Name: isolation and functional assessment of human breast cancer stem cells from cell and tissue samples
Uploaded: 2020-10-02T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Isolation and Functional Assessment of Human Breast Cancer Stem Cells from Cell and Tissue Samples at JoVE.com

نشكر أعضاء مختبرنا على مناقشاتهم المفيدة ودعمهم. يتم تمويل أبحاثنا حول الخلايا الجذعية لسرطان الثدي والبيئة المكروية للورم من خلال منح من معهد أبحاث جمعية أبحاث السرطان الكندية وبرنامج سرطان الثدي التابع لوزارة الدفاع الأمريكية (Grant # BC160912). يتم دعم V.B. من قبل زمالة ما بعد الدكتوراه الغربية (الجامعة الغربية) ، ويتم دعم كل من A.L.A. و V.B. من قبل جمعية سرطان الثدي في كندا. يتم دعم CL من خلال منحة Vanier Canada للدراسات العليا من حكومة كندا.

تم جمع العينات الجراحية أو الخزعة المشتقة من المريض مباشرة من مرضى سرطان الثدي الموافقين بموجب بروتوكول أخلاقيات الإنسان المعتمد من قبل مجلس الأخلاقيات المؤسسية. تم الحفاظ على جميع الفئران المستخدمة لتوليد نماذج xenograft المشتقة من المريض وإيوائها في منشأة حيوانية معتمدة من المؤسسة. تم إنش...

أصبح ورم خبيث لسرطان الثدي ومقاومة العلاج سببا رئيسيا لوفيات النساء في جميع أنحاء العالم. يساهم وجود مجموعة فرعية من الخلايا الجذعية لسرطان الثدي (BCSCs) في تعزيز ورم خبيث26،43،44،45،46 ومقاومة العلاج21،47<sup...

يعد فهم الآليات الخلوية والجزيئية للخلايا الجذعية البشرية لسرطان الثدي (BCSCs) أمرا بالغ الأهمية لمواجهة التحديات التي تواجه علاج سرطان الثدي. يعود ظهور مفهوم BCSC إلىأوائل القرن الحادي والعشرين ، حيث تم العثور على عدد صغير من خلايا سرطان الثدي CD44 + CD24 / منخفضة قادرة على توليد أورام غير متجانسة في الفئران 1,2. بعد ذلك ، لوحظ أن خلايا سرطان الثدي البشرية ذات النشاط الأنزيمي العالي لنازعة هيدروجين الألدهيد (ALDHhigh) أظهرت أيضا خصائص مماثلة تشبه الخلايا الجذعية3. تمثل هذه BCSCs مجموعة صغيرة من الخلايا القادرة على التجديد الذاتي والتمايز ، مما يساهم في الطبيعة غير المتجانسة للأورام السائبة1،2،3. تشير الأدلة المتراكمة إلى أن التغييرات في مسارات الإشارات المحفوظة تطوريا تدفع بقاء BCSC وصيانته4،5،6،7،8،9،10،11،12،13،14 . بالإضافة إلى ذلك ، فقد ثبت أن البيئة المكروية الخارجية للخلية تلعب دورا محوريا في إملاء وظائف BCSC المختلفة15،16،17. تساهم هذه المسارات الجزيئية والعوامل الخارجية التي تنظم وظيفة BCSC في انتكاس سرطان الثدي ، ورم خبيث18 وتطوير مقاومة للعلاجات19،20،21 ، مع الوجود المتبقي ل BCSCs بعد العلاج الذي يشكل تحديا كبيرا للبقاء على قيد الحياة بشكل عام لمرضى سرطان الثدي22،23 . لذلك فإن التقييم قبل السريري لهذه العوامل مهم جدا لتحديد العلاجات التي تستهدف BCSC والتي يمكن أن تكون مفيدة لتحقيق نتائج علاجية أفضل وتحسين البقاء على قيد الحياة بشكل عام لدى مرضى سرطان الثدي.
تم استخدام العديد من نماذج خط خلايا سرطان الثدي البشرية في المختبر ونماذج xenograft البشرية في الجسم الحي لتوصيف BCSCs24،25،26،27،28،29. إن قدرة خطوط الخلايا على إعادة الملء باستمرار بعد كل مقطع متتالي تجعلها نظاما نموذجيا مثاليا لإجراء دراسات قائمة على الأوميكس والصيدلة الجينية. ومع ذلك ، غالبا ما تفشل خطوط الخلايا في تلخيص عدم التجانس الذي لوحظ في عينات المرضى. وبالتالي ، من المهم استكمال بيانات خط الخلية بعينات مشتقة من المريض. يعد عزل BCSCs في أنقى صورها أمرا مهما لتمكين التوصيف التفصيلي ل BCSCs. يعتمد تحقيق هذا النقاء على اختيار علامات النمط الظاهري الخاصة ب BCSCs. حاليا ، يستخدم النمط الظاهريللخليةALDH CD44 + CD24 المرتفع بشكل شائع لتمييز وعزل BCSCs البشرية عن مجموعات خلايا سرطان الثدي السائبة باستخدام فرز الخلايا المنشط مضان (FACS) لتحقيق أقصى قدر من النقاء1 ، 3,26. علاوة على ذلك ، يمكن تقييم خصائص BCSCs المعزولة مثل التجديد الذاتي والانتشار والتمايز باستخدام تقنيات في المختبر وفي الجسم الحي.
على سبيل المثال ، يمكن استخدام فحوصات تشكيل مستعمرة في المختبر لتقييم قدرة خلية واحدة على التجديد الذاتي لتشكيل مستعمرة من 50 خلية أو أكثر في وجود ظروف علاج مختلفة30. يمكن أيضا استخدام فحوصات الماموسفير لتقييم إمكانات التجديد الذاتي لخلايا سرطان الثدي في ظل ظروف مستقلة عن المرساة. يقيس هذا الفحص قدرة الخلايا المفردة على التوليد والنمو ككرات (خليط من BCSCs وغير BCSCs) في كل ممر متتالي في ظروف الاستزراع غير الملتصقة الخالية من المصل31. بالإضافة إلى ذلك ، يمكن استخدام نماذج الثقافة ثلاثية الأبعاد (3D) لتقييم وظيفة BCSC ، بما في ذلك تفاعلات الخلية الخلوية ومصفوفة الخلية التي تلخص عن كثب البيئة المكروية في الجسم الحي وتسمح بالتحقيق في نشاط العلاجات المحتملة التي تستهدف BCSC32. على الرغم من التطبيقات المتنوعة للنماذج في المختبر ، من الصعب نمذجة تعقيد الظروف في الجسم الحي باستخدام المقايسات في المختبر فقط. يمكن التغلب على هذا التحدي باستخدام نماذج xenograft للفأر لتقييم سلوك BCSC في الجسم الحي. على وجه الخصوص ، تعمل هذه النماذج كنظام مثالي لتقييم ورم خبيث لسرطان الثدي 33 ، والتحقيق في التفاعلات مع البيئة المكروية أثناء تطور المرض 34 ، والتصوير في الجسم الحي 35 ، وللتنبؤ بالسمية الخاصة بالمريض وفعالية العوامل المضادة للأورام34.
يوفر هذا البروتوكول وصفا مفصلا لعزل ALDHالبشري عاليCD44 + CD24- BCSCs بأقصى درجات النقاء عن المجموعات السائبة من خلايا سرطان الثدي غير المتجانسة. كما نقدم وصفا مفصلا لثلاث تقنيات في المختبر (مقايسة تشكيل المستعمرة ، ومقايسة الغلاف الجوي ، ونموذج ثقافة 3D) ومقايسة الكسب غير المشروع للورم في الجسم الحي التي يمكن استخدامها لتقييم الوظائف المختلفة ل BCSCs. ستكون هذه الطرق مناسبة للاستخدام من قبل الباحثين المهتمين بعزل وتوصيف BCSCs من خطوط خلايا سرطان الثدي البشرية أو خلايا سرطان الثدي المشتقة من المريض الأولي وأنسجة الورم لأغراض فهم بيولوجيا BCSC و / أو التحقيق في علاجات جديدة تستهدف BCSC.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>7-Aminoactinomycin D (7AAD)</td>
			<td>BD</td>
			<td>51-68981E</td>
			<td>suggested: 0.25 &#181;g/1x106 cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetone</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>A18-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aldehyde dehydrogenase (ALDH) substrate</td>
			<td>Stemcell Technologies</td>
			<td>1700</td>
			<td>Sold commerically as part of the ALDEFLOUR Assay kit; follow manufacturer&#39;s instructions for ALDH substrate preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Basement membrane extract (BME)</td>
			<td>Corning</td>
			<td>354234</td>
			<td>Sold under the commercial name Matrigel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture plates: 6 well</td>
			<td>Corning</td>
			<td>877218</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture plates: 60mm</td>
			<td>Corning</td>
			<td>353002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture plates: 96-well ultra low attachment</td>
			<td>Corning</td>
			<td>3474</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell strainer: 40 micron</td>
			<td>BD</td>
			<td>352340</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagen</td>
			<td>Stemcell Technologies</td>
			<td>7001</td>
			<td>Prepare 1:30 dilution of 3 mg/mL collagen in PBS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>11088807001</td>
			<td>1x</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Conical tubes: 50 mL</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>05-539-7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Crystal violet</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C6158</td>
			<td>Use 0.05% crystal violet solution in water for staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dispase</td>
			<td>Stemcell Technologies</td>
			<td>7913</td>
			<td>5U/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM:F12</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11330-032</td>
			<td>1x, With L-glutamine and 15 mM HEPES</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DNAse</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D5052</td>
			<td>0.1 mg/mL final concentration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBS</td>
			<td>Avantor Seradigm Lifescience</td>
			<td>97068-085</td>
			<td>&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flow tubes: 5ml</td>
			<td>BD</td>
			<td>352063</td>
			<td>Polypropylene round-bottom tubes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methanol</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>84124</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>mouse anti-Human CD24 antibody</td>
			<td>BD</td>
			<td>561646</td>
			<td>R-phycoerythrin and Cyanine dye conjugated Clone: ML5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>mouse anti-Human CD44 antibody</td>
			<td>BD</td>
			<td>555479</td>
			<td>R-phycoerythrin conjugated, Clone: G44-26</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N,N-diethylaminobenzaldehyde (DEAB)</td>
			<td>Stemcell Technologies</td>
			<td>1700</td>
			<td>Sold commerically as part of the ALDEFLOUR Assay kit; follow manufacturer&#39;s instructions DEAB preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS</td>
			<td>Wisent Inc</td>
			<td>311-425-CL</td>
			<td>1x, Without calcium and magnesium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>25200-056</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mammosphere Media Composition</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B27</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>17504-44</td>
			<td>1x</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>bFGF</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>F2006</td>
			<td>10 ng/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BSA</td>
			<td>Bioshop</td>
			<td>ALB003</td>
			<td>04%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM:F12</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11330-032</td>
			<td>1x, With L-glutamine and 15 mM HEPES</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EGF</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>E9644</td>
			<td>20 ng/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>16634</td>
			<td>5 &#181;g/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3D Organoid Media Composition</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>A8301</td>
			<td>Tocris</td>
			<td>2939</td>
			<td>500 nM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B27</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>17504-44</td>
			<td>1x</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM:F12</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11330-032</td>
			<td>1x, With L-glutamine and 15 mM HEPES</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EGF</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>E9644</td>
			<td>5 ng/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FGF10</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>100-26</td>
			<td>20 ng/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FGF7</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>100-19</td>
			<td>5 ng/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GlutaMax</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>35050-061</td>
			<td>1x</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15630-080</td>
			<td>10 mM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N-acetylcysteine</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A9165</td>
			<td>1.25 mM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neuregulin &#946;1</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>100-03</td>
			<td>5 nM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nicotinamide</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>N0636</td>
			<td>5 mM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Noggin</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>120-10C</td>
			<td>100 ng/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>R-spondin3</td>
			<td>R&#38;D</td>
			<td>3500</td>
			<td>250 ng/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SB202190</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S7067</td>
			<td>500 nM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Y-27632</td>
			<td>Tocris</td>
			<td>1254</td>
			<td>5 &#181;M</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

isolation and functional assessment of human breast cancer stem cells from cell and tissue samples

الخلايا الجذعية لسرطان الثدي (BCSCs) هي خلايا سرطانية ذات خصائص شبيهة بالخلايا الجذعية الموروثة أو المكتسبة. على الرغم من تواترها المنخفض ، إلا أنها تساهم بشكل رئيسي في بدء سرطان الثدي والانتكاس وورم خبيث ومقاومة العلاج. من الضروري فهم بيولوجيا الخلايا الجذعية لسرطان الثدي من أجل تحديد أهداف علاجية جديدة لعلاج سرطان الثدي. يتم عزل الخلايا الجذعية لسرطان الثدي وتمييزها بناء على التعبير عن علامات سطح الخلية الفريدة مثل CD44 و CD24 والنشاط الأنزيمي لنازعة هيدروجين الألدهيد (ALDH). تشكل خلايا ALDHعاليةCD44 + CD24- مجموعة BCSC ويمكن عزلها عن طريق فرز الخلايا المنشط بالفلور (FACS) للدراسات الوظيفية النهائية. اعتمادا على السؤال العلمي ، يمكن استخدام طرق مختلفة في المختبر وفي الجسم الحي لتقييم الخصائص الوظيفية ل BCSCs. هنا ، نقدم بروتوكولا تجريبيا مفصلا لعزل BCSCs البشرية من كل من المجموعات غير المتجانسة من خلايا سرطان الثدي وكذلك أنسجة الورم الأولية التي تم الحصول عليها من مرضى سرطان الثدي. بالإضافة إلى ذلك ، نسلط الضوء على المصب في المقايسات الوظيفية في المختبر وفي الجسم الحي بما في ذلك فحوصات تشكيل المستعمرة ، ومقايسات الغلاف الجوي ، ونماذج ثقافة 3D ومقايسات الكسب غير المشروع للورم التي يمكن استخدامها لتقييم وظيفة BCSC.

يسمح البروتوكول الموصوف بعزل BCSCs البشرية عن مجموعة غير متجانسة من خلايا سرطان الثدي ، إما من خطوط الخلايا أو من أنسجة الورم المنفصلة. بالنسبة لأي خط خلية أو عينة نسيج معينة ، من الأهمية بمكان إنشاء معلق أحادي الخلية موحد لعزل BCSCs بأقصى درجات النقاء لأن تلويث السكان غير BCSC يمكن أن يؤدي إلى اس...

Watch this Scientific Journal Video about Isolation and Functional Assessment of Human Breast Cancer Stem Cells from Cell and Tissue Samples at JoVE.com

Isolation and Functional Assessment of Human Breast Cancer Stem Cells from Cell and Tissue Samples

يصف هذا البروتوكول التجريبي عزل BCSCs من عينات خلايا وأنسجة سرطان الثدي بالإضافة إلى المقايسات في المختبر وفي الجسم الحي التي يمكن استخدامها لتقييم النمط الظاهري ووظيفة BCSC.

العزل والتقييم الوظيفي للخلايا الجذعية لسرطان الثدي البشري من عينات الخلايا والأنسجة

Breast cancer stem cells (BCSCs) are cancer cells with inherited or acquired stem cell-like characteristics. Despite their low frequency, they are major ...

This technique will allow researchers to isolate breast cancer stem cells at maximum purity and viability for the performance of both in vitro and in vivo functional characterization assays. Isolated breast cancer stem cells can also be used to help elucidate the molecular events that control tumorigenicity and metastasis, and to design therapeutic strategies to target these cells. With minor modifications specific to the cell and tissue types of interest, this method can also be applied to other systems.To generate a single cell suspension from a cell culture, wash an 80%confluent breast cancer cell culture with PBS and treat the cells with an appropriate cell dissociation solution for five minutes at room temperature. Once the cells have detached, add five milliliters of culture medium to neutralize the cell dissociation solution and transfer the cells to a 50 milliliter conical tube for centrifugation. Resuspend the pellet in five milliliters of PBS for counting.After counting, centrifuge the cells again, then resuspend the cells at one times 10 to six cells per milliliter of ALDH substrate buffer. To generate a single cell suspension from a tissue sample, use surgical blades in a crisscross technique to mince the tumor tissue into approximately one millimeter size pieces. Place the pieces in a 50 milliliter conical tube containing 10 milliliters of dissociation buffer.Seal the tube with parafilm for a 40 minute incubation at 37 degrees Celsius in a shaker and sediment the digested tissue pieces by centrifugation. Resuspend the pellet in five milliliters of trypsin using a five milliliter pipette and incubate the tissue in a 37 degree water bath for five minutes. At the end of the incubation, vigorously pipette the tissue several times to release single cells and add enough DMEM/F-12 medium to bring the total volume in the tube to 25 milliliters.Collect the cells by centrifugation, resuspend the pellet in one milliliter of Displace DNAse, and incubate for five minutes in a 37 degree Celsius water bath. At the end of the incubation, bring the total volume to 10 milliliters with PBS. Mix the cells by pipetting and passage them through a 40 micron cell strainer into a 50 milliliter tube.After centrifugation, resuspend the cells in five milliliters of fresh PBS for counting. To perform a colony forming assay, after sorting, resuspend the cells in complete medium and add the appropriate number of breast cancer stem cells to each of the three tubes containing two milliliters of medium per tube, labeled one times 10 to the second, two times 10 to the second, or five times 10 to the second cells. Pipette up and down five times to thoroughly mix the cell suspension and plate the cells into individual wells of a six well plate.Gently swirl the plate to obtain uniform cell distributions and place the plate in the cell culture incubator until colonies appear. At the end of the incubation, wash the cells with one milliliter of PBS per well and stain the cells with 500 microliters of 0.05%crystal violet solution per well for 30 seconds. At the end of the incubation, wash the wells two times with two milliliters of water per well to remove the excess dye, and count and record the total number of colonies per well by light microscopy at a four or 10 times magnification.To perform a mammosphere assay, after sorting, resuspend the cells in complete mammosphere medium and plate the at a seating density of five times 10 of the second cells per square centimeter area per well in a 96 well ultra-low attachment cell culture plate. Before counting the number of mammospheres per well by light microscopy, place the plate in the cell culture incubator for five to 10 days. To set up a 3D culture model, carefully add 50 microliters of basement membrane extract to each well of a 96 well plate without bubbles and place the plate at 37 degrees Celsius for one hour to allow the solution to polymerize.Add 100 microliters of PBS after 10 minutes to avoid drying of the gel layer. At the end of the incubation, suspend the sorted cells to five to 50 times 10 to the third cells per 200 microliters of 3D culture medium concentration and replace the PBS in each well of the 96 well plate with 200 microliters of media containing cells. Then place the plate in the cell culture incubator for 10 to 14 days before assessing the cultures for organoid formation.Human breast cancer cells that exhibit enhanced ALDH enzymatic activity express high levels of CD44 and low to negative levels of expression of CD24, and can be classified as breast cancer stem cells. The proportion of breast cancer stem cells within the bulk population can vary between cell lines or patients and often depends on the disease stage, with more aggressive breast cancer typically displaying a higher proportion of breast cancer stem cells. The ability of a single breast cancer cell to self-renew and generate colonies of 50 cells can be assessed by colony forming assays.The ability of breast cancer stem cells to self-renew under anchorage-independent experimental conditions can be assessed by mammosphere assays. Culturing breast cancer cells and basement membrane extract allows breast cancer stem cells to form 3D structures that recapitulate in vivo conditions. In addition, in vivo mouse xenograft models can be used to understand the differences in growth, self-renewal, differentiation, and/or the tumor initiating ability of breast cancer stem cells compared to non-breast cancer stem cells or bulk cell populations.Following this procedure, the isolated breast cancer stem cells can be used in transcriptomic, kinomic, and metabolomic studies. This method provides researchers with an opportunity to explore the role of breast cancer stem cells in tumor initiation, metastasis, recurrence, and therapy resistance.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Establishment of Cancer Stem Cell Cultures from Human Conventional Osteosarcoma

إنشاء السرطان الجذعية الثقافات خلية من ساركوما العظام التقليدية الإنسان

The current improvements in therapy against osteosarcoma (OS) have prolonged the lives of cancer patients, but the survival rate of five years remains ...

Utilizing Functional Genomics Screening to Identify Potentially Novel Drug Targets in Cancer Cell Spheroid Cultures

الاستفادة من علم الجينوم وظيفية الفرز لتحديد أهداف المخدرات رواية يحتمل في الثقافات كروي الخلية السرطانية

The identification of functional driver events in cancer is central to furthering our understanding of cancer biology and indispensable for the discovery ...

Synthesis and Characterization of an Aspirin-fumarate Prodrug that Inhibits NF&#954;B Activity and Breast Cancer Stem Cells

توليف وتوصيف للدواء مساعد الأسبرين-فومرت أن يمنع آخر عامل نووي معزز لسلسلة ضوء كابا في الخلايا البائية النشطة والثدي خلايا السرطان الجذعية

Inflammation is a cancer hallmark that underlies cancer incidence and promotion, and eventually progression to metastasis. Therefore, adding an ...

Invasive Behavior of Human Breast Cancer Cells in Embryonic Zebrafish

السلوك الغازية من خلايا سرطان الثدي البشرية في الجنينية الزرد

In many cases, cancer patients do not die of a primary tumor, but rather because of metastasis. Although numerous rodent models are available for studying ...

Flow Cytometric Detection of Newly-formed Breast Cancer Stem Cell-like Cells After Apoptosis Reversal

تدفق سيتوميتريك الكشف عن خلايا شبيهة بالخلايا الجذعية سرطان الثدي التي شكلت حديثا بعد عكس المبرمج

Cancer recurrence has long been studied by oncologists while the underlying mechanisms remain unclear. Recently, we and others found that a phenomenon ...

Mesenchymal Stem Cell Isolation from Pulp Tissue and Co-Culture with Cancer Cells to Study Their Interactions

عزل الخلايا الجذعية الوسيطة من أنسجة اللب والثقافة المشتركة مع الخلايا السرطانية لدراسة التفاعلات الخاصة بها

Cancer as a multistep process and complicated disease is not only regulated by individual cell proliferation and growth but also controlled by tumor ...

Obtaining Cancer Stem Cell Spheres from Gynecological and Breast Cancer Tumors

الحصول على خلايا السرطان الجذعية من أورام أمراض النساء وسرطان الثدي

Cancer stem cells (CSC) are a small population with self-renewal and plasticity which are responsible for tumorigenesis, resistance to treatment and ...

Isolation of Stem-like Cells from 3-Dimensional Spheroid Cultures

عزل خلايا شبيهه بالجذعية من ثقافات كروي ثلاثية الابعاد

Despite advances in adult stem cell research, identification and isolation of stem cells from tissue specimens remains a major challenge. While resident ...

Functional Assessment of BRCA1 variants using CRISPR-Mediated Base Editors

Functional Assessment of BRCA1 variants using CRISPR-Mediated Base Editors

التقييم الوظيفي لمتغيرات BRCA1 باستخدام محررات قاعدة CRISPR-بوساطة

Recent studies have investigated the risks associated with BRCA1 gene mutations using various functional assessment methods such as fluorescent reporter ...

Modeling Breast Cancer in Human Breast Tissue using a Microphysiological System

نمذجة سرطان الثدي في أنسجة الثدي البشرية باستخدام نظام الفيزيولوجيا الدقيقة

Breast cancer (BC) remains a leading cause of death for women. Despite more than $700 million invested in BC research annually, 97% of candidate BC drugs ...