Fluorescent Tag Insertion into the Chromosomal Genome of P. aeruginosa
3:02
Preparation of Agarose Pad
3:57
Imaging with a Two-photon Microscopy Setup
6:44
Results: FLIM-FRET Data Visualization and Analysis
8:57
Conclusion
Transcript
FILM-FRET는 의심하거나 예측된 단백질 단백질 상호 작용을 확인할 수 있게 하는 강력한 기술입니다. 이 프로토콜에서는 불균형 기증자 및 수락자 수량의 특정 한 경우 데이터를 분석하는 방법을 제시합니다. FILM-FRET는 살아있는 세포에서 단백질 단백질 상호 작용에 대한 정보를 직접 제공할 수 있다.
특히 형광 단백질이 내인성 수준에서 발현될 때, 토착 세포 환경에서 개인 단백질 상호 작용을 조사하는 것이 중요합니다. P.
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우리는 FLIM-FRET 측정을 사용하여 살아있는 슈도모나스 aeruginosa에서 두 개의 고도로 다르게 표현된 단백질 사이 단백질 단백질 상호 작용을 특징짓는 프로토콜을 여기에서 기술합니다. 이 프로토콜에는 박테리아 변형 구조, 박테리아 고정, 이미징 및 이미징 후 데이터 분석 루틴이 포함됩니다.