Name: isolation and functional assessment of human breast cancer stem cells from cell and tissue samples
Uploaded: 2020-10-02T14:00:00
Description: Breast cancer stem cells (BCSCs) are cancer cells with inherited or acquired stem cell-like characteristics. Despite their low frequency, they are major ...

유용한 토론과 지원에 대해 실험실 구성원들에게 감사드립니다. 유방암 줄기 세포와 종양 미세 환경에 대한 우리의 연구는 캐나다 암 연구 학회 연구소와 미 육군 국방부 유방암 프로그램 (보조금 # BC160912)의 보조금으로 지원됩니다. VB는 Western Postdoctoral Fellowship (Western University)의 지원을 받고 있으며 ALA와 VB는 모두 캐나다 유방암 학회의 지원을 받고 있습니다. CL은 캐나다 정부의 Vanier Canada 대학원 장학금으로 지원됩니다.

동의한 유방암 환자로부터 직접 환자 유래 수술 또는 생검 샘플의 수집은 기관 윤리 위원회가 승인한 승인된 인간 윤리 프로토콜에 따라 수행되었습니다. 환자 유래 이종이식 모델을 생성하는데 사용된 모든 마우스는 유지되고 기관 승인 동물 시설에 수용되었다. 마우스를 사용한 환자 유래 이종이식 모델로부터의 종양 조직은 기관 동물 관리 위원회에 의해 승인된 승인된 윤리 프로토콜에 따라 ...

유방암 전이와 치료에 대한 내성은 전 세계 여성의 주요 사망 원인이되었습니다. 유방암 줄기 세포 (BCSC)의 하위 집단의 존재는 전이 26,43,44,45,46 및 치료 내성 21,47,48의 향상에 기여합니다. 따라서 향후 치...

인간 유방암 줄기 세포 (BCSC)의 세포 및 분자 메커니즘을 이해하는 것은 유방암 치료에서 직면하는 문제를 해결하는 데 중요합니다. BCSC 개념의 출현은 21세기 초로 거슬러 올라가며, CD44+CD24-/저유방암 세포의 작은 집단이 마우스 1,2에서 이질적인 종양을 생성할 수 있는 것으로 밝혀졌습니다. 그 후, 알데히드 탈수소 효소 (ALDHhigh)의 높은 효소 활성을 갖는 인간 유방암 세포도 유사한 줄기 세포 유사 특성을 나타내는 것으로 관찰되었다3. 이러한 BCSC는자가 재생 및 분화가 가능한 작은 세포 집단을 나타내며 벌크 종양 1,2,3의 이질성에 기여합니다. 축적 된 증거는 진화 적으로 보존 된 신호 전달 경로의 변화가 BCSC 생존 및 유지를 유도한다는 것을 시사합니다 4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14 . 또한, 세포 외인성 미세 환경은 상이한 BCSC 기능을 지시하는데 중추적인 역할을 하는 것으로 나타났다15,16,17. 이러한 분자 경로와 BCSC 기능을 조절하는 외부 요인은 유방암 재발, 전이18 및 치료법에 대한 내성 발달19,20,21에 기여하며, 치료 후 BCSC의 잔류 존재는 유방암 환자의 전체 생존에 큰 도전이 됩니다.22,23 . 따라서 이러한 요인에 대한 전임상 평가는 유방암 환자의 더 나은 치료 결과와 전체 생존 개선을 달성하는 데 도움이 될 수 있는 BCSC 표적 요법을 식별하는 데 매우 중요합니다.
몇몇 시험관내 인간 유방암 세포주 모델 및 생체내 인간 이종이식 모델은 BCSC 24,25,26,27,28,29를 특성화하기 위해 사용되었다. 모든 연속 계대 후에 지속적으로 다시 채워지는 세포주의 능력은 이러한 세포를 오믹스 기반 및 약물유전체학 연구를 수행하는 이상적인 모델 시스템으로 만듭니다. 그러나 세포주는 종종 환자 샘플에서 관찰된 이질성을 요약하지 못합니다. 따라서 환자 유래 샘플로 세포주 데이터를 보완하는 것이 중요합니다. 가장 순수한 형태의 BCSC를 분리하는 것은 BCSC의 상세한 특성 분석을 가능하게 하는 데 중요합니다. 이러한 순도를 달성하는 것은 BCSC에 특정한 표현형 마커의 선택에 달려 있습니다. 현재, ALDH높은CD44+CD24- 세포 표현형은 최대 순도1을 위해 형광 활성화 세포 분류 (FACS)를 사용하여 벌크 유방암 세포 집단으로부터 인간 BCSC를 구별하고 분리하는 데 가장 일반적으로 사용되며, 3,26. 또한, 자가 갱신, 증식 및 분화와 같은 단리된 BCSC의 특성은 시험관내 및 생체내 기술을 사용하여 평가할 수 있습니다.
예를 들어, 시험관내 콜로니 형성 분석은 상이한 치료 조건(30)의 존재하에50개 이상의 세포의 콜로니를 형성하기 위해 자가갱신하는 단일 세포의 능력을 평가하는데 사용될 수 있다. 유방권 분석은 또한 앵커리지 독립적 조건에서 유방암 세포의 자가 재생 잠재력을 평가하는 데 사용할 수 있습니다. 이 분석은 무혈청 비부착성 배양 조건31에서 각각의 연속 계대에서 구체(BCSC 및 비-BCSC의 혼합물)로서 생성 및 성장하는 단일 세포의 능력을 측정합니다. 추가적으로, 3차원(3D) 배양 모델을 사용하여 생체 내 미세환경을 밀접하게 요약하고 잠재적인 BCSC-표적 요법의 활성을 조사할 수 있는 세포-세포 및 세포-매트릭스 상호작용을 포함하는 BCSC 기능을 평가할 수 있다(32). 시험관내 모델의 다양한 응용에도 불구하고, 시험관내 분석만을 사용하여 생체내 조건의 복잡성을 모델링하는 것은 어렵다. 이러한 과제는 생체 내에서 BCSC 거동을 평가하기 위해 마우스 이종이식 모델을 사용함으로써 극복할 수 있습니다. 특히, 이러한 모델은 유방암 전이를 평가하고33, 질병 진행 동안 미세환경과의 상호작용을 조사하고(34), 생체내 영상화(35), 및 항종양제(34)의 환자 특이적 독성 및 효능을 예측하기 위한 이상적인 시스템으로서 기능한다.
이 프로토콜은 이질적인 유방암 세포의 벌크 집단으로부터 최대 순도로 인간 ALDH고 CD44+CD24- BCSC의 분리에 대한 자세한 설명을 제공한다. 또한 BCSC의 다양한 기능을 평가하는 데 사용할 수 있는 세 가지 시험관 내 기술(콜로니 형성 분석, 유방권 분석 및 3D 배양 모델)과 생체 내 종양 이종이식 분석에 대한 자세한 설명을 제공합니다. 이러한 방법은 BCSC 생물학을 이해하고 새로운 BCSC 표적 요법을 조사할 목적으로 인간 유방암 세포주 또는 1차 환자 유래 유방암 세포 및 종양 조직으로부터 BCSC를 분리 및 특성화하는 데 관심이 있는 연구자가 사용하기에 적합합니다.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>7-Aminoactinomycin D (7AAD)</td>
			<td>BD</td>
			<td>51-68981E</td>
			<td>suggested: 0.25 &#181;g/1x106 cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetone</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>A18-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aldehyde dehydrogenase (ALDH) substrate</td>
			<td>Stemcell Technologies</td>
			<td>1700</td>
			<td>Sold commerically as part of the ALDEFLOUR Assay kit; follow manufacturer&#39;s instructions for ALDH substrate preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Basement membrane extract (BME)</td>
			<td>Corning</td>
			<td>354234</td>
			<td>Sold under the commercial name Matrigel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture plates: 6 well</td>
			<td>Corning</td>
			<td>877218</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture plates: 60mm</td>
			<td>Corning</td>
			<td>353002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture plates: 96-well ultra low attachment</td>
			<td>Corning</td>
			<td>3474</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell strainer: 40 micron</td>
			<td>BD</td>
			<td>352340</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagen</td>
			<td>Stemcell Technologies</td>
			<td>7001</td>
			<td>Prepare 1:30 dilution of 3 mg/mL collagen in PBS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>11088807001</td>
			<td>1x</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Conical tubes: 50 mL</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>05-539-7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Crystal violet</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C6158</td>
			<td>Use 0.05% crystal violet solution in water for staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dispase</td>
			<td>Stemcell Technologies</td>
			<td>7913</td>
			<td>5U/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM:F12</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11330-032</td>
			<td>1x, With L-glutamine and 15 mM HEPES</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DNAse</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D5052</td>
			<td>0.1 mg/mL final concentration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBS</td>
			<td>Avantor Seradigm Lifescience</td>
			<td>97068-085</td>
			<td>&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flow tubes: 5ml</td>
			<td>BD</td>
			<td>352063</td>
			<td>Polypropylene round-bottom tubes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methanol</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>84124</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>mouse anti-Human CD24 antibody</td>
			<td>BD</td>
			<td>561646</td>
			<td>R-phycoerythrin and Cyanine dye conjugated Clone: ML5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>mouse anti-Human CD44 antibody</td>
			<td>BD</td>
			<td>555479</td>
			<td>R-phycoerythrin conjugated, Clone: G44-26</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N,N-diethylaminobenzaldehyde (DEAB)</td>
			<td>Stemcell Technologies</td>
			<td>1700</td>
			<td>Sold commerically as part of the ALDEFLOUR Assay kit; follow manufacturer&#39;s instructions DEAB preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS</td>
			<td>Wisent Inc</td>
			<td>311-425-CL</td>
			<td>1x, Without calcium and magnesium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>25200-056</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mammosphere Media Composition</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B27</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>17504-44</td>
			<td>1x</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>bFGF</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>F2006</td>
			<td>10 ng/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BSA</td>
			<td>Bioshop</td>
			<td>ALB003</td>
			<td>04%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM:F12</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11330-032</td>
			<td>1x, With L-glutamine and 15 mM HEPES</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EGF</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>E9644</td>
			<td>20 ng/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>16634</td>
			<td>5 &#181;g/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3D Organoid Media Composition</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>A8301</td>
			<td>Tocris</td>
			<td>2939</td>
			<td>500 nM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B27</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>17504-44</td>
			<td>1x</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM:F12</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11330-032</td>
			<td>1x, With L-glutamine and 15 mM HEPES</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EGF</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>E9644</td>
			<td>5 ng/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FGF10</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>100-26</td>
			<td>20 ng/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FGF7</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>100-19</td>
			<td>5 ng/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GlutaMax</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>35050-061</td>
			<td>1x</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15630-080</td>
			<td>10 mM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N-acetylcysteine</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A9165</td>
			<td>1.25 mM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neuregulin &#946;1</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>100-03</td>
			<td>5 nM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nicotinamide</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>N0636</td>
			<td>5 mM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Noggin</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>120-10C</td>
			<td>100 ng/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>R-spondin3</td>
			<td>R&#38;D</td>
			<td>3500</td>
			<td>250 ng/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SB202190</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S7067</td>
			<td>500 nM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Y-27632</td>
			<td>Tocris</td>
			<td>1254</td>
			<td>5 &#181;M</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

isolation and functional assessment of human breast cancer stem cells from cell and tissue samples

유방암 줄기 세포 (BCSC)는 유전 또는 후천성 줄기 세포와 유사한 특성을 가진 암세포입니다. 낮은 빈도에도 불구하고 유방암 시작, 재발, 전이 및 치료 저항의 주요 원인입니다. 유방암 치료를위한 새로운 치료 표적을 식별하기 위해서는 유방암 줄기 세포의 생물학을 이해하는 것이 필수적입니다. 유방암 줄기 세포는 CD44, CD24와 같은 독특한 세포 표면 마커의 발현 및 알데히드 탈수소 효소 (ALDH)의 효소 활성을 기반으로 분리 및 특성화됩니다. 이러한 ALDH높은CD44+CD24- 세포는 BCSC 집단을 구성하며 다운스트림 기능 연구를 위한 형광 활성화 세포 분류(FACS)에 의해 분리될 수 있습니다. 과학적 질문에 따라 BCSC의 기능적 특성을 평가하기 위해 다양한 시험관 내 및 생체 내 방법을 사용할 수 있습니다. 여기에서는 유방암 환자의 이질적인 유방암 집단과 원발성 종양 조직 모두에서 인간 BCSC를 분리하기 위한 상세한 실험 프로토콜을 제공합니다. 또한 BCSC 기능을 평가하는 데 사용할 수 있는 콜로니 형성 분석, 유방권 분석, 3D 배양 모델 및 종양 이종이식 분석을 포함한 다운스트림 시험관 내 및 생체 내 기능 분석을 강조합니다.

설명 된 프로토콜은 세포주 또는 해리 된 종양 조직으로부터 유방암 세포의 이질적인 집단으로부터 인간 BCSC의 분리를 허용한다. 주어진 세포주 또는 조직 샘플에 대해, 특히 연구 목적이 BCSC를 표적으로 하는 치료제의 효능을 평가하는 것이라면 오염된 비 BCSC 집단이 다양한 세포 반응을 유발할 수 있으므로 BCSC를 최대 순도로 분리하기 위해 균일한 단일 세포 현탁액을 생성하는 것이 중요합니다....

이 실험 프로토콜은 BCSC 표현형 및 기능을 평가하는 데 사용할 수 있는 시험 관 내 및 생체 내 분석뿐만 아니라 유방암 세포 및 조직 샘플에서 BCSC의 분리를 설명합니다.

세포 및 조직 샘플에서 인간 유방암 줄기 세포의 분리 및 기능 평가

Breast cancer stem cells (BCSCs) are cancer cells with inherited or acquired stem cell-like characteristics. Despite their low frequency, they are major ...

This technique will allow researchers to isolate breast cancer stem cells at maximum purity and viability for the performance of both in vitro and in vivo functional characterization assays. Isolated breast cancer stem cells can also be used to help elucidate the molecular events that control tumorigenicity and metastasis, and to design therapeutic strategies to target these cells. With minor modifications specific to the cell and tissue types of interest, this method can also be applied to other systems.To generate a single cell suspension from a cell culture, wash an 80%confluent breast cancer cell culture with PBS and treat the cells with an appropriate cell dissociation solution for five minutes at room temperature. Once the cells have detached, add five milliliters of culture medium to neutralize the cell dissociation solution and transfer the cells to a 50 milliliter conical tube for centrifugation. Resuspend the pellet in five milliliters of PBS for counting.After counting, centrifuge the cells again, then resuspend the cells at one times 10 to six cells per milliliter of ALDH substrate buffer. To generate a single cell suspension from a tissue sample, use surgical blades in a crisscross technique to mince the tumor tissue into approximately one millimeter size pieces. Place the pieces in a 50 milliliter conical tube containing 10 milliliters of dissociation buffer.Seal the tube with parafilm for a 40 minute incubation at 37 degrees Celsius in a shaker and sediment the digested tissue pieces by centrifugation. Resuspend the pellet in five milliliters of trypsin using a five milliliter pipette and incubate the tissue in a 37 degree water bath for five minutes. At the end of the incubation, vigorously pipette the tissue several times to release single cells and add enough DMEM/F-12 medium to bring the total volume in the tube to 25 milliliters.Collect the cells by centrifugation, resuspend the pellet in one milliliter of Displace DNAse, and incubate for five minutes in a 37 degree Celsius water bath. At the end of the incubation, bring the total volume to 10 milliliters with PBS. Mix the cells by pipetting and passage them through a 40 micron cell strainer into a 50 milliliter tube.After centrifugation, resuspend the cells in five milliliters of fresh PBS for counting. To perform a colony forming assay, after sorting, resuspend the cells in complete medium and add the appropriate number of breast cancer stem cells to each of the three tubes containing two milliliters of medium per tube, labeled one times 10 to the second, two times 10 to the second, or five times 10 to the second cells. Pipette up and down five times to thoroughly mix the cell suspension and plate the cells into individual wells of a six well plate.Gently swirl the plate to obtain uniform cell distributions and place the plate in the cell culture incubator until colonies appear. At the end of the incubation, wash the cells with one milliliter of PBS per well and stain the cells with 500 microliters of 0.05%crystal violet solution per well for 30 seconds. At the end of the incubation, wash the wells two times with two milliliters of water per well to remove the excess dye, and count and record the total number of colonies per well by light microscopy at a four or 10 times magnification.To perform a mammosphere assay, after sorting, resuspend the cells in complete mammosphere medium and plate the at a seating density of five times 10 of the second cells per square centimeter area per well in a 96 well ultra-low attachment cell culture plate. Before counting the number of mammospheres per well by light microscopy, place the plate in the cell culture incubator for five to 10 days. To set up a 3D culture model, carefully add 50 microliters of basement membrane extract to each well of a 96 well plate without bubbles and place the plate at 37 degrees Celsius for one hour to allow the solution to polymerize.Add 100 microliters of PBS after 10 minutes to avoid drying of the gel layer. At the end of the incubation, suspend the sorted cells to five to 50 times 10 to the third cells per 200 microliters of 3D culture medium concentration and replace the PBS in each well of the 96 well plate with 200 microliters of media containing cells. Then place the plate in the cell culture incubator for 10 to 14 days before assessing the cultures for organoid formation.Human breast cancer cells that exhibit enhanced ALDH enzymatic activity express high levels of CD44 and low to negative levels of expression of CD24, and can be classified as breast cancer stem cells. The proportion of breast cancer stem cells within the bulk population can vary between cell lines or patients and often depends on the disease stage, with more aggressive breast cancer typically displaying a higher proportion of breast cancer stem cells. The ability of a single breast cancer cell to self-renew and generate colonies of 50 cells can be assessed by colony forming assays.The ability of breast cancer stem cells to self-renew under anchorage-independent experimental conditions can be assessed by mammosphere assays. Culturing breast cancer cells and basement membrane extract allows breast cancer stem cells to form 3D structures that recapitulate in vivo conditions. In addition, in vivo mouse xenograft models can be used to understand the differences in growth, self-renewal, differentiation, and/or the tumor initiating ability of breast cancer stem cells compared to non-breast cancer stem cells or bulk cell populations.Following this procedure, the isolated breast cancer stem cells can be used in transcriptomic, kinomic, and metabolomic studies. This method provides researchers with an opportunity to explore the role of breast cancer stem cells in tumor initiation, metastasis, recurrence, and therapy resistance.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Isolation and Functional Assessment of Human Breast Cancer Stem Cells from Cell and Tissue Samples

Establishment of Cancer Stem Cell Cultures from Human Conventional Osteosarcoma

암의 설립은 인간 기존의 골육종에서 세포 배양 줄기

The current improvements in therapy against osteosarcoma (OS) have prolonged the lives of cancer patients, but the survival rate of five years remains ...

연구

암 연구학

Utilizing Functional Genomics Screening to Identify Potentially Novel Drug Targets in Cancer Cell Spheroid Cultures

기능 유전체학에게 검사를 활용하여 암 세포 회전 타원체 문화에 잠재적으로 소설 약 표적을 식별하는

The identification of functional driver events in cancer is central to furthering our understanding of cancer biology and indispensable for the discovery ...

Synthesis and Characterization of an Aspirin-fumarate Prodrug that Inhibits NF&#954;B Activity and Breast Cancer Stem Cells

NFκB 활동과 유방암 줄기 세포를 금지합니다 합성 및 아스피린 - 푸마 레이트의 전구 약물의 특성

Inflammation is a cancer hallmark that underlies cancer incidence and promotion, and eventually progression to metastasis. Therefore, adding an ...

Invasive Behavior of Human Breast Cancer Cells in Embryonic Zebrafish

배아 Zebrafish의 인간 유방암 세포의 침략 행동

In many cases, cancer patients do not die of a primary tumor, but rather because of metastasis. Although numerous rodent models are available for studying ...

Mesenchymal Stem Cell Isolation from Pulp Tissue and Co-Culture with Cancer Cells to Study Their Interactions

펄프 조직 문화와 공동 암 세포와 그들의 상호 작용을 공부 하에서 중간 엽 줄기 세포 분리

Cancer as a multistep process and complicated disease is not only regulated by individual cell proliferation and growth but also controlled by tumor ...

Using Human Induced Pluripotent Stem Cells for the Generation of Tumor Antigen-specific T Cells

종양 항원 특이적 T 세포의 생성을 위한 인간 유도 만능 줄기 세포를 사용하여

The generation and expansion of functional T cells in vitro can lead to a broad range of clinical applications. One such use is for the treatment of ...

Obtaining Cancer Stem Cell Spheres from Gynecological and Breast Cancer Tumors

부인과 및 유방암 종양에서 암 줄기 세포 구체 획득

Cancer stem cells (CSC) are a small population with self-renewal and plasticity which are responsible for tumorigenesis, resistance to treatment and ...

Isolation of Stem-like Cells from 3-Dimensional Spheroid Cultures

3차원 스페로이드 배양에서 줄기와 같은 세포의 분리

Despite advances in adult stem cell research, identification and isolation of stem cells from tissue specimens remains a major challenge. While resident ...

Functional Assessment of BRCA1 variants using CRISPR-Mediated Base Editors

CRISPR 중재 베이스 편집기사용 BRCA1 변종 기능 평가

Recent studies have investigated the risks associated with BRCA1 gene mutations using various functional assessment methods such as fluorescent reporter ...

Modeling Breast Cancer in Human Breast Tissue using a Microphysiological System

미생물 시스템을 사용하여 인간 유방 조직에서 유방암 모델링

Breast cancer (BC) remains a leading cause of death for women. Despite more than $700 million invested in BC research annually, 97% of candidate BC drugs ...