Name: isolation and functional assessment of human breast cancer stem cells from cell and tissue samples
Uploaded: 2020-10-02T14:00:00
Description: Breast cancer stem cells (BCSCs) are cancer cells with inherited or acquired stem cell-like characteristics. Despite their low frequency, they are major ...

Ringraziamo i membri del nostro laboratorio per le loro utili discussioni e supporto. La nostra ricerca sulle cellule staminali del cancro al seno e sul microambiente tumorale è finanziata da sovvenzioni del Canadian Cancer Research Society Research Institute e del Dipartimento della Difesa degli Stati Uniti Breast Cancer Program (Grant # BC160912). V.B. è supportato da una Western Postdoctoral Fellowship (Western University), e sia A.L.A. che V.B. sono supportati dalla Breast Cancer Society of Canada. C.L. è supportato da una borsa di studio Vanier Canada Graduate dal governo del Canada.

La raccolta di campioni chirurgici o bioptici derivati dai pazienti direttamente da pazienti con carcinoma mammario consenzienti è stata effettuata secondo il protocollo di etica umana approvato approvato dal comitato etico istituzionale. Tutti i topi utilizzati per generare modelli di xenotrapianto derivati dal paziente sono stati mantenuti e ospitati in una struttura per animali approvata dall'istituzione. Il tessuto tumorale da modelli di xenotrapianto derivati dal paziente utilizzando topi è stato generato secondo ...

Le metastasi del cancro al seno e la resistenza alla terapia sono diventate la principale causa di mortalità nelle donne di tutto il mondo. L'esistenza di una sottopopolazione di cellule staminali del cancro al seno (BCSC) contribuisce all'aumento delle metastasi 26,43,44,45,46 e alla resistenza alla terapia21,47,48.<sup cla...

Comprendere i meccanismi cellulari e molecolari delle cellule staminali del cancro al seno umano (BCSC) è fondamentale per affrontare le sfide incontrate nel trattamento del cancro al seno. L'emergere del concetto BCSC risale all'inizio del 21° secolo, dove una piccola popolazione di cellule CD44 + CD24-/basso cancro al seno sono state trovate in grado di generare tumori eterogenei nei topi 1,2. Successivamente, è stato osservato che le cellule di cancro al seno umano con elevata attività enzimatica dell'aldeide deidrogenasi (ALDHalto) mostravano anche proprietà simili alle cellule staminali3. Questi BCSCs rappresentano una piccola popolazione di cellule capaci di auto-rinnovamento e differenziazione, contribuendo alla natura eterogenea dei tumori bulk 1,2,3. Prove crescenti suggeriscono che alterazioni nelle vie di segnalazione evolutivamente conservate guidano la sopravvivenza e il mantenimento del BCSC 4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14 . Inoltre, il microambiente estrinseco cellulare ha dimostrato di svolgere un ruolo fondamentale nel dettare diverse funzioni BCSC15,16,17. Queste vie molecolari e i fattori esterni che regolano la funzione del BCSC contribuiscono alla recidiva del cancro al seno, alle metastasi18 e allo sviluppo di resistenza alle terapie 19,20,21, con l'esistenza residua di BCSC post-trattamento che rappresenta una sfida importante per la sopravvivenza globale delle pazienti con carcinoma mammario22,23 . La valutazione pre-clinica di questi fattori è quindi molto importante per identificare le terapie mirate al BCSC che potrebbero essere utili per ottenere migliori risultati di trattamento e una migliore sopravvivenza globale nei pazienti con cancro al seno.
Diversi modelli in vitro di linee cellulari di carcinoma mammario umano e modelli di xenotrapianto umano in vivo sono stati utilizzati per caratterizzare BCSCs 24,25,26,27,28,29. La capacità delle linee cellulari di ripopolarsi continuamente dopo ogni passaggio successivo rende questi un sistema modello ideale per eseguire studi omici e farmacogenomici. Tuttavia, le linee cellulari spesso non riescono a ricapitolare l'eterogeneità osservata nei campioni di pazienti. Pertanto, è importante integrare i dati delle linee cellulari con campioni derivati dal paziente. L'isolamento dei BCSC nella loro forma più pura è importante per consentire una caratterizzazione dettagliata dei BCSC. Il raggiungimento di questa purezza dipende dalla selezione di marcatori fenotipici specifici per i BCSC. Attualmente, il fenotipo cellulareALDH ad altocontenuto di CD44 + CD24- è più comunemente usato per distinguere e isolare i BCSC umani da popolazioni di cellule di cancro al seno di massa utilizzando la selezione cellulare attivata dalla fluorescenza (FACS) per la massima purezza1, 3,26. Inoltre, le proprietà di BCSC isolati come l'auto-rinnovamento, la proliferazione e la differenziazione possono essere valutate utilizzando tecniche in vitro e in vivo.
Ad esempio, i saggi in vitro per la formazione di colonie possono essere utilizzati per valutare la capacità di una singola cellula di auto-rinnovarsi per formare una colonia di 50 cellule o più in presenza di diverse condizioni di trattamento30. I saggi della mammosfera possono anche essere utilizzati per valutare il potenziale di auto-rinnovamento delle cellule del cancro al seno in condizioni indipendenti dall'ancoraggio. Questo test misura la capacità delle singole cellule di generare e crescere come sfere (miscela di BCSC e non BCSC) ad ogni passaggio successivo in condizioni di coltura non aderenti prive di siero31. Inoltre, i modelli di coltura tridimensionale (3D) possono essere utilizzati per valutare la funzione BCSC, comprese le interazioni cellula-cellula e cellula-matrice che ricapitolano da vicino il microambiente in vivo e consentono di studiare l'attività di potenziali terapie mirate al BCSC32. Nonostante le diverse applicazioni dei modelli in vitro, è difficile modellare la complessità delle condizioni in vivo utilizzando solo saggi in vitro. Questa sfida può essere superata utilizzando modelli di xenotrapianto murino per valutare il comportamento BCSC in vivo. In particolare, tali modelli servono come sistema ideale per valutare le metastasi del cancro al seno 33, studiare le interazioni con il microambiente durante la progressione della malattia 34, l'imaging in vivo 35 e per prevedere la tossicità e l'efficacia specifiche del paziente degli agenti antitumorali 34.
Questo protocollo fornisce una descrizione dettagliata per l'isolamento di BCSC umani ALDHad altocontenuto di CD44+CD24- alla massima purezza da popolazioni massicce di cellule eterogenee di carcinoma mammario. Forniamo anche una descrizione dettagliata di tre tecniche in vitro (saggio di formazione di colonie, saggio della mammosfera e modello di coltura 3D) e un saggio di xenotrapianto tumorale in vivo che può essere utilizzato per valutare diverse funzioni dei BCSC. Questi metodi sarebbero appropriati per l'uso da parte di ricercatori interessati a isolare e caratterizzare i BCSC da linee cellulari di carcinoma mammario umano o cellule di cancro al seno derivate da pazienti primari e tessuto tumorale ai fini della comprensione della biologia BCSC e / o dello studio di nuove terapie mirate al BCSC.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>7-Aminoactinomycin D (7AAD)</td>
			<td>BD</td>
			<td>51-68981E</td>
			<td>suggested: 0.25 &#181;g/1x106 cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetone</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>A18-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aldehyde dehydrogenase (ALDH) substrate</td>
			<td>Stemcell Technologies</td>
			<td>1700</td>
			<td>Sold commerically as part of the ALDEFLOUR Assay kit; follow manufacturer&#39;s instructions for ALDH substrate preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Basement membrane extract (BME)</td>
			<td>Corning</td>
			<td>354234</td>
			<td>Sold under the commercial name Matrigel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture plates: 6 well</td>
			<td>Corning</td>
			<td>877218</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture plates: 60mm</td>
			<td>Corning</td>
			<td>353002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture plates: 96-well ultra low attachment</td>
			<td>Corning</td>
			<td>3474</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell strainer: 40 micron</td>
			<td>BD</td>
			<td>352340</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagen</td>
			<td>Stemcell Technologies</td>
			<td>7001</td>
			<td>Prepare 1:30 dilution of 3 mg/mL collagen in PBS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>11088807001</td>
			<td>1x</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Conical tubes: 50 mL</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>05-539-7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Crystal violet</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C6158</td>
			<td>Use 0.05% crystal violet solution in water for staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dispase</td>
			<td>Stemcell Technologies</td>
			<td>7913</td>
			<td>5U/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM:F12</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11330-032</td>
			<td>1x, With L-glutamine and 15 mM HEPES</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DNAse</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D5052</td>
			<td>0.1 mg/mL final concentration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBS</td>
			<td>Avantor Seradigm Lifescience</td>
			<td>97068-085</td>
			<td>&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flow tubes: 5ml</td>
			<td>BD</td>
			<td>352063</td>
			<td>Polypropylene round-bottom tubes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methanol</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>84124</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>mouse anti-Human CD24 antibody</td>
			<td>BD</td>
			<td>561646</td>
			<td>R-phycoerythrin and Cyanine dye conjugated Clone: ML5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>mouse anti-Human CD44 antibody</td>
			<td>BD</td>
			<td>555479</td>
			<td>R-phycoerythrin conjugated, Clone: G44-26</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N,N-diethylaminobenzaldehyde (DEAB)</td>
			<td>Stemcell Technologies</td>
			<td>1700</td>
			<td>Sold commerically as part of the ALDEFLOUR Assay kit; follow manufacturer&#39;s instructions DEAB preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS</td>
			<td>Wisent Inc</td>
			<td>311-425-CL</td>
			<td>1x, Without calcium and magnesium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>25200-056</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mammosphere Media Composition</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B27</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>17504-44</td>
			<td>1x</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>bFGF</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>F2006</td>
			<td>10 ng/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BSA</td>
			<td>Bioshop</td>
			<td>ALB003</td>
			<td>04%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM:F12</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11330-032</td>
			<td>1x, With L-glutamine and 15 mM HEPES</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EGF</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>E9644</td>
			<td>20 ng/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>16634</td>
			<td>5 &#181;g/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3D Organoid Media Composition</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>A8301</td>
			<td>Tocris</td>
			<td>2939</td>
			<td>500 nM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B27</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>17504-44</td>
			<td>1x</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM:F12</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11330-032</td>
			<td>1x, With L-glutamine and 15 mM HEPES</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EGF</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>E9644</td>
			<td>5 ng/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FGF10</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>100-26</td>
			<td>20 ng/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FGF7</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>100-19</td>
			<td>5 ng/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GlutaMax</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>35050-061</td>
			<td>1x</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15630-080</td>
			<td>10 mM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N-acetylcysteine</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A9165</td>
			<td>1.25 mM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neuregulin &#946;1</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>100-03</td>
			<td>5 nM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nicotinamide</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>N0636</td>
			<td>5 mM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Noggin</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>120-10C</td>
			<td>100 ng/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>R-spondin3</td>
			<td>R&#38;D</td>
			<td>3500</td>
			<td>250 ng/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SB202190</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S7067</td>
			<td>500 nM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Y-27632</td>
			<td>Tocris</td>
			<td>1254</td>
			<td>5 &#181;M</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

isolation and functional assessment of human breast cancer stem cells from cell and tissue samples

Le cellule staminali del cancro al seno (BCSC) sono cellule tumorali con caratteristiche simili alle cellule staminali ereditarie o acquisite. Nonostante la loro bassa frequenza, sono i principali contributori all'inizio del cancro al seno, alla recidiva, alle metastasi e alla resistenza alla terapia. È imperativo comprendere la biologia delle cellule staminali del cancro al seno al fine di identificare nuovi bersagli terapeutici per il trattamento del cancro al seno. Le cellule staminali del cancro al seno sono isolate e caratterizzate sulla base dell'espressione di marcatori di superficie cellulare unici come CD44, CD24 e dell'attività enzimatica dell'aldeide deidrogenasi (ALDH). Queste celluleALDH ad altocontenuto di CD44+CD24- costituiscono la popolazione BCSC e possono essere isolate mediante selezione cellulare attivata da fluorescenza (FACS) per studi funzionali a valle. A seconda della domanda scientifica, possono essere utilizzati diversi metodi in vitro e in vivo per valutare le caratteristiche funzionali dei BCSC. Qui, forniamo un protocollo sperimentale dettagliato per l'isolamento di BCSC umani sia da popolazioni eterogenee di cellule di cancro al seno che da tessuto tumorale primario ottenuto da pazienti con cancro al seno. Inoltre, evidenziamo saggi funzionali a valle in vitro e in vivo , tra cui saggi di formazione di colonie, saggi di mammosfera, modelli di coltura 3D e saggi di xenotrapianto tumorale che possono essere utilizzati per valutare la funzione BCSC.

Il protocollo descritto consente l'isolamento di BCSC umani da una popolazione eterogenea di cellule di cancro al seno, sia da linee cellulari che da tessuto tumorale dissociato. Per ogni data linea cellulare o campione di tessuto, è fondamentale generare una sospensione monocellulare uniforme per isolare i BCSC alla massima purezza poiché la contaminazione delle popolazioni non-BCSC potrebbe comportare risposte cellulari variabili, specialmente se lo scopo dello studio è valutare l'efficacia degli agenti terapeutici ...

Questo protocollo sperimentale descrive l'isolamento dei BCSC da campioni di cellule e tessuti di cancro al seno, nonché i saggi in vitro e in vivo che possono essere utilizzati per valutare il fenotipo e la funzione del BCSC.

Isolamento e valutazione funzionale di cellule staminali di cancro al seno umano da campioni di cellule e tessuti

Breast cancer stem cells (BCSCs) are cancer cells with inherited or acquired stem cell-like characteristics. Despite their low frequency, they are major ...

This technique will allow researchers to isolate breast cancer stem cells at maximum purity and viability for the performance of both in vitro and in vivo functional characterization assays. Isolated breast cancer stem cells can also be used to help elucidate the molecular events that control tumorigenicity and metastasis, and to design therapeutic strategies to target these cells. With minor modifications specific to the cell and tissue types of interest, this method can also be applied to other systems.To generate a single cell suspension from a cell culture, wash an 80%confluent breast cancer cell culture with PBS and treat the cells with an appropriate cell dissociation solution for five minutes at room temperature. Once the cells have detached, add five milliliters of culture medium to neutralize the cell dissociation solution and transfer the cells to a 50 milliliter conical tube for centrifugation. Resuspend the pellet in five milliliters of PBS for counting.After counting, centrifuge the cells again, then resuspend the cells at one times 10 to six cells per milliliter of ALDH substrate buffer. To generate a single cell suspension from a tissue sample, use surgical blades in a crisscross technique to mince the tumor tissue into approximately one millimeter size pieces. Place the pieces in a 50 milliliter conical tube containing 10 milliliters of dissociation buffer.Seal the tube with parafilm for a 40 minute incubation at 37 degrees Celsius in a shaker and sediment the digested tissue pieces by centrifugation. Resuspend the pellet in five milliliters of trypsin using a five milliliter pipette and incubate the tissue in a 37 degree water bath for five minutes. At the end of the incubation, vigorously pipette the tissue several times to release single cells and add enough DMEM/F-12 medium to bring the total volume in the tube to 25 milliliters.Collect the cells by centrifugation, resuspend the pellet in one milliliter of Displace DNAse, and incubate for five minutes in a 37 degree Celsius water bath. At the end of the incubation, bring the total volume to 10 milliliters with PBS. Mix the cells by pipetting and passage them through a 40 micron cell strainer into a 50 milliliter tube.After centrifugation, resuspend the cells in five milliliters of fresh PBS for counting. To perform a colony forming assay, after sorting, resuspend the cells in complete medium and add the appropriate number of breast cancer stem cells to each of the three tubes containing two milliliters of medium per tube, labeled one times 10 to the second, two times 10 to the second, or five times 10 to the second cells. Pipette up and down five times to thoroughly mix the cell suspension and plate the cells into individual wells of a six well plate.Gently swirl the plate to obtain uniform cell distributions and place the plate in the cell culture incubator until colonies appear. At the end of the incubation, wash the cells with one milliliter of PBS per well and stain the cells with 500 microliters of 0.05%crystal violet solution per well for 30 seconds. At the end of the incubation, wash the wells two times with two milliliters of water per well to remove the excess dye, and count and record the total number of colonies per well by light microscopy at a four or 10 times magnification.To perform a mammosphere assay, after sorting, resuspend the cells in complete mammosphere medium and plate the at a seating density of five times 10 of the second cells per square centimeter area per well in a 96 well ultra-low attachment cell culture plate. Before counting the number of mammospheres per well by light microscopy, place the plate in the cell culture incubator for five to 10 days. To set up a 3D culture model, carefully add 50 microliters of basement membrane extract to each well of a 96 well plate without bubbles and place the plate at 37 degrees Celsius for one hour to allow the solution to polymerize.Add 100 microliters of PBS after 10 minutes to avoid drying of the gel layer. At the end of the incubation, suspend the sorted cells to five to 50 times 10 to the third cells per 200 microliters of 3D culture medium concentration and replace the PBS in each well of the 96 well plate with 200 microliters of media containing cells. Then place the plate in the cell culture incubator for 10 to 14 days before assessing the cultures for organoid formation.Human breast cancer cells that exhibit enhanced ALDH enzymatic activity express high levels of CD44 and low to negative levels of expression of CD24, and can be classified as breast cancer stem cells. The proportion of breast cancer stem cells within the bulk population can vary between cell lines or patients and often depends on the disease stage, with more aggressive breast cancer typically displaying a higher proportion of breast cancer stem cells. The ability of a single breast cancer cell to self-renew and generate colonies of 50 cells can be assessed by colony forming assays.The ability of breast cancer stem cells to self-renew under anchorage-independent experimental conditions can be assessed by mammosphere assays. Culturing breast cancer cells and basement membrane extract allows breast cancer stem cells to form 3D structures that recapitulate in vivo conditions. In addition, in vivo mouse xenograft models can be used to understand the differences in growth, self-renewal, differentiation, and/or the tumor initiating ability of breast cancer stem cells compared to non-breast cancer stem cells or bulk cell populations.Following this procedure, the isolated breast cancer stem cells can be used in transcriptomic, kinomic, and metabolomic studies. This method provides researchers with an opportunity to explore the role of breast cancer stem cells in tumor initiation, metastasis, recurrence, and therapy resistance.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Isolation and Functional Assessment of Human Breast Cancer Stem Cells from Cell and Tissue Samples

Establishment of Cancer Stem Cell Cultures from Human Conventional Osteosarcoma

Istituzione di Cancer Stem colture cellulari da umana convenzionale osteosarcoma

The current improvements in therapy against osteosarcoma (OS) have prolonged the lives of cancer patients, but the survival rate of five years remains ...

Ricerca

Ricerca sul cancro

Utilizing Functional Genomics Screening to Identify Potentially Novel Drug Targets in Cancer Cell Spheroid Cultures

Utilizzando Genomica Funzionale screening per identificare gli obiettivi farmaco potenzialmente romanzo in Cancer Cell Culture Spheroid

The identification of functional driver events in cancer is central to furthering our understanding of cancer biology and indispensable for the discovery ...

Synthesis and Characterization of an Aspirin-fumarate Prodrug that Inhibits NF&#954;B Activity and Breast Cancer Stem Cells

Sintesi e caratterizzazione di un profarmaco Aspirina-fumarato che inibisce NFκB attività e della mammella cellule tumorali staminali

Inflammation is a cancer hallmark that underlies cancer incidence and promotion, and eventually progression to metastasis. Therefore, adding an ...

Invasive Behavior of Human Breast Cancer Cells in Embryonic Zebrafish

Invasiva comportamento delle cellule cancro al seno umano in Zebrafish embrionali

In many cases, cancer patients do not die of a primary tumor, but rather because of metastasis. Although numerous rodent models are available for studying ...

Mesenchymal Stem Cell Isolation from Pulp Tissue and Co-Culture with Cancer Cells to Study Their Interactions

Isolamento di cellule staminali mesenchimali da tessuto della polpa e co-coltura con cellule tumorali per studiare le loro interazioni

Cancer as a multistep process and complicated disease is not only regulated by individual cell proliferation and growth but also controlled by tumor ...

Using Human Induced Pluripotent Stem Cells for the Generation of Tumor Antigen-specific T Cells

Utilizzo di cellule staminali pluripotenti indotte umane per la generazione di cellule T specifiche dell'antigene tumorale

The generation and expansion of functional T cells in vitro can lead to a broad range of clinical applications. One such use is for the treatment of ...

Obtaining Cancer Stem Cell Spheres from Gynecological and Breast Cancer Tumors

Ottenere le sfere delle cellule staminali tumorali da tumori ginecologici e tumori del cancro

Cancer stem cells (CSC) are a small population with self-renewal and plasticity which are responsible for tumorigenesis, resistance to treatment and ...

Isolation of Stem-like Cells from 3-Dimensional Spheroid Cultures

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Despite advances in adult stem cell research, identification and isolation of stem cells from tissue specimens remains a major challenge. While resident ...

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Valutazione funzionale delle varianti BRCA1 utilizzando editor di base mediati da CRISPR

Recent studies have investigated the risks associated with BRCA1 gene mutations using various functional assessment methods such as fluorescent reporter ...

Modeling Breast Cancer in Human Breast Tissue using a Microphysiological System

Modellazione del cancro al seno nel tessuto mammario umano utilizzando un sistema microfisiologico

Breast cancer (BC) remains a leading cause of death for women. Despite more than $700 million invested in BC research annually, 97% of candidate BC drugs ...