Name: improved fecundity and fertility assay for aedes aegypti using 24 well tissue culture plates (eagal plates)
Uploaded: 2021-05-04T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Improved Fecundity and Fertility Assay for Aedes aegypti using 24 Well Tissue Culture Plates EAgaL Plates at JoVE.com

Мы благодарим Техас АЗМ Agrilife исследований насекомых векторных заболеваний Грант программы для финансирования. Мы также благодарим сотрудников лаборатории Адельмана за помощь в разработке этого метода и предложения при составлении рукописи, а также сотрудников лаборатории Кевина Майлза. Мы также благодарим рецензентов и редакторов за помощь в улучшении этой рукописи.

1. Подготовка плиты
<ol><li>Сверлить отверстия в 24 крышках пластины культуры ткани скважины (4'6 отверстий на скважину) с помощью бытовой дрели с битом 1,6 мм (1/16 дюйма)(рисунок 2). ПРИМЕЧАНИЕ: Эти отверстия предотвращают конденсации воды от агары накапливаться на крышке, где к...

<ol>
	<li>Bond, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimization+of+irradiation+dose+to+Aedes+aegypti+and+Ae.+albopictus+in+a+sterile+insect+technique+program.">Optimization of irradiation dose to Aedes aegypti and Ae. albopictus in a sterile insect technique program.</a> PLoS One. 14 (2), 0212520 (2019).</li><li>Fernandes, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aedes+aegypti+larvae+treated+with+spinosad+produce+adults+with+damaged+midgut+and+reduced+fecundity.">Aedes aegypti larvae treated with spinosad produce adults with damaged midgut and reduced fecundity.</a> Chemosphere. 221, 464-470 (2019).</li><li>Inocente, E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insecticidal+and+Antifeedant+Activities+of+Malagasy+Medicinal+Plant+(Cinnamosma+sp.)+Extracts+and+Drimane-Type+Sesquiterpenes+against+Aedes+aegypti+Mosquitoes.">Insecticidal and Antifeedant Activities of Malagasy Medicinal Plant (Cinnamosma sp.) Extracts and Drimane-Type Sesquiterpenes against Aedes aegypti Mosquitoes.</a> Insects. 10 (11), 373 (2019).</li><li>Marrelli, M. T., Moreira, C. K., Kelly, D., Alphey, L., Jacobs-Lorena, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mosquito+transgenesis:+what+is+the+fitness+cost.">Mosquito transgenesis: what is the fitness cost.</a> Trends in Parasitology. 22 (5), 197-202 (2006).</li><li>da Silva Costa, G., Rodrigues, M. M. S., Silva, A. A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toward+a+blood-free+diet+for+Anopheles+darlingi+(Diptera:+Culicidae).">Toward a blood-free diet for Anopheles darlingi (Diptera: Culicidae).</a> Journal of Medical Entomology. , 217 (2019).</li><li>Gonzales, K. K., Tsujimoto, H., Hansen, I. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+serum+and+BSA,+but+neither+red+blood+cells+nor+hemoglobin+can+support+vitellogenesis+and+egg+production+in+the+dengue+vector+Aedes+aegypti.">Blood serum and BSA, but neither red blood cells nor hemoglobin can support vitellogenesis and egg production in the dengue vector Aedes aegypti.</a> PeerJ. 3, 938 (2015).</li><li>Gonzales, K. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Effect+of+SkitoSnack,+an+Artificial+Blood+Meal+Replacement,+on+Aedes+aegypti+Life+History+Traits+and+Gut+Microbiota.">The Effect of SkitoSnack, an Artificial Blood Meal Replacement, on Aedes aegypti Life History Traits and Gut Microbiota.</a> Scientific Reports. 8 (1), 11023 (2018).</li><li>Tsujimoto, H., Anderson, M. A. E., Myles, K. M., Adelman, Z. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+Candidate+Iron+Transporters+From+the+ZIP/ZnT+Gene+Families+in+the+Mosquito+Aedes+aegypti.">Identification of Candidate Iron Transporters From the ZIP/ZnT Gene Families in the Mosquito Aedes aegypti.</a> Frontiers in Physiology. 9, 380 (2018).</li><li>Ioshino, R. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oviplate:+A+Convenient+and+Space-Saving+Method+to+Perform+Individual+Oviposition+Assays+in+Aedes+aegypti.">Oviplate: A Convenient and Space-Saving Method to Perform Individual Oviposition Assays in Aedes aegypti.</a> Insects. 9 (3), 103 (2018).</li><li>Price, D. P., Schilkey, F. D., Ulanov, A., Hansen, I. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Small+mosquitoes,+large+implications:+crowding+and+starvation+affects+gene+expression+and+nutrient+accumulation+in+Aedes+aegypti.">Small mosquitoes, large implications: crowding and starvation affects gene expression and nutrient accumulation in Aedes aegypti.</a> Parasites &amp; Vectors. 8, 252 (2015).</li><li>Valerio, L., Matilda Collins, C., Lees, R. S., Benedict, M. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Benchmarking+vector+arthropod+culture:+an+example+using+the+African+malaria+mosquito,+Anopheles+gambiae+(Diptera:+Culicidae).">Benchmarking vector arthropod culture: an example using the African malaria mosquito, Anopheles gambiae (Diptera: Culicidae).</a> Malaria Journal. 15 (1), 262 (2016).</li><li>Rueden, C. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ImageJ2:+ImageJ+for+the+next+generation+of+scientific+image+data.">ImageJ2: ImageJ for the next generation of scientific image data.</a> BMC Bioinformatics. 18 (1), 529 (2017).</li></ol>

Пластина EAgaL резко сокращает труд, время и пространство для проведения индивидуальных анализов плодовитости и фертильности в Aedes aegypti по сравнению с методом FT. Предварительное сравнение метода FT и пластины EAgaL привело к сокращению времени для всех этапов (техника визуализации ...

Борьба с комарами для защиты человека от переносных патогенов является важной целью общественного здравоохранения, главным образом из-за отсутствия эффективных вакцин для большинства патогенных микроорганизмов, переносимых комарами. Многие исследования направлены на снижение пригодности комаров в сочетании с полевой применимой стратегиейсокращения популяции 1,2,3. Это включает в себя обширные исследования для создания трансгенных комаров и / или CRISPR / Cas9 нокаут линий. Такие подходы к модификации популяции требуют детальной оценки индивидуальных параметровпригодности 4. Обычные лабораторные методы для оценки пригодности самок комаров включает в себя индивидуальное сдерживание мякотных, сытых кровью самок комаров в 100 млконтейнеров 5, модифицированных 50 мл конических трубок, или трубки для Дрозофила выращивания модифицированных путем предоставления влажных поверхностей с использованием влажного хлопка и фильтра бумажных дисков для овипозиции (т.е. яйцеклетки)1,2,6,7. Такие методы требуют относительно большого пространства (например, 30 см х 30 см х 10 см: W x L x H для до 100 трубок дрозофилы) (рисунок 1), а также манипуляцииотдельными яичными бумагами для подсчета яиц и вылупления личинок, которые могут быть трудоемкими. Эта рукопись представляет собой метод подсчета яиц комаров и определения ставки люков с использованием 24 пластин и агарозы в качестве поверхности овипозиции, чтобы обойти этивопросы 8.
Параллельно Ioshino et al. 9 описалподробный метод использования 12 и 24 пластин хорошо для выполнения подсчета яйцеклеток, полученных от отдельных женщин. Их протокол представляет собой значительное улучшение по сравнению с обычными методами в экономии времени ипространства 9. Тем не менее, протокол они описали продолжает использовать влажную фильтровальную бумагу в качестве поверхности для овипозиции, которая требует раскрытия каждой отдельной бумаги, чтобы получить рассчитывает, как яйца часто находятся под или в складках. Их протокол также не включает использование технологий визуализации или метода подсчета личинок.
Представлено улучшенный метод для выполнения фитнес-анализов на количество яйцеклеток (т.е. плодовитость) и скорость люка (т.е. плодородие), используя агарозу в качестве поверхности овипозиции в формате 24 хорошо ткани культуры пластины для Ae. aegypti, чтоoviposit на влажных поверхностях. Эти пластины были названы "EAgaL" пластины, от Egg, Ага розы,и Lарва. Эти 24 хорошо пластины обеспечивают отдельных комаров с минимальной поверхностью, чтобы отложить яйца, тем самым упрощая и резко сокращая время и усилия, необходимые для подсчета и поддержания яиц и вылупившихся личинок в течение нескольких дней. Пластина EAgaL использует полупрозрачную агарозу для поверхности овипозиции, что устраняет необходимость обработки яичных бумаг и нахождения яиц и личинок при вылуплении; фотографирование каждого хорошо устанавливает долгосрочную архивную запись результатов и отделяет процесс подсчета как во времени, так и в пространстве от процесса воспитания/обработки, где время часто ограничено.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>1.6 mm &#934; drill bit</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>alternatively heated nails can be used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1000 &#956;L pipette tips (long)</td>
			<td>Olympus plastics</td>
			<td>24-165RL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>24-well tissue culture plate</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>930186</td>
			<td>clear, flat-bottom with ringed lid plates</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agarose</td>
			<td>VWR</td>
			<td>0710-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Compact digital camera</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>TG-5/TG-6</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Computer (Windows, Mac or Linux)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Deionized water</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fiji (imageJ) software</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>download from: https://fiji.sc/</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Dumont</td>
			<td></td>
			<td>sharp forceps may break mosquito&#39;s body</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass Petri dishes</td>
			<td>VWR</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Household bleach</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Household electric drill</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>illuminator for stereomicroscope (gooseneck)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>P-1000 pipette</td>
			<td>Gilson</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>paint brushes</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rubber bands</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SD card</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>to record digital camera images (DSHC, SDXC should be better)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spreadsheet software (Microsoft Excel)</td>
			<td>Microsoft</td>
			<td></td>
			<td>Any spreadsheet software works</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TetraMin fish food</td>
			<td>Tetra</td>
			<td></td>
			<td>ground with coffee grinder, blender or morter &#38; pestle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transfer pipetts</td>
			<td>VWR</td>
			<td>16011-188</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

improved fecundity and fertility assay for aedes aegypti using 24 well tissue culture plates (eagal plates)

Комары представляют собой значительную проблему общественного здравоохранения в качестве переносчиков различных патогенов. Для тех исследований, которые требуют оценки параметров пригодности комаров, в частности производства яиц и скорости вылупления на индивидуальном уровне, традиционные методы несут существенную нагрузку на исследователей из-за высокой интенсивности труда и требований к лабораторным помещениям. Описанный простой метод, используя 24 хорошо ткани культуры пластины с агарозой в каждой хорошо и цифровой визуализации каждой хорошо, чтобы определить яйца номера и люк ставки на индивидуальном уровне с существенно сокращенным временем и пространством требования.

Комары были введены с dsRNA ориентации кандидата транспортер железа (FeT) или контроль гена (EGFP), крови кормили, и измеряется на плодовитость и плодовитость выход с помощью метода пластины EAgaL, после процедуры, описанной выше.
Комары, в которых выражение FeT замолчали после инъе?...

Watch this Scientific Journal Video about Improved Fecundity and Fertility Assay for Aedes aegypti using 24 Well Tissue Culture Plates EAgaL Plates at JoVE.com

Improved Fecundity and Fertility Assay for Aedes aegypti using 24 Well Tissue Culture Plates EAgaL Plates

Описанный метод экономии времени и пространства для подсчета яйцеклеток и определения скорости вылупления отдельных комаров с использованием 24 пластин культуры тканей, которые могут существенно увеличить масштаб и скорость анализа плодовитости и фертильности.

Улучшенная fecundity и анализ плодородности для Aedes aegypti используя 24 плит культуры ткани наилучшим образом (плиты EAgaL)

Mosquitoes represent a significant public health problem as vectors of various pathogens. For those studies that require an assessment of mosquito fitness ...

Эта процедура позволяет исследователям комаров легко решать проблему репродуктивной пригодности комаров на индивидуальном уровне. По сравнению с обычными методами, этот протокол значительно сокращает время, пространство и труд, необходимые для проверки плодовитости и плодовитости комаров на индивидуальном уровне. Начните с подготовки пластин для эксперимента по овипозиции.Просверлите четыре-шесть отверстий на скважину в крышке пластины культуры 24 скважины с помощью бытовой дрели с 1,6-миллиметровым битом. За день до эксперимента промойте и промойте тарелки и замочите их в 1%-5%bleach в течение 30 до 60 минут при комнатной температуре. Затем тщательно промойте тарелки под проточной деионизированной водой и высушите их.Растопить 2%agarose в деионизированной воде и сразу же добавить 500 микролитров расплавленной агарозы в каждой хорошо 24-хорошо пластины. Оставьте тарелки на лабораторной скамейке на ночь, чтобы высушить конденсат. По крайней мере за 16 часов до кормления крови, удалить любой источник воды или сахара из самок комаров.В день кормления нагревать циркулятор воды до 37 градусов по Цельсию и кормить комаров позвоночной кровью, помещаемой в искусственные фидерсы в течение 15-30 минут. Затем перенесите комаров в стеклянную тарелку на льду. Выберите те, которые engorged с кровью и поместите их в контейнер с 30%sucrose воды.Разрешить по крайней мере 72 часов для женщин, чтобы закончить выделение и развитие яйцеклеток. Примерно за час до передачи комаров на 24-хорошо пластины, использовать передачу пипетки, чтобы добавить две-три капли воды в каждый колодец. Сбить комаров с углекислым газом и передать их в стеклянную тарелку на льду.Затем по отдельности поместите каждого комара на перевернутую крышку пластины из 24 колодец. После того, как все 24 комаров были помещены, накройте крышку перевернутым дном пластины, закрестить его свежей новой резинкой и поместить его в экологическую камеру, пока комары восстановить. Затем поверните пластину вправо вверх.Разрешить самкам комаров овипозит в течение 24 до 48 часов. Затем удалите самок, выпустив их из пластин в большую клетку. Прежде чем считать яйца, проверьте каждый хорошо для яиц, которые находятся на стенах хорошо и на краю агарозы и пластиковой поверхности, где они трудно решить на фотографиях.Используйте влажную кисть, чтобы переместить эти яйца на плоскую поверхность, так что все яйца находятся в равномерной плоскости и не перекрывают друг друга. Используйте типсы, чтобы удалить любые сломанные ноги, крылья и другие частицы в колодцах, которые могут помешать изображению яиц. Установите компактную цифровую камеру в режиме микроскопа, которая позволяет пользователю сосредоточиться на объектах как можно ближе, чем один сантиметр и сделать снимок каждой хорошо.После фотографирования каждого колодец пластины, возьмите изображение всей пластины. Используйте метку заказа изображений, чтобы отличить каждую пластину позже. Добавьте около пяти капель воды в каждую колодец, чтобы предотвратить его вилку агарозы и яйца от высыхания и вызвать развитие эмбриона и штриховки.Перенесите изображения на компьютер и переименуйв файлы с табличкой и хорошо IDs для более простой организации. Откройте изображения с ImageJ и использовать многотясный инструмент, чтобы отметить каждое яйцо, масштабирование или выход, чтобы подсчитать яйца сгустки. После маркировки всех яиц, дважды нажмите значок Multi-point, чтобы принести вверх количество знаков и записать результаты в электронной таблице.Начните добавлять пищу в колодцы, которые содержат вылупившихся личинок, как только они появляются. Примерно через пять-восемь дней обезболизывать личинки, покрывая пластину дробленым льдом в течение 15-20 минут. Вставьте черный материал под пластиной для повышения контрастности и принимать изображения каждого хорошо, сохраняя пластины на льду.После фотографирования каждого колодец, сделай изображение всей пластины с этикеткой заказа изображений. Откройте изображения с ImageJ и используйте многотасный инструмент для подсчета личинок. Личинки могут различаться по форме, углу и фокусу.Исключите кутикулы сарая, которые смотрят как голов-только личинки с немного тела, или сморщенные личинки. Запись результатов в таблице. Комары были введены с двуестной РНК ориентации кандидата транспортер железа, FeT, или контрольный ген, EGFP.Затем, они были сыты по крови и измеряется для плодовитости и плодородия выход с помощью метода eagle пластины. Комары, в которых выражение железного транспортера замолчали, продемонстрировали значительное сокращение как количества яиц, так и скорости вылупления. FeT-молчание комаров также выставлены задержки выделения и малых и светлых яиц.Принимая хорошие фотографии является важным шагом для этого метода, потому что качество фотографий и количество отдельных яиц или личинок непосредственно влияют на качество результатов.

Research

JoVE Journal

Biology

Improved Fecundity and Fertility Assay for Aedes aegypti using 24 Well Tissue Culture Plates (EAgaL Plates)

Measuring Caenorhabditis elegans Life Span in 96 Well Microtiter Plates

Measuring Caenorhabditis elegans Life Span in 96 Well Microtiter Plates

Измерительный Caenorhabditis Элеганс Продолжительность жизни в 96-луночных микротитровальных

Lifespan is a biological process regulated by several genetic pathways. One strategy to investigate the biology of aging is to study animals that harbor ...

Ice-Cap: A Method for Growing Arabidopsis and Tomato Plants in 96-well Plates for High-Throughput Genotyping

Ice-Cap: A Method for Growing Arabidopsis and Tomato Plants in 96-well Plates for High-Throughput Genotyping

Ice-Кап: метод выращивания Arabidopsis И томатов в 96-луночных планшетах для высокопроизводительного генотипирования

It is becoming common for plant scientists to develop projects that require the genotyping of large numbers of plants. The first step in any genotyping ...

RNAi-mediated Gene Knockdown and In Vivo Diuresis Assay in Adult Female Aedes aegypti Mosquitoes

RNAi-mediated Gene Knockdown and In Vivo Diuresis Assay in Adult Female Aedes aegypti Mosquitoes

RNAi-опосредованной Нокдаун гена и<em&gt; В Vivo</em&gt; Анализ Диурез в взрослых женщин<em&gt; Aedes aegypti</em&gt; Комары

This video protocol demonstrates an effective technique to knockdown a particular gene in an insect and conduct a novel bioassay to measure excretion ...

Physiological Recordings and RNA Sequencing of the Gustatory Appendages of the Yellow-fever Mosquito Aedes aegypti

Physiological Recordings and RNA Sequencing of the Gustatory Appendages of the Yellow-fever Mosquito Aedes aegypti

Физиологические Записи и РНК Секвенирование Вкусовые придатков Желто-лихорадки комаров<em&gt; Комар желтолихорадочный</em

Electrophysiological recording of action potentials from sensory neurons of mosquitoes provides investigators a glimpse into the chemical perception of ...

Measuring Oxidative Stress Resistance of Caenorhabditis elegans in 96-well Microtiter Plates

Measuring Oxidative Stress Resistance of Caenorhabditis elegans in 96-well Microtiter Plates

Измерение окислительного стрессоустойчивость<em&gt; Caenorhabditis Элеганс</em&gt; В микротитровальных пластинках 96-а

Oxidative stress, which is the result of an imbalance between production and detoxification of reactive oxygen species, is a major contributor to chronic ...

Improved Swiss-rolling Technique for Intestinal Tissue Preparation for Immunohistochemical and Immunofluorescent Analyses

Улучшенная техника швейцарско-прокатка для Кишечные Подготовка ткани для иммуногистохимического и иммунофлуоресцентного анализов

Understanding the role of factors that regulate intestinal epithelial homeostasis and response to injury and regeneration is important. The current ...

Fat Body Organ Culture System in Aedes Aegypti, a Vector of Zika Virus

Fat Body Organ Culture System in Aedes Aegypti, a Vector of Zika Virus

Жир тела орган культуры системы в Aedes Aegypti, вектор вируса Зика

The insect fat body plays a central role in insect metabolism and nutrient storage, mirroring functions of the liver and fat tissue in vertebrates. Insect ...

Maintaining Aedes aegypti Mosquitoes Infected with Wolbachia

Maintaining Aedes aegypti Mosquitoes Infected with Wolbachia

Поддержание инфицированных комаров Aedes aegypti с Wolbachia

Aedes aegypti mosquitoes experimentally infected with Wolbachia are being utilized in programs to control the spread of arboviruses such as dengue, ...

Modified Methods for Loading of High-Throughput DNA Extraction Plates Reduce Potential for Contamination

Модифицированные методы загрузки высокой пропускной способности пластин извлечения ДНК снижают потенциал загрязнения

High-throughput DNA sequencing techniques have contributed substantially to advances in our understanding of relationships among microbial communities, ...

Preparing Irradiated and Marked Male Aedes aegypti Mosquitoes for Release in an Operational Sterile Insect Technique Program

Preparing Irradiated and Marked Male Aedes aegypti Mosquitoes for Release in an Operational Sterile Insect Technique Program

Подготовка облученных и маркированных самцов комаров Aedes aegypti к высвобождению в рамках оперативной программы по стерильным методам насекомых

The control of such human diseases as dengue, Zika, and chikungunya relies on the control of their vector, the Aedes aegypti mosquito, because there is no ...