هذا البروتوكول هو مزيج جديد من عدة منهجيات الراديو البيولوجية وجرعات الإشعاع لضمان دقيقة، قابلة للتكرار، تجارب العلاج الإشعاعي قبل الأشعة. وتربط هذه الطرق الظروف التجريبية بمعايير الجرعات الوطنية وتسمح بقياسات دقيقة للجرعات التي تطابق جرعات المعالجة الإشعاعية. مع التركيز على تصميم تجارب العلاج الإشعاعي القابلة للاستنساخ ، يوفر هذا البروتوكول للباحثين الأدوات والأساليب اللازمة لإجراء دراسات ذات أهمية ترجمة عالية.
يمكن أن تكون بروتوكولات المعايرة قياس الجرعات تحديا للمبتدئين، وخاصة بالنسبة لأولئك الذين لا خلفية في الفيزياء الطبية. نقترح استشارة الفيزيائي العلاج الإشعاعي عند محاولة هذه التجارب لأول مرة. التقنيات في هذا البروتوكول هي مشتركة بين كل من الفيزيائيين الإشعاع والباحثين الطبية الحيوية.
ومع ذلك، لا تستخدم بعض هذه عادة في تركيبة. ولتحديد ناتج الجرعة المناسبة، قم بتعيين المشعل لتوصيل الإشعاع في ذروة 220 كيلوفولتاج و13 ملليمبير مع حقل مفتوح 17 في 17 سنتيمترًا يقع على بعد 35 سنتيمترًا من المصدر. تصفية شعاع مع مرشح النحاس 0.15 ملليمتر مع تركيز واسع ومحاذاة لوح سنتيمتر واحد، لوح سنتيمترين، لوح سنتيمترين مع غرفة التأين وبلاطة سنتيمتر واحد.
بعد إعداد المكدس الوهمي، أدخل غرفة التأين في الشبح واضبط المداخن بحيث يكون طول المسافة من المصدر إلى السطح 33 سنتيمترًا عند التسوية المناسبة. ثم تأكد من أن هذه القياسات توضع بشكل صحيح داخل غرفة التأين في 35 سم من isocenter. لإنشاء منحنى معايرة فيلم الكروم راديو، وإعداد عدة قطع إضافية من الفيلم من نفس الحجم والتوجه ووضع الفيلم على عمق سنتيمترين في كومة الماء الصلبة الوهمية.
لبدء التشعيع، ضع قطعة واحدة من الفيلم على رأس أربعة سنتيمترات من الماء الصلب ووضع ما تبقى من اثنين من السنتيمترات من الماء الصلب فوق الأفلام. بعد طلب عمليات المسح الضوئي للأفلام بعد التعرض، قم باستيراد ملفات الصور إلى ImageJ بتنسيق ملف tiff وحدد الصورة واللون وحدد قنوات الانقسام. في قناة الصورة الحمراء فقط، استخدم أداة المستطيل لرسم منطقة ذات أهمية واضغط على Ctrl + M للسماح بنسخ القيم الوسط من نافذة النتائج.
مرة واحدة وقد تم الحصول على جميع قيم بكسل للأفلام غير المكشوفة وفضحها، وحساب صافي الكثافة البصرية باستخدام المعادلة كما هو مبين، ثم رسم صافي الكثافة البصرية ضد الجرعة التي تم عرض الفيلم وتناسب مؤامرة مع منحنى تربيعي. لتحديد قيمة ألفا / بيتا لخطوط خلايا سرطانية محددة عبر مقايسة كلونوجينية، عد العدد الناتج من المستعمرات في كل مجموعة العلاج للسماح بحساب جزء البقاء على قيد الحياة من كل لوحة، ثم رسم السجل الطبيعي للكسر البقاء على قيد الحياة ضد الجرعة المقابلة تسليم وتناسب المنحنى مع وظيفة التربيعية. لتحديد إخراج الجرعة المحددة لتصاميم تجريبية متغيرة، حدد حجم الحقل المطلوب والمسافة من المصدر واستخدام أشباح المياه الصلبة لتوفير تراكم و backscatter حسب الحاجة، وتحديد موضع قطعة من الفيلم في التوجه الذي يصور أفضل تصميم تجريبي.
ويمكن بعد ذلك تحديد الجرعة من الكثافة البصرية الصافية للفيلم باستخدام منحنى معايرة الفيلم للجرعة. لتحديد موضع الحزمة المناسبة لعلاج الماوس تحمل الورم، بعد التأكد من عدم الاستجابة لردود الفعل دواسة، واستخدام كاميرا مدخل على متن ومرشح الألومنيوم للحصول على شعاع من الماوس التجريبي دون collimation، ثم الحصول على الموجات الراديوية مع collimation في مكان وتراكب الموجات الراديوية في ImageJ لتحديد موضع شعاع. وباستخدام منحنى المعايرة كما هو موضح، يمكن إنشاء عينتين للفيلم يمكن استخدامهما لتقدير أوقات التشعيع التجريبية المطلوبة.
وتراكب هذه الصور سوف تكشف عن الموقع الدقيق للشعاع الإشعاعي collimated بالنسبة للحيوان الصغير الذي يعالج. ويمكن بعد ذلك تأكيد ترسب الجرعة الناجحة كما يتضح من تلطيخ غاما H2AX الإيجابي الذي لوحظ داخل نصف الكرة الأرضية المعالج فقط في هذا التحليل التمثيلي. تبقى متسقة عند الانتقال من تحديد إخراج المشعع إلى توليد منحنى معايرة الفيلم وعند تحديد الجرعة لتصميمك التجريبي المثالي أمر بالغ الأهمية.
إن اتباع هذه البروتوكولات يمكّن الباحثين من دراسة مجموعة واسعة من الأسئلة البيولوجية الإشعاعية القابلة للتطبيق سريرياً في بيئة قبل السريرية. قد تؤدي هذه الأسئلة إلى فهم أفضل لنتائج المرضى. هذا البروتوكول ليس تقنية جديدة مستقلة.
ومع ذلك، فإن الجمع بين هذه المنهجيات سيؤدي إلى أهمية سريرية مباشرة وإعطاء رؤى في نتائج الجرعات التي شوهدت في العيادة.
