Name: improved fecundity and fertility assay for aedes aegypti using 24 well tissue culture plates (eagal plates)
Uploaded: 2021-05-04T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Improved Fecundity and Fertility Assay for Aedes aegypti using 24 Well Tissue Culture Plates EAgaL Plates at JoVE.com

Texas A&M Agrilife Research Böcek Vektörlü Hastalıklar Hibe Programı'nın finansmanı için teşekkür ederiz. Ayrıca, el yazmasını hazırlarken bu yöntem ve önerilerin geliştirilmesine yardımcı olan Adelman laboratuvar üyelerine ve Kevin Myles laboratuvar üyelerine teşekkür ederiz. Ayrıca, bu makalenin daha iyi hale getirmek için yardımcı olan hakemlere ve editörlere teşekkür ederiz.

1. Plaka hazırlama
<ol><li>~1,6 mm (1/16 giriş) uçlu bir ev matkabı kullanarak 24 kuyu doku kültürü plaka kapağında (kuyu başına 4−6 delik) delikler açın (Şekil 2). NOT: Bu delikler, sivrisineklerin yumurta bırakabileceği kapakta birikmesi için agarosedan su yoğuşmasını önler. Dişi Ae. aegypti'nin ("Liverpool" suşu) standart boyutu ~ 3.11 mm kanat açıklığıdır. Plakadan kaçmamak için daha küçük sivrisinekler kullanırken deliklerin boyutunun ...

<ol>
	<li>Bond, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimization+of+irradiation+dose+to+Aedes+aegypti+and+Ae.+albopictus+in+a+sterile+insect+technique+program.">Optimization of irradiation dose to Aedes aegypti and Ae. albopictus in a sterile insect technique program.</a> PLoS One. 14 (2), 0212520 (2019).</li><li>Fernandes, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aedes+aegypti+larvae+treated+with+spinosad+produce+adults+with+damaged+midgut+and+reduced+fecundity.">Aedes aegypti larvae treated with spinosad produce adults with damaged midgut and reduced fecundity.</a> Chemosphere. 221, 464-470 (2019).</li><li>Inocente, E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insecticidal+and+Antifeedant+Activities+of+Malagasy+Medicinal+Plant+(Cinnamosma+sp.)+Extracts+and+Drimane-Type+Sesquiterpenes+against+Aedes+aegypti+Mosquitoes.">Insecticidal and Antifeedant Activities of Malagasy Medicinal Plant (Cinnamosma sp.) Extracts and Drimane-Type Sesquiterpenes against Aedes aegypti Mosquitoes.</a> Insects. 10 (11), 373 (2019).</li><li>Marrelli, M. T., Moreira, C. K., Kelly, D., Alphey, L., Jacobs-Lorena, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mosquito+transgenesis:+what+is+the+fitness+cost.">Mosquito transgenesis: what is the fitness cost.</a> Trends in Parasitology. 22 (5), 197-202 (2006).</li><li>da Silva Costa, G., Rodrigues, M. M. S., Silva, A. A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toward+a+blood-free+diet+for+Anopheles+darlingi+(Diptera:+Culicidae).">Toward a blood-free diet for Anopheles darlingi (Diptera: Culicidae).</a> Journal of Medical Entomology. , 217 (2019).</li><li>Gonzales, K. K., Tsujimoto, H., Hansen, I. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+serum+and+BSA,+but+neither+red+blood+cells+nor+hemoglobin+can+support+vitellogenesis+and+egg+production+in+the+dengue+vector+Aedes+aegypti.">Blood serum and BSA, but neither red blood cells nor hemoglobin can support vitellogenesis and egg production in the dengue vector Aedes aegypti.</a> PeerJ. 3, 938 (2015).</li><li>Gonzales, K. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Effect+of+SkitoSnack,+an+Artificial+Blood+Meal+Replacement,+on+Aedes+aegypti+Life+History+Traits+and+Gut+Microbiota.">The Effect of SkitoSnack, an Artificial Blood Meal Replacement, on Aedes aegypti Life History Traits and Gut Microbiota.</a> Scientific Reports. 8 (1), 11023 (2018).</li><li>Tsujimoto, H., Anderson, M. A. E., Myles, K. M., Adelman, Z. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+Candidate+Iron+Transporters+From+the+ZIP/ZnT+Gene+Families+in+the+Mosquito+Aedes+aegypti.">Identification of Candidate Iron Transporters From the ZIP/ZnT Gene Families in the Mosquito Aedes aegypti.</a> Frontiers in Physiology. 9, 380 (2018).</li><li>Ioshino, R. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oviplate:+A+Convenient+and+Space-Saving+Method+to+Perform+Individual+Oviposition+Assays+in+Aedes+aegypti.">Oviplate: A Convenient and Space-Saving Method to Perform Individual Oviposition Assays in Aedes aegypti.</a> Insects. 9 (3), 103 (2018).</li><li>Price, D. P., Schilkey, F. D., Ulanov, A., Hansen, I. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Small+mosquitoes,+large+implications:+crowding+and+starvation+affects+gene+expression+and+nutrient+accumulation+in+Aedes+aegypti.">Small mosquitoes, large implications: crowding and starvation affects gene expression and nutrient accumulation in Aedes aegypti.</a> Parasites &amp; Vectors. 8, 252 (2015).</li><li>Valerio, L., Matilda Collins, C., Lees, R. S., Benedict, M. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Benchmarking+vector+arthropod+culture:+an+example+using+the+African+malaria+mosquito,+Anopheles+gambiae+(Diptera:+Culicidae).">Benchmarking vector arthropod culture: an example using the African malaria mosquito, Anopheles gambiae (Diptera: Culicidae).</a> Malaria Journal. 15 (1), 262 (2016).</li><li>Rueden, C. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ImageJ2:+ImageJ+for+the+next+generation+of+scientific+image+data.">ImageJ2: ImageJ for the next generation of scientific image data.</a> BMC Bioinformatics. 18 (1), 529 (2017).</li></ol>

EAgaL plakası, FT yöntemine kıyasla Aedes aegypti'de bireysel doğurganlık ve doğurganlık tahlilleri yapmak için işgücünü, zamanı ve alanı büyük ölçüde azaltır. FT yöntemi ile EAgaL plakası arasındaki ön karşılaştırma, tüm adımlar için daha kısa sürelere neden oldu (FT yöntemine görüntüleme tekniği uygulandı) (Tablo 1). Referans olarak, tablo 2'debaşlangıç ve test başına (bir 24 kuyu EAgaL plakasına karşı 24 FT) maliyetlerin...

İnsanları vektör kaynaklı patojenlerden korumak için sivrisineklerin kontrolü, esas olarak sivrisinekler tarafından taşınan patojenlerin çoğu için etkili aşıların bulunmaması nedeniyle önemli bir halk sağlığı hedefidir. Birçok çalışma, sahada uygulanabilir bir nüfus azaltma stratejisi 1 ,2,3ile birlikte sivrisinek kondisyonlarını azaltmayı amaçlamaktadır. Bu, transgenik sivrisinekler ve / veya CRISPR / Cas9 nakavt hatları oluşturmak için kapsamlı çalışmaları içerir. Bu tür popülasyon modifikasyon yaklaşımları, bireysel fitness parametrelerinin ayrıntılı bir değerlendirmesini gerektirir4. Dişi sivrisineklerin kondisyonunu değerlendirmek için geleneksel laboratuvar teknikleri, 100 mL kaplarda çift, kanla beslenen dişi sivrisineklerin5,modifiye edilmiş 50 mL konik tüplerde veya yumurtlama için nemli pamuk ve filtre kağıt diskleri kullanılarak nemli yüzeyler sağlanarak modifiye edilen Drosophila yetiştirme tüplerinin (yani yumurta kağıtları)1,2,6,7.'ninayrı ayrı muhafazasını içerir. Bu tür yöntemler nispeten geniş bir alan gerektirir (örneğin, 30 cm x 30 cm x 10 cm: 100 Drosophila tüpü için W x L x H) (Şekil 1) ve tek tek yumurta kağıtlarının, emek yoğun olabilecek yumurta ve kuluçka larvalarını saymak için manipülasyonu. Bu makale, sivrisinek yumurtalarını saymak ve bu sorunları atlatmak için bir yumurtlama yüzeyi olarak 24 kuyu plakası ve agarose kullanarak yumurtadan çıkma oranlarını belirlemek için bir yöntem sunar8.
Aynı anda, Ioshino ve ark.9, bireysel dişilerden elde edilen yumurta sayımını gerçekleştirmek için 12 ve 24 kuyu plakaları kullanarak ayrıntılı bir yöntem tanımladı. Protokolleri, zaman ve mekandan tasarruf9'dageleneksel yöntemlerden önemli bir gelişmeyi temsil etti. Bununla birlikte, tarif ettikleri protokol, ıslak filtre kağıdını yumurtlama için bir yüzey olarak kullanmaya devam eder, bu da yumurtalar genellikle altında veya kıvrımlarda bulunduğundan, sayımları almak için her bir kağıdın açılmasını gerektirir. Protokolleri ayrıca görüntüleme teknolojilerinin kullanımını veya larva sayımı için bir yöntemi içermede değildi.
Sunulan yumurta sayısı (yani, doğurganlık) ve yumurtadan çıkma oranı (yani doğurganlık) için uygunluk testlerini yapmak için geliştirilmiş bir yöntemdir, agarose'un nemli yüzeylerde ovipoz yapan Ae. aegypti için 24 kuyu doku kültürü plakası formatında bir yumurtlama yüzeyi olarak kullanılması. Bu plakalar E gg, Agarose ve Larva'dan "EAgaL"plakaları olarak adlandırıldı. Bu 24 kuyu plakası, bireysel sivrisineklere yumurta bırakmak için minimum bir yüzey sağlar, böylece yumurtaları ve yumurtadan çıkmış larvaları birkaç gün boyunca saymak ve sürdürmek için gereken zamanı ve çabayı basitleştirir ve büyük ölçüde azaltır. EAgaL plakası, yumurta kağıtlarını taşıma ve yumurtadan çıktığında yumurta ve larvaları bulma ihtiyacını ortadan kaldırır; her kuyunun fotoğraflandırılması, sonuçların uzun süreli arşivlenmiş bir kaydını oluşturur ve hem zaman hem de mekandaki sayım işlemini, zamanın genellikle sınırlı olduğu yetiştirme / taşıma işleminden ayırır.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>1.6 mm &#934; drill bit</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>alternatively heated nails can be used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1000 &#956;L pipette tips (long)</td>
			<td>Olympus plastics</td>
			<td>24-165RL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>24-well tissue culture plate</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>930186</td>
			<td>clear, flat-bottom with ringed lid plates</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agarose</td>
			<td>VWR</td>
			<td>0710-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Compact digital camera</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>TG-5/TG-6</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Computer (Windows, Mac or Linux)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Deionized water</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fiji (imageJ) software</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>download from: https://fiji.sc/</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Dumont</td>
			<td></td>
			<td>sharp forceps may break mosquito&#39;s body</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass Petri dishes</td>
			<td>VWR</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Household bleach</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Household electric drill</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>illuminator for stereomicroscope (gooseneck)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>P-1000 pipette</td>
			<td>Gilson</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>paint brushes</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rubber bands</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SD card</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>to record digital camera images (DSHC, SDXC should be better)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spreadsheet software (Microsoft Excel)</td>
			<td>Microsoft</td>
			<td></td>
			<td>Any spreadsheet software works</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TetraMin fish food</td>
			<td>Tetra</td>
			<td></td>
			<td>ground with coffee grinder, blender or morter &#38; pestle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transfer pipetts</td>
			<td>VWR</td>
			<td>16011-188</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

improved fecundity and fertility assay for aedes aegypti using 24 well tissue culture plates (eagal plates)

Sivrisinekler, çeşitli patojenlerin vektörleri olarak önemli bir halk sağlığı sorununu temsil eder. Sivrisinek fitness parametrelerinin, özellikle yumurta üretimi ve kuluçka oranlarının bireysel düzeyde değerlendirilmesini gerektiren çalışmalar için, geleneksel yöntemler yüksek iş yoğunluğu ve laboratuvar alanı gereksinimleri nedeniyle araştırmacılara önemli bir yük yüklemektedir. Açıklanan, yumurta sayılarını ve kuluçka oranlarını önemli ölçüde azaltılmış zaman ve alan gereksinimleri ile bireysel düzeyde belirlemek için her kuyuda agarose ve her kuyunun dijital görüntülemesine sahip 24 kuyu doku kültürü plakası kullanan basit bir yöntemdir.

Sivrisineklere, yukarıda açıklanan prosedürü izleyerek, bir aday demir taşıyıcı (FeT) veya kontrol geni (EGFP) hedef alan dsRNA enjekte edildi ve EAgaL plaka yöntemi kullanılarak doğurganlık ve doğurganlık çıktısı için ölçüldü.
DSRNA enjeksiyonundan sonra FeT ekspresyonuna sessiz kalınan sivrisinekler hem yumurta sayısında hem de kuluçka oranında önemli bir azalma gösterdi (Şekil 11A−C). Tüm kontrol ve tedavi siv...

Watch this Scientific Journal Video about Improved Fecundity and Fertility Assay for Aedes aegypti using 24 Well Tissue Culture Plates EAgaL Plates at JoVE.com

Improved Fecundity and Fertility Assay for Aedes aegypti using 24 Well Tissue Culture Plates EAgaL Plates

Açıklanan, yumurtaları saymak ve 24 kuyu doku kültürü plakası kullanarak bireysel sivrisineklerin kuluçka oranlarını belirlemek için zaman ve yerden tasarruf sağlayan bir yöntemdir, bu da doğurganlık ve doğurganlık testlerinin ölçeğini ve hızını önemli ölçüde artırabilir.

24 Kuyu Doku Kültürü Plakası (EAgaL Plakaları) kullanılarak Aedes aegypti için Geliştirilmiş Doğurganlık ve Doğurganlık Tahlilleri

Mosquitoes represent a significant public health problem as vectors of various pathogens. For those studies that require an assessment of mosquito fitness ...

Bu prosedür, sivrisinek araştırmacılarının sivrisineklerinin üreme zindeliklerini bireysel düzeyde kolayca ele almalarına izin verir. Geleneksel yöntemlerle karşılaştırıldığında, bu protokol sivrisineklerin doğurganlık ve doğurganlığını bireysel düzeyde test etmek için gereken zamanı, alanı ve emeği önemli ölçüde azaltır. Yumurtlama deneyi için plakalar hazırlayarak başlayın.1,6 milimetrelik bir ev matkabı kullanarak 24 kuyulu bir kültür plakasının kapağında kuyu başına dört ila altı delik açın. Deneyden bir gün önce, plakaları yıkayın ve durulayın ve oda sıcaklığında 30 ila 60 dakika boyunca% 1 ila% 5 çamaşır suyuna batırın. Daha sonra, plakaları akan deiyonize suyun altında iyice durulayın ve kurulayın.İyonize suda% 2 agarose eritin ve hemen 24 kuyulu bir plakanın her kuyusuna erimiş agarosenun 500 mikrolitresini ekleyin. Herhangi bir yoğuşma kuruması için plakaları gece boyunca laboratuvar tezgahında bırakın. Kan beslemeden en az 16 saat önce, dişi sivrisineklerden herhangi bir su veya şeker kaynağını çıkarın.Beslenme gününde, bir su sirkülatörunu 37 santigrat dereceye ısıtın ve sivrisinekleri yapay besleyicilere yerleştirilen omurgalı kanıyla 15 ila 30 dakika besleyin. Daha sonra, sivrisinekleri buz üzerinde bir cam yemeğe aktarın. Kanla kaplanmış olanları seçin ve% 30 sakkaroz suyu içeren bir kaba yerleştirin.Dişilerin atılım ve yumurta gelişimini bitirmesi için en az 72 saat izin verin. Sivrisinekleri 24 kuyu plakasına aktarmadan yaklaşık bir saat önce, her kuyuya iki ila üç damla su eklemek için bir transfer pipet kullanın. Sivrisinekleri karbondioksitle devirin ve buz üzerinde bir cam tabağa aktarın.Daha sonra, her bir sivrisineği 24 kuyu plakasının ters bir kapağına ayrı ayrı yerleştirin. 24 sivrisinek de yerleştirildikten sonra, kapağı ters bir plaka tabanıyla örtün, taze yeni bir lastik bantla sabitleyin ve sivrisinekler iyileşene kadar bir çevre odasına yerleştirin. Ardından, plakayı sağ tarafa çevirin.Dişi sivrisineklerin 24 ila 48 saat boyunca ovipoz yapmasına izin verin. Daha sonra, dişileri plakalardan büyük bir kafese bırakarak çıkarın. Yumurtaları saymadan önce, her kuyuyu kuyu duvarlarında ve fotoğraflarda çözülmesi zor olan agarose ve plastik yüzeyin kenar boşluğunda bulunan yumurtalar için kontrol edin.Bu yumurtaları düz yüzeye taşımak için ıslak bir boya fırçası kullanın, böylece tüm yumurtalar düzgün bir düzlemdedir ve birbirleriyle örtüşmez. Görüntüleme yumurtalarını etkileyebilecek kuyulardaki kırık bacakları, kanatları ve diğer parçacıkları çıkarmak için forseps kullanın. Mikroskop modunda, kullanıcının bir santimetreye yakın nesnelere odaklanmasını ve her kuyunun görüntüsünü almasını sağlayan kompakt bir dijital kamera ayarlayın.Bir tabağın her kuyusunun fotoğrafını çektikten sonra, tüm plakanın bir görüntüsünü alın. Her plakayı daha sonra ayırt etmek için bir görüntüleme sırası etiketi kullanın. Agarose fişinin ve yumurtaların kurumasını önlemek ve embriyo gelişimini ve kuluçkalanmasını teşvik etmek için her kuyuya yaklaşık beş damla su ekleyin.Görüntüleri bir bilgisayara aktarın ve daha kolay organizasyon için dosyaları plaka ve kuyu kimlikleriyle yeniden adlandırın. Görüntüleri ImageJ ile açın ve yumurta kümelerini saymak için yakınlaştırarak veya uzaklaştırarak her yumurtayı işaretlemek için Çok Noktalı Aracı kullanın. Tüm yumurtaları işaretledikten sonra, işaret sayısını getirmek ve sonuçları bir elektronik tabloya kaydetmek için Çok Nokta simgesini çift tıklatın.Yumurtadan çıkmış larvaları içeren kuyulara ortaya çıkar çıkmaz yiyecek eklemeye başlayın. Yaklaşık beş ila sekiz gün sonra, plakayı 15 ila 20 dakika boyunca ezilmiş buzla kaplayarak larvaları uyuşturun. Kontrastı arttırmak ve plakaları buzda tutarken her kuyunun görüntülerini çekmek için plakanın altına siyah bir malzeme yerleştirin.Her kuyuyu fotoğraflandıktan sonra, görüntüleme sırası etiketiyle tüm plakanın bir görüntüsünü alın. ImageJ ile görüntüleri açın ve larvaları saymak için Çok Noktalı Aracı kullanın. Larvalar şekil, açı ve odak olarak değişebilir.Biraz vücuda sahip sadece kafaya benzeyen döken kütikülleri veya küçülmüş larvaları hariç tutun. Sonuçları elektronik tabloya kaydedin. Sivrisineklere, aday demir taşıyıcı, FeT veya bir kontrol geni olan EGFP'yi hedef alan çift iplikli RNA enjekte edildi.Daha sonra kartal plakası yöntemi kullanılarak kanla beslenerek doğurganlık ve doğurganlık çıkışı ölçüldü. Demir taşıyıcı ifadesinin susturulduğı sivrisinekler hem yumurta sayısında hem de kuluçka oranında önemli bir azalma gösterdi. FeT susturuculu sivrisinekler de gecikmiş atılım ve küçük ve açık renkli yumurtalar sergiledi.İyi fotoğraflar çekmek bu yöntem için kritik bir adımdır, çünkü resimlerin kalitesi ve bireysel yumurta veya larva miktarı sonuçların kalitesini doğrudan etkiler.

Research

JoVE Journal

Biology

Improved Fecundity and Fertility Assay for Aedes aegypti using 24 Well Tissue Culture Plates (EAgaL Plates)

Measuring Caenorhabditis elegans Life Span in 96 Well Microtiter Plates

Measuring Caenorhabditis elegans Life Span in 96 Well Microtiter Plates

Ölçme Caenorhabditis elegans 96 Şey microtiter Tabaklar Ömrü

Lifespan is a biological process regulated by several genetic pathways. One strategy to investigate the biology of aging is to study animals that harbor ...

Ice-Cap: A Method for Growing Arabidopsis and Tomato Plants in 96-well Plates for High-Throughput Genotyping

Ice-Cap: A Method for Growing Arabidopsis and Tomato Plants in 96-well Plates for High-Throughput Genotyping

Ice-Cap: Büyüyen Bir Yöntem Arabidopsis</emYüksek Verim Genotiplendirme için 96-iyi Tabaklar ve Domates Tesisleri>

It is becoming common for plant scientists to develop projects that require the genotyping of large numbers of plants. The first step in any genotyping ...

RNAi-mediated Gene Knockdown and In Vivo Diuresis Assay in Adult Female Aedes aegypti Mosquitoes

RNAi-mediated Gene Knockdown and In Vivo Diuresis Assay in Adult Female Aedes aegypti Mosquitoes

RNAi-aracılı Gene Nakavt ve<em&gt; In Vivo</emYetişkin Kadınlar&gt; diürez Testi<em&gt; Aedes aegypti</em&gt; Sivrisinekler

This video protocol demonstrates an effective technique to knockdown a particular gene in an insect and conduct a novel bioassay to measure excretion ...

Physiological Recordings and RNA Sequencing of the Gustatory Appendages of the Yellow-fever Mosquito Aedes aegypti

Physiological Recordings and RNA Sequencing of the Gustatory Appendages of the Yellow-fever Mosquito Aedes aegypti

Fizyolojik Kayıtlar ve Sarı-ateş Sivrisinek Tat Çıkıntılara RNA Sıralama<em&gt; Aedes aegypti</em

Electrophysiological recording of action potentials from sensory neurons of mosquitoes provides investigators a glimpse into the chemical perception of ...

Measuring Oxidative Stress Resistance of Caenorhabditis elegans in 96-well Microtiter Plates

Measuring Oxidative Stress Resistance of Caenorhabditis elegans in 96-well Microtiter Plates

Oksidatif Stres Direnci Ölçüm<em&gt; Caenorhabditis elegans</em&gt; 96 oyuklu mikrotiter plakalarında

Oxidative stress, which is the result of an imbalance between production and detoxification of reactive oxygen species, is a major contributor to chronic ...

Improved Swiss-rolling Technique for Intestinal Tissue Preparation for Immunohistochemical and Immunofluorescent Analyses

Immünohistokimyasal ve immünofloresan Analizleri için Bağırsak Doku Hazırlama için geliştirilmiş Swiss-haddeleme Tekniği

Understanding the role of factors that regulate intestinal epithelial homeostasis and response to injury and regeneration is important. The current ...

Fat Body Organ Culture System in Aedes Aegypti, a Vector of Zika Virus

Fat Body Organ Culture System in Aedes Aegypti, a Vector of Zika Virus

Yağ vücut Organ kültür sistemi içinde Aedes Aegypti, bir vektör Zika virüs

The insect fat body plays a central role in insect metabolism and nutrient storage, mirroring functions of the liver and fat tissue in vertebrates. Insect ...

Maintaining Aedes aegypti Mosquitoes Infected with Wolbachia

Maintaining Aedes aegypti Mosquitoes Infected with Wolbachia

Aedes aegypti sivrisinek enfekte Wolbachia ile bakımını yapma

Aedes aegypti mosquitoes experimentally infected with Wolbachia are being utilized in programs to control the spread of arboviruses such as dengue, ...

Modified Methods for Loading of High-Throughput DNA Extraction Plates Reduce Potential for Contamination

Yüksek İşlemli DNA Çıkarma Plakalarının Yüklenmesinde Modifiye Yöntemler Kontaminasyon Potansiyelini Azaltır

High-throughput DNA sequencing techniques have contributed substantially to advances in our understanding of relationships among microbial communities, ...

Preparing Irradiated and Marked Male Aedes aegypti Mosquitoes for Release in an Operational Sterile Insect Technique Program

Preparing Irradiated and Marked Male Aedes aegypti Mosquitoes for Release in an Operational Sterile Insect Technique Program

Işınlanmış ve İşaretlenmiş Erkek Aedes aegypti Sivrisineklerinin Operasyonel Steril Böcek Tekniği Programında Salınıma Hazırlanması

The control of such human diseases as dengue, Zika, and chikungunya relies on the control of their vector, the Aedes aegypti mosquito, because there is no ...