में गिनती की प्रक्रिया को अलग/

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>1.6 mm &#934; drill bit</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>alternatively heated nails can be used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1000 &#956;L pipette tips (long)</td>
			<td>Olympus plastics</td>
			<td>24-165RL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>24-well tissue culture plate</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>930186</td>
			<td>clear, flat-bottom with ringed lid plates</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agarose</td>
			<td>VWR</td>
			<td>0710-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Compact digital camera</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>TG-5/TG-6</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Computer (Windows, Mac or Linux)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Deionized water</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fiji (imageJ) software</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>download from: https://fiji.sc/</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Dumont</td>
			<td></td>
			<td>sharp forceps may break mosquito&#39;s body</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass Petri dishes</td>
			<td>VWR</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Household bleach</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Household electric drill</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>illuminator for stereomicroscope (gooseneck)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>P-1000 pipette</td>
			<td>Gilson</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>paint brushes</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rubber bands</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SD card</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>to record digital camera images (DSHC, SDXC should be better)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spreadsheet software (Microsoft Excel)</td>
			<td>Microsoft</td>
			<td></td>
			<td>Any spreadsheet software works</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TetraMin fish food</td>
			<td>Tetra</td>
			<td></td>
			<td>ground with coffee grinder, blender or morter &#38; pestle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transfer pipetts</td>
			<td>VWR</td>
			<td>16011-188</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

improved fecundity and fertility assay for aedes aegypti using 24 well tissue culture plates (eagal plates)

मच्छर विभिन्न रोगजनकों के वैक्टर के रूप में एक महत्वपूर्ण सार्वजनिक स्वास्थ्य समस्या का प्रतिनिधित्व करते हैं। उन अध्ययनों के लिए है कि मच्छर फिटनेस मापदंडों के आकलन की आवश्यकता है, विशेष रूप से अंडा उत्पादन और व्यक्तिगत स्तर पर हैच दरों में, पारंपरिक तरीकों उच्च श्रम तीव्रता और प्रयोगशाला अंतरिक्ष आवश्यकताओं के कारण जांचकर्ताओं पर एक महत्वपूर्ण बोझ डाल दिया है । वर्णित एक सरल विधि है जो प्रत्येक अच्छी तरह से और प्रत्येक अच्छी तरह से डिजिटल इमेजिंग में एगर उठे के साथ 24 अच्छी तरह से ऊतक संस्कृति प्लेट का उपयोग करके काफी कम समय और अंतरिक्ष आवश्यकताओं के साथ एक व्यक्तिगत स्तर पर अंडे की संख्या और हैच दरों का निर्धारण करने के लिए है।

मच्छरों को एक उम्मीदवार आयरन ट्रांसपोर्टर (FeT) या नियंत्रण जीन (EGFP), रक्त-खिलाया, और ऊपर वर्णित प्रक्रिया का पालन करते हुए ईागल प्लेट विधि का उपयोग करके fecundity और प्रजनन उत्पादन के लिए मापा जाता है, को लक्षित क...

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Improved Fecundity and Fertility Assay for Aedes aegypti using 24 Well Tissue Culture Plates EAgaL Plates

वर्णित एक समय और अंतरिक्ष की बचत विधि अंडे गिनती और 24 अच्छी तरह से ऊतक संस्कृति प्लेटों का उपयोग कर व्यक्तिगत मच्छरों की हैच दरों का निर्धारण है, जो काफी पैमाने और fecundity और प्रजनन क्षमता परख की गति में वृद्धि कर सकते हैं ।

24 अच्छी तरह से ऊतक संस्कृति प्लेटें (EAgaL प्लेटें) का उपयोग कर एडीज एजिप्टी के लिए बेहतर Fecundity और प्रजनन परख

Mosquitoes represent a significant public health problem as vectors of various pathogens. For those studies that require an assessment of mosquito fitness ...

यह प्रक्रिया मच्छर शोधकर्ताओं को व्यक्तिगत स्तर पर अपने मच्छरों की प्रजनन फिटनेस को आसानी से संबोधित करने की अनुमति देती है। पारंपरिक तरीकों की तुलना में, यह प्रोटोकॉल व्यक्तिगत स्तर पर मच्छरों की fecundity और प्रजनन क्षमता का परीक्षण करने के लिए आवश्यक समय, स्थान और श्रम को काफी कम कर देता है। ओविपोजिशन प्रयोग के लिए प्लेट तैयार करके शुरू करें।एक १.६ मिलीमीटर बिट के साथ एक घरेलू ड्रिल का उपयोग कर एक 24 अच्छी तरह से संस्कृति प्लेट के ढक्कन में अच्छी तरह से प्रति चार से छह छेद ड्रिल । प्रयोग से एक दिन पहले, प्लेटों को धोएं और कुल्ला करें और उन्हें कमरे के तापमान पर 30 से 60 मिनट के लिए 1% से 5% ब्लीच में भिगो दें। फिर, प्लेटों को अच्छी तरह से पानी के नीचे धोएं और उन्हें सुखा लें।पिघल 2% deionized पानी में agarose और तुरंत पिघला हुआ ag के 500 माइक्रोलीटर एक 24 अच्छी तरह से थाली के प्रत्येक कुएं के लिए उठी जोड़ें। किसी भी संघनन को सुखाने के लिए रात भर लैब बेंच पर प्लेटें छोड़ दें। खून भरने से कम से कम 16 घंटे पहले मादा मच्छरों से पानी या चीनी का कोई भी स्रोत निकाल लें।फीडिंग के दिन एक पानी का परिसंचरण 37 डिग्री सेल्सियस तक गर्म करें और मच्छरों को कृत्रिम फीडरों में रखे कशेरुकी रक्त से 15 से 30 मिनट तक खिलाएं। फिर, मच्छरों को बर्फ पर एक ग्लास डिश में स्थानांतरित करें। उन लोगों का चयन करें जो रक्त से घिरे हुए हैं और उन्हें 30% सुक्रोज पानी के साथ एक कंटेनर में रखें।महिलाओं को उत्सर्जन और अंडे के विकास को खत्म करने के लिए कम से कम 72 घंटे की अनुमति दें। मच्छरों को 24-अच्छी प्लेट में स्थानांतरित करने से लगभग एक घंटे पहले, प्रत्येक कुएं में दो से तीन बूंदें पानी जोड़ने के लिए स्थानांतरण पिपेट का उपयोग करें। कार्बन डाइऑक्साइड के साथ मच्छरों को नीचे गिराएं और उन्हें बर्फ पर एक ग्लास डिश में स्थानांतरित करें।फिर, व्यक्तिगत रूप से प्रत्येक मच्छर को 24-अच्छी प्लेट के उल्टे ढक्कन पर रखें। एक बार सभी 24 मच्छरों को रखा गया है, एक उल्टे प्लेट नीचे के साथ ढक्कन को कवर करें, इसे एक ताजा नए रबर बैंड के साथ सुरक्षित करें और मच्छरों के ठीक होने तक इसे पर्यावरणीय कक्ष में रखें। इसके बाद प्लेट को राइट साइड में घुमाएं।मादा मच्छरों को 24 से 48 घंटे तक ओविपोसिट करने की अनुमति दें। फिर, महिलाओं को प्लेटों से एक बड़े पिंजरे में छोड़ कर हटा दें। अंडे गिनने से पहले, उन अंडों के लिए प्रत्येक अच्छी तरह से जांचें जो अच्छी दीवारों पर हैं और एगर उठे और प्लास्टिक की सतह के मार्जिन पर जहां उन्हें तस्वीरों में हल करना मुश्किल है।इन अंडों को सपाट सतह पर ले जाने के लिए गीले तूलिका का प्रयोग करें ताकि सभी अंडे एक समान प्लेन में हों और एक-दूसरे को ओवरलैप न करें। उन कुओं में किसी भी टूटे हुए पैर, पंख और अन्य कणों को हटाने के लिए संदंश का उपयोग करें जो इमेजिंग अंडे में हस्तक्षेप कर सकते हैं। माइक्रोस्कोप मोड में एक कॉम्पैक्ट डिजिटल कैमरा सेट करें, जो उपयोगकर्ता को एक सेंटीमीटर के रूप में वस्तुओं पर ध्यान केंद्रित करने और प्रत्येक अच्छी तरह से एक छवि लेने की अनुमति देता है।एक प्लेट के प्रत्येक कुएं की फोटो खींचने के बाद, पूरी प्लेट की एक छवि लें। बाद में प्रत्येक प्लेट को अलग करने के लिए इमेजिंग ऑर्डर लेबल का उपयोग करें। अपने एगर उठे प्लग और अंडों को सूखने से रोकने और भ्रूण के विकास और हैचिंग को प्रेरित करने के लिए प्रत्येक कुएं में लगभग पांच बूंदें पानी जोड़ें।छवियों को कंप्यूटर में स्थानांतरित करें और आसान संगठन के लिए प्लेट और अच्छी तरह से विज्ञापनों के साथ फ़ाइलों का नाम बदलें। इमेजजे के साथ छवियों को खोलें और अंडे के झुरमुटों की गिनती करने के लिए प्रत्येक अंडे को चिह्नित करने के लिए मल्टी-पॉइंट टूल का उपयोग करें। सभी अंडों को चिह्नित करने के बाद, अंकों की संख्या को लाने और स्प्रेडशीट में परिणाम रिकॉर्ड करने के लिए मल्टी-पॉइंट आइकन पर डबल क्लिक करें।उन कुओं में भोजन जोड़ना शुरू करें जिनमें दिखाई देते ही लार्वा होते हैं। लगभग पांच से आठ दिन बाद, 15 से 20 मिनट के लिए कुचल बर्फ के साथ प्लेट को कवर करके लार्वा को एनेस्थेटाइज करें। इसके विपरीत बढ़ाने के लिए प्लेट के नीचे एक काली सामग्री डालें और बर्फ पर प्लेटों को रखते हुए प्रत्येक अच्छी तरह से छवियां लें।प्रत्येक अच्छी तरह से फोटो खिंचवाने के बाद, एक इमेजिंग ऑर्डर लेबल के साथ पूरी प्लेट की एक छवि लें। इमेजजे के साथ छवियां खोलें और लार्वा को गिनने के लिए मल्टी-पॉइंट टूल का उपयोग करें। लार्वा आकार, कोण और ध्यान में भिन्न हो सकते हैं।शेड क्यूटिकल्स को बाहर करें, जो थोड़ा सा शरीर, या सिकुड़े लार्वा के साथ सिर-केवल लार्वा की तरह दिखते हैं। स्प्रेडशीट में परिणाम रिकॉर्ड करें। मच्छरों को एक उम्मीदवार आयरन ट्रांसपोर्टर, FeT, या एक नियंत्रण जीन, EGFP को निशाना बनाते हुए डबल-फंसे आरएनए के साथ इंजेक्शन दिया गया था ।फिर, वे रक्त खिलाया और ईगल प्लेट विधि का उपयोग कर fecundity और प्रजनन उत्पादन के लिए मापा गया । मच्छरों जिसमें लोहा ट्रांसपोर्टर अभिव्यक्ति खामोश था अंडे की संख्या और हैच दर दोनों में एक महत्वपूर्ण कमी का प्रदर्शन किया । FeT-खामोश मच्छरों ने भी देरी से उत्सर्जन और छोटे और हल्के रंग के अंडों का प्रदर्शन किया ।अच्छी तस्वीरें लेना इस विधि के लिए एक महत्वपूर्ण कदम है क्योंकि चित्रों की गुणवत्ता और व्यक्तिगत अंडे या लार्वा की मात्रा सीधे परिणामों की गुणवत्ता को प्रभावित करते हैं।

Research

JoVE Journal

Biology

Improved Fecundity and Fertility Assay for Aedes aegypti using 24 Well Tissue Culture Plates (EAgaL Plates)

Measuring Caenorhabditis elegans Life Span in 96 Well Microtiter Plates

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माप Caenorhabditis एलिगेंस 96 खैर microtiter प्लेट्स में लाइफ स्पैन

Lifespan is a biological process regulated by several genetic pathways. One strategy to investigate the biology of aging is to study animals that harbor ...

Ice-Cap: A Method for Growing Arabidopsis and Tomato Plants in 96-well Plates for High-Throughput Genotyping

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आइस कैप: बढ़ते के लिए एक विधि Arabidopsis और उच्च throughput जीनोटाइपिंग के लिए 96 अच्छी तरह से प्लेट्स में टमाटर संयंत्रों

It is becoming common for plant scientists to develop projects that require the genotyping of large numbers of plants. The first step in any genotyping ...

RNAi-mediated Gene Knockdown and In Vivo Diuresis Assay in Adult Female Aedes aegypti Mosquitoes

RNAi-mediated Gene Knockdown and In Vivo Diuresis Assay in Adult Female Aedes aegypti Mosquitoes

आरएनएआई की मध्यस्थता जीन मारकर गिरा दिया और<em&gt; Vivo में</emवयस्क महिला में diuresis परख<em&gt; एडीज aegypti</em&gt; मच्छरों

This video protocol demonstrates an effective technique to knockdown a particular gene in an insect and conduct a novel bioassay to measure excretion ...

Physiological Recordings and RNA Sequencing of the Gustatory Appendages of the Yellow-fever Mosquito Aedes aegypti

Physiological Recordings and RNA Sequencing of the Gustatory Appendages of the Yellow-fever Mosquito Aedes aegypti

शारीरिक रिकॉर्डिंग और पीले बुखार मच्छर के स्वाद उपांग की शाही सेना अनुक्रमण<em&gt; एडीज एजिप्टी</em

Electrophysiological recording of action potentials from sensory neurons of mosquitoes provides investigators a glimpse into the chemical perception of ...

Measuring Oxidative Stress Resistance of Caenorhabditis elegans in 96-well Microtiter Plates

Measuring Oxidative Stress Resistance of Caenorhabditis elegans in 96-well Microtiter Plates

के oxidative तनाव प्रतिरोध को मापने<em&gt; Caenorhabditis एलिगेंस</em&gt; 96 अच्छी तरह से microtiter प्लेट्स में

Oxidative stress, which is the result of an imbalance between production and detoxification of reactive oxygen species, is a major contributor to chronic ...

Improved Swiss-rolling Technique for Intestinal Tissue Preparation for Immunohistochemical and Immunofluorescent Analyses

Immunohistochemical और Immunofluorescent विश्लेषण के लिए आंतों के ऊतकों तैयारी के लिए स्विस रोलिंग तकनीक में सुधार

Understanding the role of factors that regulate intestinal epithelial homeostasis and response to injury and regeneration is important. The current ...

Fat Body Organ Culture System in Aedes Aegypti, a Vector of Zika Virus

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एडीज Aegyptiमें वसा शरीर अंग संस्कृति प्रणाली, Zika वायरस के एक वेक्टर

The insect fat body plays a central role in insect metabolism and nutrient storage, mirroring functions of the liver and fat tissue in vertebrates. Insect ...

Maintaining Aedes aegypti Mosquitoes Infected with Wolbachia

Maintaining Aedes aegypti Mosquitoes Infected with Wolbachia

Wolbachia से संक्रमित एडीज aegypti मच्छरों को बनाए रखने

Aedes aegypti mosquitoes experimentally infected with Wolbachia are being utilized in programs to control the spread of arboviruses such as dengue, ...

Modified Methods for Loading of High-Throughput DNA Extraction Plates Reduce Potential for Contamination

उच्च थ्रूपुट डीएनए निष्कर्षण प्लेटों के लोडिंग के लिए संशोधित तरीके संदूषण के लिए क्षमता को कम करते हैं

High-throughput DNA sequencing techniques have contributed substantially to advances in our understanding of relationships among microbial communities, ...

Preparing Irradiated and Marked Male Aedes aegypti Mosquitoes for Release in an Operational Sterile Insect Technique Program

Preparing Irradiated and Marked Male Aedes aegypti Mosquitoes for Release in an Operational Sterile Insect Technique Program

एक परिचालन बाँझ कीट तकनीक कार्यक्रम में रिलीज के लिए विकिरणित और चिह्नित नर एडीज एजिप्टी मच्छरों को तैयार करना

The control of such human diseases as dengue, Zika, and chikungunya relies on the control of their vector, the Aedes aegypti mosquito, because there is no ...