Name: a mouse model of lumbar spine instability
Uploaded: 2021-04-23T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Mouse Model of Lumbar Spine Instability at JoVE.com

Bu çalışma Çin Bilim ve Teknoloji Bakanlığı'ndan Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (81973607) ve Temel İlaç Araştırma ve Geliştirme (2019ZX09201004-003-032) tarafından desteklendi.

Açıklanan araştırmalar, Ulusal Sağlık Enstitüleri Laboratuvar Hayvanlarının Bakımı ve KullanımıNa ilişkin Yönergelere uygundur ve Şanghay Geleneksel Çin Tıbbı Üniversitesi Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi tarafından onaylanmıştır. Tüm cerrahi manipülasyonlar derin anestezi altında yapıldı ve hayvanlar işlem sırasında herhangi bir aşamada ağrı yaşamadı.
1. Operasyon öncesi hazırlık
<ol><li>Alet sterilizasyonu: Ameliyattan önce bir otoklavda (15 daki...

<ol>
	<li>Makino, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lumbar+disc+degeneration+progression+in+young+women+in+their+20's:+a+prospective+ten-year+follow+up.">Lumbar disc degeneration progression in young women in their 20's: a prospective ten-year follow up.</a> Journal of Orthopaedic Science: Official Journal of the Japanese Orthopaedic Association. 22 (4), 635-640 (2017).</li><li>Lee, Y. C., Zotti, M. G. T., Osti, O. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Operative+management+of+lumbar+degenerative+disc+disease.">Operative management of lumbar degenerative disc disease.</a> Asian Spine Journal. 10 (4), 801-819 (2016).</li><li>Wei, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+experimental+intervertebral+disc+degeneration+induced+by+bleomycin+in+the+rhesus+monkey.">In vivo experimental intervertebral disc degeneration induced by bleomycin in the rhesus monkey.</a> BMC Musculoskeletal Disorders. 15, 340 (2014).</li><li>Lim, K. Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ovine+lumbar+intervertebral+disc+degeneration+model+utilizing+a+lateral+retroperitoneal+drill+bit+injury.">Ovine lumbar intervertebral disc degeneration model utilizing a lateral retroperitoneal drill bit injury.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (123), e55753 (2017).</li><li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Histological+features+of+the+degenerating+intervertebral+disc+in+a+goat+disc-injury+model.">Histological features of the degenerating intervertebral disc in a goat disc-injury model.</a> Spine. 36 (19), 1519-1527 (2011).</li><li>Bergknut, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+dog+as+an+animal+model+for+intervertebral+disc+degeneration.">The dog as an animal model for intervertebral disc degeneration.</a> Spine. 37 (5), 351-358 (2012).</li><li>Kong, M. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rabbit+Model+for+in+vivo+Study+of+Intervertebral+Disc+Degeneration+and+Regeneration.">Rabbit Model for in vivo Study of Intervertebral Disc Degeneration and Regeneration.</a> Journal of Korean Neurosurgical Society. 44 (5), 327-333 (2008).</li><li>Gullbrand, S. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+large+animal+model+that+recapitulates+the+spectrum+of+human+intervertebral+disc+degeneration.">A large animal model that recapitulates the spectrum of human intervertebral disc degeneration.</a> Osteoarthritis and Cartilage. 25 (1), 146-156 (2017).</li><li>Jin, L., Balian, G., Li, X. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+for+disc+degeneration-an+update.">Animal models for disc degeneration-an update.</a> Histology and Histopathology. 33 (6), 543-554 (2018).</li><li>O'Connell, G. D., Vresilovic, E. J., Elliott, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+intervertebral+disc+anatomy+across+several+animal+species.">Comparative intervertebral disc anatomy across several animal species.</a> 52nd Annual Meeting of the Orthopaedic Research Society. , (2006).</li><li>Elliott, D. M., Sarver, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Young+investigator+award+winner:+validation+of+the+mouse+and+rat+disc+as+mechanical+models+of+the+human+lumbar+disc.">Young investigator award winner: validation of the mouse and rat disc as mechanical models of the human lumbar disc.</a> Spine. 29 (7), 713-722 (2004).</li><li>Ohnishi, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+mouse+intervertebral+disc+degeneration+model+based+on+a+new+histological+classification.">In vivo mouse intervertebral disc degeneration model based on a new histological classification.</a> Plos One. 11 (8), 0160486 (2016).</li><li>Vo, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Accelerated+aging+of+intervertebral+discs+in+a+mouse+model+of+progeria.">Accelerated aging of intervertebral discs in a mouse model of progeria.</a> Journal of Orthopaedic Research. 28 (12), 1600-1607 (2010).</li><li>Oichi, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+mouse+intervertebral+disc+degeneration+model+by+surgically+induced+instability.">A mouse intervertebral disc degeneration model by surgically induced instability.</a> Spine. 43 (10), 557-564 (2018).</li><li>Ohnishi, T., Sudo, H., Tsujimoto, T., Iwasaki, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-related+spontaneous+lumbar+intervertebral+disc+degeneration+in+a+mouse+model.">Age-related spontaneous lumbar intervertebral disc degeneration in a mouse model.</a> Journal of Orthopaedic Research. 36 (1), 224-232 (2018).</li><li>Stern, W. E., Coulson, W. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+collagenase+upon+the+intervertebral+disc+in+monkeys.">Effects of collagenase upon the intervertebral disc in monkeys.</a> Journal of Neurosurgery. 44 (1), 32-44 (1976).</li><li>Silva, M. J., Holguin, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=LRP5-deficiency+in+OsxCreERT2+mice+models+intervertebral+disc+degeneration+by+aging+and+compression.">LRP5-deficiency in OsxCreERT2 mice models intervertebral disc degeneration by aging and compression.</a> bioRxiv. , (2019).</li><li>Nemoto, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Histological+changes+in+intervertebral+discs+after+smoking+and+cessation:+experimental+study+using+a+rat+passive+smoking+model.">Histological changes in intervertebral discs after smoking and cessation: experimental study using a rat passive smoking model.</a> Journal of Orthopaedic Science: Official Journal of the Japanese Orthopaedic Association. 11 (2), 191-197 (2006).</li><li>Mulholland, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+myth+of+lumbar+instability:+the+importance+of+abnormal+loading+as+a+cause+of+low+back+pain.">The myth of lumbar instability: the importance of abnormal loading as a cause of low back pain.</a> European Spine Journal. 17 (5), 619-625 (2008).</li><li>Bian, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanosignaling+activation+of+TGF&#946;+maintains+intervertebral+disc+homeostasis.">Mechanosignaling activation of TGF&#946; maintains intervertebral disc homeostasis.</a> Bone Research. 5, 17008 (2017).</li><li>Bian, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Excessive+activation+of+tgf&#946;+by+spinal+instability+causes+vertebral+endplate+sclerosis.">Excessive activation of tgf&#946; by spinal instability causes vertebral endplate sclerosis.</a> Scientific Reports. 6, 27093 (2016).</li><li>Ni, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sensory+innervation+in+porous+endplates+by+Netrin-1+from+osteoclasts+mediates+PGE2-induced+spinal+hypersensitivity+in+mice.">Sensory innervation in porous endplates by Netrin-1 from osteoclasts mediates PGE2-induced spinal hypersensitivity in mice.</a> Nature Communications. 10 (1), 5643 (2019).</li><li>Liu, S., Cheng, Y., Tan, Y., Dong, J., Bian, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ligustrazine+prevents+intervertebral+disc+degeneration+via+suppression+of+aberrant+tgf&#946;+activation+in+nucleus+pulposus+cells.">Ligustrazine prevents intervertebral disc degeneration via suppression of aberrant tgf&#946; activation in nucleus pulposus cells.</a> BioMed Research International. 2019, 5601734 (2019).</li><li>Boos, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Classification+of+age-related+changes+in+lumbar+intervertebral+discs:+2002+Volvo+Award+in+basic+science.">Classification of age-related changes in lumbar intervertebral discs: 2002 Volvo Award in basic science.</a> Spine. 27 (23), 2631-2644 (2002).</li><li>Miyamoto, S., Yonenobu, K., Ono, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+cervical+spondylosis+in+the+mouse.">Experimental cervical spondylosis in the mouse.</a> Spine. 16, 495-500 (1991).</li></ol>

Bel omurgası instabilite fare modelini, omurlardan gelen arka paravertebral kasların koptuğu ve supraspinous ve interspinous ligamentlerle birlikte dikenli süreçlerin resected edildiği servikal spondilyoz fare modeline dayanarak geliştirdik25. Daha belirgin dikenli süreçlere sahip bel omurgasına da benzer bir operasyon gerçekleştirdik. LSI fare modeli bel omurgasında benzer bir IDD geliştirdi.
LSI modelinin avantajları arasında güçlü çalışabilirlik...

Intervertebral disk dejenerasyonu (IDD) yaşlanmada ve hatta gençlerde birçok faktörün neden olduğu yaygın olarak görülür1. IDD'den muzdarip, bel ağrısına ve hareket bozukluğuna neden olan hastalar için cerrahi, genellikle daha sonraki bir aşamada veya ciddi vakalarda gerçekleştirilir ve nonunion veya enfeksiyon gibi potansiyel riskleri vardır2. İdeal ameliyatsız tedavi, IDD mekanizmasının kapsamlı bir şekilde anlaşılmasını gerektirir. IDD hayvan modeli, IDD mekanizmasının çalışmaları ve IDD tedavisinin değerlendirilmesi için çok önemli bir araç olarak hizmet vermektedir.
Primatlar, koyunlar, keçiler, köpekler ve tavşanlar gibi IDD modelleri için, insan anatomik yapısına büyük ölçüde benzerlikleri ve omurgalararası disklerin (IVD) büyüklüğü açısından güçlü çalışabilirlikleri nedeniyle daha büyük hayvanlar seçilmiştir3,4,5 ,6,7,8. Ancak, bu hayvan modelleri zaman alıcı ve maliyet yoğun9. Fare IVD, en boy oranının geometrik ölçümlerine, çekirdek pulposus'un disk alan oranına ve normalleştirilmiş yükseklik10'adayanarak insan IVD'nin zayıf bir temsilidir. Boyut farklılığına rağmen, fare bel IVD segmenti sıkıştırma ve burulma sertliği11gibi insan IVD'ye benzer mekanik özellikler sergiler. Ek olarak, fare IDD modeli düşük maliyetli, nispeten kısa IDD geliştirme avantajına sahiptir ve genetiği değiştirilmiş hayvanlar ve antikorlar için daha fazla seçenek daha fazla mekanistik çalışmalarda kullanılır12,13,14,15.
Deneysel kaynaklı IDD modelleri indükleyicilerden ve uygulamalardan farklılık gösterir. Örneğin, kollajenaz kaynaklı hücre dışı matris (ECM) dejenerasyonu ECM rejenerasyon araştırması için uygundur16. Genetiği değiştirilmiş fenotip, IDD sürecinde ve genetik tedavilerde gen fonksiyonunu incelemek için uygundur17. Annulus fibrosus kesi ve duman modelleri travmayı taklit eder ve inflamasyona neden olmayan IDD12,18.
Spinal instabilite (SI), optimal denge durumunda olmayan dengesiz bir omurgaya yol açar. Bağlar ve kaslar gibi çevredeki destekleyici dokunun zayıflığı nedeniyle bel hareket segmentinin anormal hareketinden kaynaklanabilir. Spinal füzyon operasyonu sonrası da yaygın olarak görülür19. SI, IDD'nin ana nedeni olarak kabul edilir. Bu nedenle, insan kimliği sürecini taklit eden bir SI fare modeli (bel omurgasına odaklanmış) geliştirmeyi hedefliyoruz20,21.
Protokolde, lupraspinous ve interspinous ligamentler (Şekil 1A,B)ile birlikte bel üçüncü (L3) ile lomber beşinci (L5)spinli süreçlerin rezeksiyonu ile lomber spinal instabilite (LSI) fare modeli kurma prosedürünü getirdik. Hayvan modeli, hipertrofi ve endplatlarda (EPs) gözeneklilik ile gösterildiği gibi ameliyat sonrası 1 haftalık kadar erken bir sürede IDD geliştirir. IVD hacmi, ameliyat sonrası 2 hafta ile 16 hafta arasında azalmaya başlar ve bu da IDD derecesini gösterir. Ayrıntılı ve görselleştirilmiş prosedürün araştırmacıların laboratuvarlarında LSI fare modelini kurmaları ve gerektiğinde IDD araştırmalarına başvurmaları için yararlı olduğuna inanıyoruz.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Chlortetracycline Hydrochloride Eye Ointment</td>
			<td>Shanghai General Pharmaceutical Co., Ltd.</td>
			<td>H31021931</td>
			<td>Prevent eye dry, Prevent wound infection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C57BL/6J male mice</td>
			<td>Tian-jiang Pharmaceuticals Company (Jiangsu, CN)</td>
			<td>SCXK2018-0004</td>
			<td>Animal model</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable medical towel</td>
			<td>Henan Huayu Medical Devices Co., Ltd.</td>
			<td>20160090</td>
			<td>Platform for surgical operation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Inhalant anesthesia equipment</td>
			<td>MIDMARK</td>
			<td>Matrx 3000</td>
			<td>Anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Shenzhen RWD Life Technology Co., Ltd.</td>
			<td>1903715</td>
			<td>Anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lidocaine hydrochloride</td>
			<td>Shandong Hualu Pharmaceutical Co., Ltd.</td>
			<td>H37022839</td>
			<td>Pain relief</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical suture needle</td>
			<td>Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd.</td>
			<td>20S0401J</td>
			<td>Suture skin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ophthalmic forceps</td>
			<td>Shanghai Medical Devices (Group) Co., Ltd. Surgical Instruments Factory</td>
			<td>JD1050</td>
			<td>Clip the skin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ophthalmic scissors(10cm)</td>
			<td>Shanghai Medical Devices (Group) Co., Ltd. Surgical Instruments Factory</td>
			<td>Y00030</td>
			<td>Skin incision</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>silk braided</td>
			<td>Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd.</td>
			<td>11V0820</td>
			<td>Suture skin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small animal trimmer</td>
			<td>Shanghai Feike Electric Co., Ltd.</td>
			<td>FC5910</td>
			<td>Hair removal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile surgical blades(12#)</td>
			<td>Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd.</td>
			<td>35T0707</td>
			<td>Muscle incision</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Veet hair removal cream</td>
			<td>RECKITT BENCKISER (India) Ltd</td>
			<td>NA</td>
			<td>Hair removal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Venus shears</td>
			<td>Mingren medical equipment</td>
			<td>Length:12.5cm</td>
			<td>Clip the muscle and spinous process</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a mouse model of lumbar spine instability

Intervertebral disk dejenerasyonu (IDD), bel ağrısına yol açan yaygın bir patolojik değişikliktir. Patolojik süreçleri anlamak ve yeni ilaçların değerlendirilmesi için uygun hayvan modelleri istenmek istenmemektedir. Burada ameliyat sonrası 1 haftadan itibaren IDD geliştiren cerrahi olarak indüklenen bel omurga instabilitesi (LSI) fare modelini tanıttık. Ayrıntılı olarak, anestezi altındaki fare bel derisi kesisi, L3–L5 dikenli işlemler maruz kalma, paraspinöz kasların dekupsiyonu, süreçlerin ve bağların rezeksiyonu ve cilt kapanması ile ameliyat edildi. Gözlem için L4-L5 IVD'ler seçildi. LSI modeli erken evrede gözeneklilik ve uç plakalarda hipertrofi, intervertebral disk hacminde azalma, bir ara aşamada çekirdek pulposusunda büzülme ve daha sonraki bir aşamada bel omurlarında (L5)kemik kaybı ile bel IDD'si geliştirir. LSI fare modeli, güçlü çalışabilirlik, özel ekipman gereksinimi, tekrarlanabilirlik, ucuz ve nispeten kısa IDD geliştirme süresi avantajlarına sahiptir. Bununla birlikte, LSI operasyonu hala operasyon sonrası ilk hafta içinde inflamasyona neden olan bir travmadır. Bu nedenle, bu hayvan modeli bel IDD'nin incelenmesi için uygundur.

LSI fare modeli, IDD mekanizması, IDD tedavisi, skleroz gibi uç plaka (EP) dejenerasyonu ve EP 20 ,21 , 22,23'teduyusal innervasyon çalışmalarında uygulanır. LSI fare, tanımlanacağı gibi, azaltılmış IVD hacmi ve yüksekliği, artan EP hacmi ve artan IVD ve EP puanları ile IDD ve EP dejeneratif değişiklikler geliştirir.
Diseksiyonlu ve sabit alt toras...

Watch this Scientific Journal Video about A Mouse Model of Lumbar Spine Instability at JoVE.com

A Mouse Model of Lumbar Spine Instability

L3–L5 spinli süreçlerin yanı sıra supra ve spinler arası bağlar ve paraspinöz kasların kopması ile bel intervertebral disk dejenerasyon fare modeli geliştirdik.

Bel Omurgası Kararsızlığının Fare Modeli

Intervertebral disc degeneration (IDD) is a common pathological change leading to low back pain. Appropriate animal models are desired for understanding ...

Bu, fare modelini teşvik etmek için bir ameliyattır, bel intervertebral disk dejenerasyonu ile ilgili çalışmalar için bir alternatif sunar. Bu sağlam LSI modu özel ekipman gerektirmez. Tekrarlanabilir ve nispeten kısa bir süre içinde intervertebral disk dejenerasyonuna neden olmak için kullanılabilir.Kesi derinliklerini ve kanamayı kontrol etmek ve her bir interspinous işlemin rezeksiyonu için gerçekleştirmek, deney için başarımızın implantasyonu için iki temel masraftır. Pedal refleksine yanıt eksikliğini doğruladıktan sonra, sırtüstü pozisyonda cerrahi bir ped üzerine uyuşturulmış sekiz haftalık, erkek, C57 siyah altı fare yerleştirin ve hayvanın gözlerine merhem uygulayın. Cerrahi bölgeyi alt torasik bölgeden sakral bölgenin tepesine tıraş etmek ve tıraş edilen kürkü doku mendilleriyle çıkarmak için küçük bir hayvan düzeltici kullanın.Kremi üç dakikadan fazla bir süre sonra çıkarmak için gazlı bez kullanarak tıraş edilen bölgeye depilatör krem uygulayın ve açıkta kalan cildi iki mililitre 0,9 steril salin ile yıkayın. Daha sonra bel omurgasını yükseltmek için karnın altına özel yapım bir cerrahi silindirik ped yerleştirin. L3 ve L5 omurlarını ortaya çıkarmak için işaret parmağını kullanarak bel omurlarının deri altı dikenli işlemlerine dokunun ve paçumya, bel bölgesini tanımlamak için işlemleri torasik omur ve sakral omurlarınkilerle karşılaştırın.Cildi % 75 alkolle durulayın ve bir diseksiyon mikroskobu kullanarak, orta torasik bölgeden kalçaya kadar bel bölgesi üzerinde üç ila dört santimetrelik bir orta çizgi cilt kesisi yapmak için bir neşter kullanın. Bel omurgasını, uç kısmına yerleştirilen arka fasyanın V şekliyle tanımlayın, böylece dikenli işlemler yapın ve neşteri, omurganın her iki tarafında L3'ten L5'e kadar dikenli işlemler boyunca sığ posterior paraspinöz kas kesileri yapmak için kullanın. Daha sonra L3'i L5 dikenli işlemlere ve supraspinous ligamentlere maruz bırakmak için kas katmanlarını ayırmak için iki çift oftalmik toka kullanın.Tek tek dikenli işlemleri ayırmak için,pinöz bağları kesmek ve L3 ila L5 spinli işlemleri ve interspinous ligamentleri resect etmek için venöz sheers kullanın. Daha sonra paravertebral kasları yeniden takmadan cilt kesisini kapatmak ve cerrahi bölgeye klortetrasiklin hidroklorür merhem uygulamak için steril beş numaralı ipek örgülü dikişleri kullanın. 3D histopomorfometrik analizler intervertebral disk ölçümüne izin verirken, 3D yapısal analiz toplam doku hacminin ölçülmesini sağlar.İntervertebral disk hacmi ameliyattan bir hafta sonra önemli ölçüde artar ve işlemden iki ila 16 hafta sonra aynı zaman diliminde ölçülen intervertebral disk yüksekliğindeki azalma ile uyumlu olarak azalır. Kraniyal uç plakalar içindeki artan boşluklar, LSI farelerde, 0.089'a daha büyük veya eşit trabeküler ayırma değerlerinin artan bir yüzdesi ve ameliyat sonrası plaka hacimlerinde önemli bir artış ile ölçtüğü için de gözlenmektedir. Model uç plakaları, LSI'ın uç plaka hipertrofisine ve boşluk sayısında bir artışa yol açtığını gösteren benzer bir fenotip sergiler.L5 omur hacimleri 16 haftada gözlenen istatistiksel farklılıklarla ameliyat sonrası hafifçe artar. Ameliyattan 16 hafta sonra kemikte toplam doku hacmi oranında belirgin bir azalma da mevcuttur, bu da LSI'ın daha sonraki bir aşamada omur kemik kaybına neden olduğunu gösterir. LSI hayvanlarında çekirdek pulposus hücrelerinin hücre içi vakuollerinde azalma, LSI uç plakalarında gözlenen osteoklast sayısının artmasıyla da hızlandırılmıştır.Bu model, yalnızca beşinci bel gibi farklı sayıda omur takılarak veya birinci lomberden beşinci bel'e kadar değiştirilebilir.

Research

JoVE Journal

Biology

In vivo Imaging and Therapeutic Treatments in an Orthotopic Mouse Model of Ovarian Cancer

In vivo Imaging and Therapeutic Treatments in an Orthotopic Mouse Model of Ovarian Cancer

In vivo Görüntüleme ve Yumurtalık Kanseri Ortotopik Fare Modeli Tedavi Tedaviler

Human cancer and response to therapy is better represented in orthotopic animal models.  This paper describes the development of an orthotopic mouse model ...

Studying Age-dependent Genomic Instability using the S. cerevisiae Chronological Lifespan Model

Studying Age-dependent Genomic Instability using the S. cerevisiae Chronological Lifespan Model

Yaşa bağımlı Genomik İstikrarsızlık incelenmesi S. cerevisiae Kronolojik ömrü Modeli

Studies using the Saccharomyces cerevisiae aging model have uncovered life span regulatory pathways that are partially conserved in higher eukaryotes1-2. ...

Generation of Mice Derived from Induced Pluripotent Stem Cells

İsteyerek Pluripotent Kök Hücrelerinin Elde Edilen Fare Üretimi

The production of induced pluripotent stem cells (iPSCs) from somatic cells provides a means to create valuable tools for basic research and may also ...

Validation of a Mouse Model to Disrupt LINC Complexes in a Cell-specific Manner

Fare Modeli Doğrulanması Hücre-spesifik şekilde LINC kompleksler bozacak

Nuclear migration and anchorage within developing and adult tissues relies heavily upon large macromolecular protein assemblies called LInkers of the ...

Trans-inner Cell Mass Injection of Embryonic Stem Cells Leads to Higher Chimerism Rates

Trans-iç hücre embriyonik kök hücrelerin kitle enjeksiyon daha yüksek Chimerism oranları için yol açar.

In an effort to increase efficiency in the creation of genetically modified mice via ES Cell methodologies, we present an adaptation to the current ...

A Mouse Model of Intestinal Partial Obstruction

Bağırsak kısmi tıkanıklık bir fare modeli

Intestinal obstructions, that impede or block peristaltic movement, can be caused by abdominal adhesions and most gastrointestinal (GI) diseases including ...

Noninvasive Monitoring of Lesion Size in a Heterologous Mouse Model of Endometriosis

Lezyon boyutu endometriozis, kapaklı fare modeli noninvaziv izlenmesi

Here, we describe a protocol for the implementation of a heterologous mouse model in which progression of endometriosis can be assessed in real time ...

Mass Spectrometry Analysis to Identify Ubiquitylation of EYFP-tagged CENP-A (EYFP-CENP-A)

Mass Spectrometry Analysis to Identify Ubiquitylation of EYFP-tagged CENP-A EYFP-CENP-A

EYFP etiketli CENP-A (EYFP-CENP-A) Ubiquitylation tanımlamak için Kütle Spektrometresi Analizi

Studying the structure and the dynamics of kinetochores and centromeres is important in understanding chromosomal instability (CIN) and cancer ...

Skeletal Phenotype Analysis of a Conditional Stat3 Deletion Mouse Model

Skeletal Phenotype Analysis of a Conditional Stat3 Deletion Mouse Model

Koşullu Stat3 Silme Fare Modelinin İskelet Fenotip Analizi

Transgenic mouse models are powerful for understanding the critical genes controlling osteoclast differentiation and activity, and for studying mechanisms ...

A Mouse Model of Ankle-Subtalar Complex Joint Instability

Ayak Bileği Subtalar Kompleks Eklem İnstabilitesinin Bir Fare Modeli

Ankle sprains are perhaps the most common sports injuries in daily life, often resulting in instability of the ankle-subtalar complex joint (ASCJ), and ...