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•
08:59 min
January 12th, 2021
DOI :
10.3791/61792-v
Chapters
0:05
Introduction
0:48
DNA Isolation and Library Preparation
4:21
Amplicon Purification and Quantification
5:57
Next-generation Sequencing
6:57
Results: TCRβ and IGH Immune Repertoire Data Analysis
8:27
Conclusion
Transcript
这种方法能够在核苷酸或氨基酸水平上探索特定的T和B细胞,从而能够识别淋巴细胞种群的动态变化和不同疾病的多样性参数。下一代测序的优点是能够识别独特的T或B细胞克隆,并在不同的解剖部位或不同的个体中跟踪它们。这有可能在各种疾病中识别新的生物标志物。
证明这一程序的将是娜奥米萨拉蒙,从我的实验室的研究助理。首先进行肠道活检的消化和细胞裂解。检索肠道活检,无论是新收集的,或储存在负20或负80摄氏度。
如果使用冷冻活检,在冰上解冻。在冰上冷却的无菌1.7毫升微中微管中加入6
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Summary
当前协议描述了从血液样本和肠道活检中分离脱氧核糖核酸的方法、用于下一代测序的 TCR® 和 IGH PCR 库的生成、NGS 运行的性能和基本数据分析。
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