Name: isolation and functional assessment of human breast cancer stem cells from cell and tissue samples
Uploaded: 2020-10-02T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Isolation and Functional Assessment of Human Breast Cancer Stem Cells from Cell and Tissue Samples at JoVE.com

Laboratuvar üyelerimize yararlı tartışmaları ve destekleri için teşekkür ederiz. Meme kanseri kök hücreleri ve tümör mikro ortamı üzerine yaptığımız araştırmalar, Kanada Kanser Araştırma Derneği Araştırma Enstitüsü ve ABD Ordusu Savunma Bakanlığı Meme Kanseri Programı'ndan (Hibe # BC160912) gelen hibelerle finanse edilmektedir. V.B., Batı Doktora Sonrası Bursu (Western University) tarafından desteklenmektedir ve hem A.L.A. hem de V.B. Kanada Meme Kanseri Derneği tarafından desteklenmektedir. C.L., Kanada Hükümeti'nden Vanier Canada Yüksek Lisans Bursu ile desteklenmektedir.

Hasta kaynaklı cerrahi veya biyopsi örneklerinin doğrudan rıza gösteren meme kanseri hastalarından toplanması, kurumsal etik kurul tarafından onaylanan onaylanmış insan etiği protokolü kapsamında gerçekleştirilmiştir. Hasta kaynaklı ksenogreft modelleri üretmek için kullanılan tüm fareler, kurum onaylı bir hayvan tesisinde muhafaza edildi ve barındırıldı. Fareler kullanılarak hasta kaynaklı ksenogreft modellerinden elde edilen tümör dokusu, kurumsal hayvan bakım komitesi tarafından onaylan...

Meme kanseri metastazı ve tedaviye direnç tüm dünyada kadınlarda mortalitenin önemli nedeni haline gelmiştir. Meme kanseri kök hücrelerinin (BCSC) bir alt popülasyonunun varlığı, metastaz 26,43,44,45,46 ve tedavi direncinin21,47,48 artmasına katkıda bulunur....

İnsan meme kanseri kök hücrelerinin (BCSC'ler) hücresel ve moleküler mekanizmalarını anlamak, meme kanseri tedavisinde karşılaşılan zorlukları ele almak için çok önemlidir. BCSC kavramının ortaya çıkışı, CD44 + CD24 / düşük meme kanseri hücrelerinin küçük bir popülasyonunun farelerde heterojen tümörler üretebildiği 1,2 bulunduğu21. yüzyılın başlarına kadar uzanmaktadır. Daha sonra, aldehit dehidrogenazın (ALDH yüksek) enzimatik aktivitesiyüksek olan insan meme kanseri hücrelerinin de benzer kök hücre benzeri özellikler gösterdiği gözlenmiştir3. Bu BCSC'ler, kendini yenileme ve farklılaşma yeteneğine sahip küçük bir hücre popülasyonunu temsil eder ve toplu tümörlerin heterojen doğasına katkıda bulunur 1,2,3. Biriken kanıtlar, evrimsel olarak korunmuş sinyal yollarındaki değişikliklerin BCSC'nin hayatta kalmasını ve bakımını sağladığını göstermektedir 4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14 . Ek olarak, hücre dışsal mikro ortamının farklı BCSC fonksiyonlarının dikte edilmesinde çok önemli bir rol oynadığı gösterilmiştir15,16,17. Bu moleküler yollar ve BCSC fonksiyonunu düzenleyen dış faktörler meme kanseri nüksetmesine, metastaza18 ve tedavilere direnç gelişimine katkıda bulunur 19,20,21, tedavi sonrası BCSC'lerin kalıntı varlığı meme kanseri hastalarının genel sağkalımında büyük bir zorluk oluşturmaktadır22,23 . Bu nedenle, bu faktörlerin klinik öncesi değerlendirilmesi, meme kanseri hastalarında daha iyi tedavi sonuçları elde etmek ve genel sağkalımı iyileştirmek için yararlı olabilecek BCSC hedefleme tedavilerinin belirlenmesinde çok önemlidir.
 BCSC'leri 24,25,26,27,28,29 karakterize etmek için çeşitli in vitro insan meme kanseri hücre hattı modelleri ve in vivo insan ksenograft modelleri kullanılmıştır. Hücre hatlarının her ardışık geçişten sonra sürekli olarak yeniden doldurulma yeteneği, bunları omik tabanlı ve farmakogenomik çalışmalar yapmak için ideal bir model sistemi haline getirir. Bununla birlikte, hücre hatları genellikle hasta örneklerinde gözlenen heterojenliği özetlemekte başarısız olur. Bu nedenle, hücre hattı verilerini hasta kaynaklı örneklerle tamamlamak önemlidir. BCSC'lerin en saf haliyle izolasyonu, BCSC'lerin ayrıntılı karakterizasyonunu sağlamak için önemlidir. Bu saflığın elde edilmesi, BCSC'lere özgü fenotipik belirteçlerin seçimine bağlıdır. Şu anda, ALDHyüksekCD44 + CD24- hücre fenotipi, maksimum saflık için floresan aktive hücre sıralama (FACS) kullanarak insan BCSC'lerini toplu meme kanseri hücre popülasyonlarından ayırt etmek ve izole etmek için en yaygın olarak kullanılmaktadır1, 3,26. Ayrıca, izole BCSC'lerin kendini yenileme, proliferasyon ve farklılaşma gibi özellikleri in vitro ve in vivo teknikler kullanılarak değerlendirilebilir.
Örneğin, in vitro koloni oluşturma testleri, farklı tedavi koşullarının varlığında tek bir hücrenin 50 veya daha fazla hücreden oluşan bir koloni oluşturmak için kendini yenileme yeteneğini değerlendirmek için kullanılabilir30. Mamosfer testleri, ankrajdan bağımsız koşullar altında meme kanseri hücrelerinin kendini yenileme potansiyelini değerlendirmek için de kullanılabilir. Bu tahlil, tek hücrelerin serumsuz yapışkan olmayan kültür koşullarındaki her ardışık geçişte küreler (BCSC'lerin ve BCSC'lerin karışımı) olarak üretme ve büyüme yeteneğini ölçer31. Ek olarak, in vivo mikro çevreyi yakından özetleyen ve potansiyel BCSC hedefli tedavilerin aktivitesinin araştırılmasına izin veren hücre-hücre ve hücre-matris etkileşimleri de dahil olmak üzere BCSC fonksiyonunu değerlendirmek için 3 Boyutlu (3D) kültür modelleri kullanılabilir32. İn vitro modellerin çeşitli uygulamalarına rağmen, in vivo koşulların karmaşıklığını sadece in vitro tahlilleri kullanarak modellemek zordur. Bu zorluk, BCSC davranışını in vivo olarak değerlendirmek için fare ksenograft modellerinin kullanılmasıyla aşılabilir. Özellikle, bu tür modeller meme kanseri metastazı33'ü değerlendirmek, hastalık progresyonu sırasında mikroçevre ile etkileşimleri araştırmak 34, in vivo görüntüleme35 ve antitümör ajanların hastaya özgü toksisitesini ve etkinliğini tahmin etmek için ideal bir sistem olarak hizmet eder34.
Bu protokol, insan ALDHyüksekCD44 + CD24- BCSC'lerinin heterojen meme kanseri hücrelerinin toplu popülasyonlarından maksimum saflıkta izolasyonu için ayrıntılı bir açıklama sağlar. Ayrıca, üç in vitro tekniğin (koloni oluşturma testi, mamosfer testi ve 3D kültür modeli) ve BCSC'lerin farklı fonksiyonlarını değerlendirmek için kullanılabilecek bir in vivo tümör ksenograft testinin ayrıntılı bir tanımını sunuyoruz. Bu yöntemler, BCSC biyolojisini anlamak ve / veya yeni BCSC hedefleme tedavilerini araştırmak amacıyla BCSC'leri insan meme kanseri hücre hatlarından veya birincil hasta kaynaklı meme kanseri hücrelerinden ve tümör dokusundan izole etmek ve karakterize etmek isteyen araştırmacılar tarafından kullanılmak üzere uygun olacaktır.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>7-Aminoactinomycin D (7AAD)</td>
			<td>BD</td>
			<td>51-68981E</td>
			<td>suggested: 0.25 &#181;g/1x106 cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetone</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>A18-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aldehyde dehydrogenase (ALDH) substrate</td>
			<td>Stemcell Technologies</td>
			<td>1700</td>
			<td>Sold commerically as part of the ALDEFLOUR Assay kit; follow manufacturer&#39;s instructions for ALDH substrate preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Basement membrane extract (BME)</td>
			<td>Corning</td>
			<td>354234</td>
			<td>Sold under the commercial name Matrigel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture plates: 6 well</td>
			<td>Corning</td>
			<td>877218</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture plates: 60mm</td>
			<td>Corning</td>
			<td>353002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture plates: 96-well ultra low attachment</td>
			<td>Corning</td>
			<td>3474</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell strainer: 40 micron</td>
			<td>BD</td>
			<td>352340</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagen</td>
			<td>Stemcell Technologies</td>
			<td>7001</td>
			<td>Prepare 1:30 dilution of 3 mg/mL collagen in PBS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>11088807001</td>
			<td>1x</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Conical tubes: 50 mL</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>05-539-7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Crystal violet</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C6158</td>
			<td>Use 0.05% crystal violet solution in water for staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dispase</td>
			<td>Stemcell Technologies</td>
			<td>7913</td>
			<td>5U/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM:F12</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11330-032</td>
			<td>1x, With L-glutamine and 15 mM HEPES</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DNAse</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D5052</td>
			<td>0.1 mg/mL final concentration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBS</td>
			<td>Avantor Seradigm Lifescience</td>
			<td>97068-085</td>
			<td>&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flow tubes: 5ml</td>
			<td>BD</td>
			<td>352063</td>
			<td>Polypropylene round-bottom tubes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methanol</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>84124</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>mouse anti-Human CD24 antibody</td>
			<td>BD</td>
			<td>561646</td>
			<td>R-phycoerythrin and Cyanine dye conjugated Clone: ML5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>mouse anti-Human CD44 antibody</td>
			<td>BD</td>
			<td>555479</td>
			<td>R-phycoerythrin conjugated, Clone: G44-26</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N,N-diethylaminobenzaldehyde (DEAB)</td>
			<td>Stemcell Technologies</td>
			<td>1700</td>
			<td>Sold commerically as part of the ALDEFLOUR Assay kit; follow manufacturer&#39;s instructions DEAB preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS</td>
			<td>Wisent Inc</td>
			<td>311-425-CL</td>
			<td>1x, Without calcium and magnesium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>25200-056</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mammosphere Media Composition</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B27</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>17504-44</td>
			<td>1x</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>bFGF</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>F2006</td>
			<td>10 ng/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BSA</td>
			<td>Bioshop</td>
			<td>ALB003</td>
			<td>04%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM:F12</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11330-032</td>
			<td>1x, With L-glutamine and 15 mM HEPES</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EGF</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>E9644</td>
			<td>20 ng/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>16634</td>
			<td>5 &#181;g/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3D Organoid Media Composition</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>A8301</td>
			<td>Tocris</td>
			<td>2939</td>
			<td>500 nM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B27</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>17504-44</td>
			<td>1x</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM:F12</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11330-032</td>
			<td>1x, With L-glutamine and 15 mM HEPES</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EGF</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>E9644</td>
			<td>5 ng/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FGF10</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>100-26</td>
			<td>20 ng/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FGF7</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>100-19</td>
			<td>5 ng/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GlutaMax</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>35050-061</td>
			<td>1x</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15630-080</td>
			<td>10 mM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N-acetylcysteine</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A9165</td>
			<td>1.25 mM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neuregulin &#946;1</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>100-03</td>
			<td>5 nM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nicotinamide</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>N0636</td>
			<td>5 mM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Noggin</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>120-10C</td>
			<td>100 ng/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>R-spondin3</td>
			<td>R&#38;D</td>
			<td>3500</td>
			<td>250 ng/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SB202190</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S7067</td>
			<td>500 nM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Y-27632</td>
			<td>Tocris</td>
			<td>1254</td>
			<td>5 &#181;M</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

isolation and functional assessment of human breast cancer stem cells from cell and tissue samples

Meme kanseri kök hücreleri (BCSC'ler), kalıtsal veya edinilmiş kök hücre benzeri özelliklere sahip kanser hücreleridir. Düşük sıklıklarına rağmen meme kanserinin başlamasına, nüksetmesine, metastaza ve tedavi direncine önemli katkılarda bulunurlar. Meme kanseri tedavisinde yeni terapötik hedefler belirlemek için meme kanseri kök hücrelerinin biyolojisini anlamak zorunludur. Meme kanseri kök hücreleri, CD44, CD24 gibi benzersiz hücre yüzey belirteçlerinin ekspresyonuna ve aldehit dehidrojenazın (ALDH) enzimatik aktivitesine dayanarak izole edilir ve karakterize edilir. Bu ALDHyüksekCD44 + CD24- hücreleri BCSC popülasyonunu oluşturur ve aşağı akış fonksiyonel çalışmaları için floresan ile aktive edilmiş hücre sıralama (FACS) ile izole edilebilir. Bilimsel soruya bağlı olarak, BCSC'lerin fonksiyonel özelliklerini değerlendirmek için farklı in vitro ve in vivo yöntemler kullanılabilir. Burada, insan BCSC'lerinin hem meme kanseri hücrelerinin heterojen popülasyonlarından hem de meme kanseri hastalarından elde edilen primer tümör dokusundan izole edilmesi için ayrıntılı bir deneysel protokol sunuyoruz. Ek olarak, BCSC fonksiyonunu değerlendirmek için kullanılabilecek koloni oluşturma testleri, mamosfer testleri, 3D kültür modelleri ve tümör ksenogreft testleri dahil olmak üzere aşağı akış in vitro ve in vivo fonksiyonel tahlillerini vurguluyoruz.

Tanımlanan protokol, insan BCSC'lerinin heterojen bir meme kanseri hücresi popülasyonundan, hücre hatlarından veya ayrışmış tümör dokusundan izole edilmesine izin verir. Herhangi bir hücre hattı veya doku örneği için, BCSC'leri maksimum saflıkta izole etmek için tek tip bir tek hücreli süspansiyon oluşturmak çok önemlidir, çünkü BCSC olmayan popülasyonları kirletmek, özellikle de çalışmanın amacı BCSC'leri hedef alan terapötik ajanların etkinliğini değerlendirmekse, değişken hücre...

Watch this Scientific Journal Video about Isolation and Functional Assessment of Human Breast Cancer Stem Cells from Cell and Tissue Samples at JoVE.com

Isolation and Functional Assessment of Human Breast Cancer Stem Cells from Cell and Tissue Samples

Bu deneysel protokol, BCSC'lerin meme kanseri hücre ve doku örneklerinden izolasyonunun yanı sıra BCSC fenotipini ve fonksiyonunu değerlendirmek için kullanılabilecek in vitro ve in vivo testleri tanımlamaktadır.

İnsan Meme Kanseri Kök Hücrelerinin Hücre ve Doku Örneklerinden İzolasyonu ve Fonksiyonel Değerlendirmesi

Breast cancer stem cells (BCSCs) are cancer cells with inherited or acquired stem cell-like characteristics. Despite their low frequency, they are major ...

This technique will allow researchers to isolate breast cancer stem cells at maximum purity and viability for the performance of both in vitro and in vivo functional characterization assays. Isolated breast cancer stem cells can also be used to help elucidate the molecular events that control tumorigenicity and metastasis, and to design therapeutic strategies to target these cells. With minor modifications specific to the cell and tissue types of interest, this method can also be applied to other systems.To generate a single cell suspension from a cell culture, wash an 80%confluent breast cancer cell culture with PBS and treat the cells with an appropriate cell dissociation solution for five minutes at room temperature. Once the cells have detached, add five milliliters of culture medium to neutralize the cell dissociation solution and transfer the cells to a 50 milliliter conical tube for centrifugation. Resuspend the pellet in five milliliters of PBS for counting.After counting, centrifuge the cells again, then resuspend the cells at one times 10 to six cells per milliliter of ALDH substrate buffer. To generate a single cell suspension from a tissue sample, use surgical blades in a crisscross technique to mince the tumor tissue into approximately one millimeter size pieces. Place the pieces in a 50 milliliter conical tube containing 10 milliliters of dissociation buffer.Seal the tube with parafilm for a 40 minute incubation at 37 degrees Celsius in a shaker and sediment the digested tissue pieces by centrifugation. Resuspend the pellet in five milliliters of trypsin using a five milliliter pipette and incubate the tissue in a 37 degree water bath for five minutes. At the end of the incubation, vigorously pipette the tissue several times to release single cells and add enough DMEM/F-12 medium to bring the total volume in the tube to 25 milliliters.Collect the cells by centrifugation, resuspend the pellet in one milliliter of Displace DNAse, and incubate for five minutes in a 37 degree Celsius water bath. At the end of the incubation, bring the total volume to 10 milliliters with PBS. Mix the cells by pipetting and passage them through a 40 micron cell strainer into a 50 milliliter tube.After centrifugation, resuspend the cells in five milliliters of fresh PBS for counting. To perform a colony forming assay, after sorting, resuspend the cells in complete medium and add the appropriate number of breast cancer stem cells to each of the three tubes containing two milliliters of medium per tube, labeled one times 10 to the second, two times 10 to the second, or five times 10 to the second cells. Pipette up and down five times to thoroughly mix the cell suspension and plate the cells into individual wells of a six well plate.Gently swirl the plate to obtain uniform cell distributions and place the plate in the cell culture incubator until colonies appear. At the end of the incubation, wash the cells with one milliliter of PBS per well and stain the cells with 500 microliters of 0.05%crystal violet solution per well for 30 seconds. At the end of the incubation, wash the wells two times with two milliliters of water per well to remove the excess dye, and count and record the total number of colonies per well by light microscopy at a four or 10 times magnification.To perform a mammosphere assay, after sorting, resuspend the cells in complete mammosphere medium and plate the at a seating density of five times 10 of the second cells per square centimeter area per well in a 96 well ultra-low attachment cell culture plate. Before counting the number of mammospheres per well by light microscopy, place the plate in the cell culture incubator for five to 10 days. To set up a 3D culture model, carefully add 50 microliters of basement membrane extract to each well of a 96 well plate without bubbles and place the plate at 37 degrees Celsius for one hour to allow the solution to polymerize.Add 100 microliters of PBS after 10 minutes to avoid drying of the gel layer. At the end of the incubation, suspend the sorted cells to five to 50 times 10 to the third cells per 200 microliters of 3D culture medium concentration and replace the PBS in each well of the 96 well plate with 200 microliters of media containing cells. Then place the plate in the cell culture incubator for 10 to 14 days before assessing the cultures for organoid formation.Human breast cancer cells that exhibit enhanced ALDH enzymatic activity express high levels of CD44 and low to negative levels of expression of CD24, and can be classified as breast cancer stem cells. The proportion of breast cancer stem cells within the bulk population can vary between cell lines or patients and often depends on the disease stage, with more aggressive breast cancer typically displaying a higher proportion of breast cancer stem cells. The ability of a single breast cancer cell to self-renew and generate colonies of 50 cells can be assessed by colony forming assays.The ability of breast cancer stem cells to self-renew under anchorage-independent experimental conditions can be assessed by mammosphere assays. Culturing breast cancer cells and basement membrane extract allows breast cancer stem cells to form 3D structures that recapitulate in vivo conditions. In addition, in vivo mouse xenograft models can be used to understand the differences in growth, self-renewal, differentiation, and/or the tumor initiating ability of breast cancer stem cells compared to non-breast cancer stem cells or bulk cell populations.Following this procedure, the isolated breast cancer stem cells can be used in transcriptomic, kinomic, and metabolomic studies. This method provides researchers with an opportunity to explore the role of breast cancer stem cells in tumor initiation, metastasis, recurrence, and therapy resistance.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Establishment of Cancer Stem Cell Cultures from Human Conventional Osteosarcoma

Kanser kurulması İnsan Konvansiyonel Osteosarkom Hücre Kültürleri Kök

The current improvements in therapy against osteosarcoma (OS) have prolonged the lives of cancer patients, but the survival rate of five years remains ...

Kanser Araştırmaları

Utilizing Functional Genomics Screening to Identify Potentially Novel Drug Targets in Cancer Cell Spheroid Cultures

İşlevsel Genomik Tarama kullanılması Kanser Hücre Sfero Kültürleri Potansiyel Yeni İlaç Hedefleri Belirlemek İçin

The identification of functional driver events in cancer is central to furthering our understanding of cancer biology and indispensable for the discovery ...

Synthesis and Characterization of an Aspirin-fumarate Prodrug that Inhibits NF&#954;B Activity and Breast Cancer Stem Cells

NFKB Aktivite ve Meme Kanseri Kök Hücreler önler Sentezi ve bir Aspirin-fumarat ön-ilacının Karakterizasyonu

Inflammation is a cancer hallmark that underlies cancer incidence and promotion, and eventually progression to metastasis. Therefore, adding an ...

Invasive Behavior of Human Breast Cancer Cells in Embryonic Zebrafish

Embriyonik Zebra balığı İnsan Kanser Hücrelerinin İnvazif Davranış

In many cases, cancer patients do not die of a primary tumor, but rather because of metastasis. Although numerous rodent models are available for studying ...

Flow Cytometric Detection of Newly-formed Breast Cancer Stem Cell-like Cells After Apoptosis Reversal

Apoptozis ters sonra yeni kurulan meme kanser kök hücre benzeri hücre akış sitometrik algılama

Cancer recurrence has long been studied by oncologists while the underlying mechanisms remain unclear. Recently, we and others found that a phenomenon ...

Mesenchymal Stem Cell Isolation from Pulp Tissue and Co-Culture with Cancer Cells to Study Their Interactions

Mezenkimal kök hücre izolasyon hamuru doku ve kanser hücreleri ile ortak kültür ilişkileri incelemek için

Cancer as a multistep process and complicated disease is not only regulated by individual cell proliferation and growth but also controlled by tumor ...

Obtaining Cancer Stem Cell Spheres from Gynecological and Breast Cancer Tumors

Jinekolojik ve Meme Kanseri Tümörlerinden Kanser Kök Hücre Kürelerinin Alınması

Cancer stem cells (CSC) are a small population with self-renewal and plasticity which are responsible for tumorigenesis, resistance to treatment and ...

Isolation of Stem-like Cells from 3-Dimensional Spheroid Cultures

3 Boyutlu Spheroid Kültürlerden Kök Benzeri Hücrelerin İzolasyon

Despite advances in adult stem cell research, identification and isolation of stem cells from tissue specimens remains a major challenge. While resident ...

Functional Assessment of BRCA1 variants using CRISPR-Mediated Base Editors

Functional Assessment of BRCA1 variants using CRISPR-Mediated Base Editors

CRISPR Aracılı Temel Editörler kullanılarak BRCA1 varyantlarının fonksiyonel değerlendirmesi

Recent studies have investigated the risks associated with BRCA1 gene mutations using various functional assessment methods such as fluorescent reporter ...

Modeling Breast Cancer in Human Breast Tissue using a Microphysiological System

Mikrofizyolojik Sistem Kullanarak İnsan Meme Dokusunda Meme Kanseri Modellemesi

Breast cancer (BC) remains a leading cause of death for women. Despite more than $700 million invested in BC research annually, 97% of candidate BC drugs ...