Name: a murine model of fetal exposure to maternal inflammation to study the effects of acute chorioamnionitis on newborn intestinal development
Uploaded: 2020-06-24T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Murine Model of Fetal Exposure to Maternal Inflammation to Study the Effects of Acute Chorioamnionitis on Newborn Intestinal Development at JoVE.com

Эта работа была частично поддержана Национальными институтами здравоохранения (DK097335 и T32AI007260) и Семейным отделением педиатрии Университета Айовы.

Все процедуры для животных были одобрены Комитетом по институциональному уходу и использованию животных Университета Айовы (Протокол #8041401). Все животные были размещены в Ассоциации по оценке и аккредитации лабораторного ухода за животными (AALAC), утвержденной виварием в Университете А?...

Хориоамнионит влияет на 2'u20124% срока и 25'u201230% преждевременныхродов 8,9. Тем не менее, влияние хориоамнионит может продлить давнорождения,как было показано, оказывают значительное влияние на плоди новорожденных 10,11,</...

Хорионные мембраны играют неотъемлемую роль в беременности млекопитающих. Они включают в себя хорион и амнион, которые служат нескольким функциям. Они окружают и защищают плод, облегчают сигнализацию паракрина между материнским и фетальнымотсеками 1и создают локальные петли обратной связи в хорионных мембранах, которые могут быть вовлечены в инициирование партуриции1. Текущее понимание мембран указывает на то, что амнион обеспечивает структурную барьерную функцию, а хорион обеспечивает иммунологический буфер в первую очередь для защиты развивающегося плода от материнской иммуннойсистемы 2. Воспаление этих мембран известно как хориоамнионит. Исторически, диагноз клинического хориоамнионит был сделан после наличия материнской лихорадки плюс один или несколько фетальных или материнскихклинических выводов 3,4. Однако, хотя это определение является клинически полезным, его отсутствие точности сделало исследования хориоамнионит сложной задачей. В 2015 году, в попытке прояснить диагноз, семинар экспертной группы Поник Кеннеди Шрайвер Национальный институт здоровья детей и развития человека определены chorioamnionitis как внутриматочное воспаление, или инфекции, или как (тройной I)3. Это разъяснение важно, потому что в то время как микробные индуцированной инфекции является важной причиной воспаления матки / амниотических, это происходит реже, чем стерильные матки / амниотическиевоспаления 5,6,7. В целом, хориоамнионит остается значительной проблемой общественного здравоохранения, как это видно в 2'u20124% от сроков родов и 25'u201230% преждевременныхродов 8,9.
Хориоамнионит может иметь значительное влияние на плод и новорожденных. Это было хорошо задокументировано в литературе, что хориоамнионит связан с повышенным риском многих заболеваний недоношенности, в том числе бронхолегочныхдисплазии 10, повреждение головногомозга белого вещества 11, внутрижелудочковоекровоизлияние 12, ретинопатиянедоношенности 13, и как подозреваемых и подтвержденных раннего начала неонатальногосепсиса 14,15. Поскольку мы заинтересованы в травмах и механизмах восстановления незрелого желудочно-кишечного тракта, важно отметить, что хориоамнионит также связан с более поздним развитием некротизирующего энтероколита (NEC)15,16. NEC является разрушительным желудочно-кишечным заболеванием недоношенных детей, что приводит к дисрегулируемой реакции хозяина на воспаление и последующий кишечныйнекроз 17. Каждый год, NEC затрагивает более 4000 младенцев в Соединенных Штатах, и до одной трети этих младенцев умирают от болезни18. Патогенез NEC, вероятно, включает в себя сочетание кишечной незрелости, дисрегуляции незрелой иммунной системы, воспаление кишечника, и бактериальнаятранслокация 19, кульминацией в окончательный общий путь кишечного некроза. Важно отметить, что начало NEC часто происходит через несколько недель после рождения и потенциального воздействия хориоамнионит, что делает механистическую связь между хориоамнионит и последующее развитие NEC неясно20. Один потенциальный механизм, с помощью которого хориоамнионит может способствовать патофизиологии NEC через upregulation материнской иммунной системы, впоследствии производя сильный воспалительный ответ плода, которые могут нарушить нормальные модели развития плода21,22,23.
Несколько млекопитающих модели хориоамнионит существуют угрызунов и овец 24,25,26,27,28,29,30,31,32. Тем не менее, существует мало данных, касающихся развития желудочно-кишечного тракта после первоначального периода новорожденных после хориоамнионит-индуцированного плода воздействия материнского воспаления (ФЕМИ). Для того, чтобы изучить взаимосвязь между FEMI и последующего развития травмы незрелого желудочно-кишечного тракта, мы адаптировали липополисахарид (LPS) индуцированной модели FEMI. Липополисахариды являются основным компонентом внеклеточной поверхности на грамотрицательных бактерий и являются мощным стимулятором врожденной иммунной системы нескольких эукариотических видов, в том числелюдей 33. Материнская инъекция LPS приводит к стерильному воспалительному каскаду без путевого воздействия живых бактерий, и это устоявшаяся модель индукции преждевременныхродов 34, а также модель острого хориоамнионита и фетального синдрома воспалительной реакции (FIRS), который является наиболее тяжелой формой хориоамнионит24,35. Было также показано, чтобы вызвать как церебральный белый и серый травмывещества в овец модель 36 и мурин модели37,38,39,40. Однако, насколько нам известно, мы первыми используем эту модель хориоамнионит и ФЕМИ для исследования его влияния на развитие желудочно-кишечного тракта при рождении, а также для изучения возможной механистической связи между хориоамнионитом и более поздним развитием NEC41,42.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>10% neutral buffered formalin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>HT501128</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alcian blue stain</td>
			<td>Newcomer supply</td>
			<td>1003A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C57Bl6/J mice</td>
			<td>Jackson Laboratories</td>
			<td>664</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Decon labs</td>
			<td>2701</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HCl</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H1758</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematoxylin stain</td>
			<td>Leica</td>
			<td>381562</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LPS</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>L2880</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaHCO3</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S6014</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nikon Eclipse Ni-U Microscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>2CE-MQVJ-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Periodic Acid</td>
			<td>ACROS</td>
			<td>H5106</td>
			<td>CAS# 10450-59-9</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNAlater</td>
			<td>Thermofisher</td>
			<td>Am7021</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Schiff&#39;s reagent</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S5133</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Secor Imager 2400</td>
			<td>Meso Scale Discovery (MSD)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>V-Plex Assay</td>
			<td>Meso Scale Discovery (MSD)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylene</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>534056</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a murine model of fetal exposure to maternal inflammation to study the effects of acute chorioamnionitis on newborn intestinal development

Хориоамнионит является распространенным осадком преждевременных родов и связан со многими из заболеваний недоношенных, в том числе некротизирующий энтероколит (NEC). Однако механистическая связь между этими двумя условиями еще предстоит выяснить. Мы приняли мурин модель хориоамнионит с участием липополисахарид (LPS)-индуцированного плода воздействия материнского воспаления (FEMI). Эта модель FEMI вызывает стерильный материнский, плацентарный и плода воспалительный каскад, который также присутствует во многих случаях клинического хориоамнионит. Хотя существуют модели, которые используют живые бактерии и более точно имитируют патофизиологию восходящей инфекции, приводящей к хориоамниониту, эти методы могут вызвать косвенное воздействие на развитие незрелого желудочно-кишечного тракта и связанного с ним развивающегося микробиома. Используя этот протокол, мы продемонстрировали, что ИНДУЦ, вызванный LPS FEMI, приводит к дозозависимым увеличению потери беременности и преждевременных родов, а также нарушению нормального развития кишечника у потомства. Кроме того, мы показали, что FEMI значительно увеличивает кишечные травмы и цитокины сыворотки у потомства, одновременно уменьшая кубок и клетки Панета, которые обеспечивают первую линию врожденного иммунитета против воспаления кишечника. Хотя аналогичная модель LPS-индуцированной FEMI была использована для моделирования связи между хориоамнионитом и последующими аномалиями центральной нервной системы, насколько нам известно, этот протокол является первой попыткой прояснить механистическую связь между хориоамнионитом и более поздними возмущениями в развитии кишечника в качестве потенциальной связи между хориоамнионитом и NEC.

Воздействие FEMI на эмбриональный день 15 приводит к дозозависимых потери беременности и доза зависит от скорости преждевременных родов (Рисунок 1)42. Для экспериментов, мы решили использовать дозу LPS 100 мкг/кг, чтобы свести к минимуму потерю беременности и недо?...

Watch this Scientific Journal Video about A Murine Model of Fetal Exposure to Maternal Inflammation to Study the Effects of Acute Chorioamnionitis on Newborn Intestinal Development at JoVE.com

A Murine Model of Fetal Exposure to Maternal Inflammation to Study the Effects of Acute Chorioamnionitis on Newborn Intestinal Development

Мы разработали модель хориоамнионит для имитации воздействия плода на воспаление матери (ФЕМИ) без осложнений живых организмов для изучения влияния ФЕМИ на развитие желудочно-кишечного тракта потомства. Это позволяет изучать механистические причины развития кишечной травмы после хориоамнионит.

Мурин модель плода воздействия материнского воспаления для изучения последствий острого хориоамнионит на развитие кишечника новорожденных

Chorioamnionitis is a common precipitant of preterm birth and is associated with many of the morbidities of prematurity, including necrotizing ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Orthotopic Aortic Transplantation: A Rat Model to Study the Development of Chronic Vasculopathy

Ортотопическая аорты трансплантации: Крыса модель для изучения развития хронического заболевания сосудов

Research models of chronic rejection are essential to investigate pathobiological and pathophysiological processes during the development of transplant ...

Assessing Teratogenic Changes in a Zebrafish Model of Fetal Alcohol Exposure

Оценка Тератогенные Изменения в модели данио рерио внутриутробного развития плода алкоголь

Fetal alcohol syndrome (FAS) is a severe manifestation of embryonic exposure to ethanol. It presents with characteristic defects to the face and organs, ...

Fetal Echocardiography and Pulsed-wave Doppler Ultrasound in a Rabbit Model of Intrauterine Growth Restriction

Эхокардиография плода и импульсной волны ультразвуковая допплерография в модели кролика внутриутробной задержки роста

Fetal intrauterine growth restriction (IUGR) results in abnormal cardiac function that is apparent antenatally due to advances in fetoplacental Doppler ...

Murine Corneal Transplantation: A Model to Study the Most Common Form of Solid Organ Transplantation

Мышиные Трансплантация роговицы: Модель по изучению наиболее распространенная форма твердого трансплантации органов

Corneal transplantation is the most common form of organ transplantation in the United States with between 45,000 and 55,000 procedures performed each ...

A Murine Model of Irreversible and Reversible Unilateral Ureteric Obstruction

Мышиной модели необратимые и обратимые одностороннего мочеточника непроходимости

Obstruction of the kidney may affect native or transplanted kidneys and results in kidney injury and scarring. Presented here is a model of obstructive ...

Dry Powder and Nebulized Aerosol Inhalation of Pharmaceuticals Delivered to Mice Using a Nose-only Exposure System

Сухой порошок и Небулайзерная Аэрозоль Вдыхание Pharmaceuticals Доставляется мышей Используя нос только экспозиционная система

Obstructive respiratory diseases like asthma and chronic obstructive pulmonary disease (COPD) are currently treated by inhaled anti-inflammatory and ...

A Primary Human Trophoblast Model to Study the Effect of Inflammation Associated with Maternal Obesity on Regulation of Autophagy in the Placenta

Первичного человека трофобласта модель для изучения эффекта воспаления, связанные с материнской ожирения по регулированию Autophagy в плаценту

Maternal obesity is associated with an increased risk of adverse perinatal outcomes that are likely mediated by compromised placental function that can be ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

Изометрические сократимости измерение верхней брыжеечной артерии мыши, с помощью проволоки миография

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

Design and Development of a Model to Study the Effect of Supplemental Oxygen on the Cystic Fibrosis Airway Microbiome

Проектирование и разработка модели для изучения влияния дополнительного кислорода на микробиом дыхательных путей муковисцидоза

Airway microbial communities are thought to play an important role in the progression of cystic fibrosis (CF) and other chronic pulmonary diseases. ...

Standardized Tuina Manipulation for Knee Osteoarthritis in Rats

Tuina Manipulation to Reduce Inflammation and Cartilage Loss in Knee Osteoarthritis Rats

Understanding the Mechanism of Tuina Manipulation in Rats (Video) | JoVE

Манипуляция Tuina для уменьшения воспаления и потери хряща у крыс с остеоартритом коленного сустава

Clinical trials suggest that Tuina manipulation is effective in treating knee osteoarthritis (KOA), while further studies are required to discover its ...