Name: isolation of viable adipocytes and stromal vascular fraction from human visceral adipose tissue suitable for rna analysis and macrophage phenotyping
Uploaded: 2020-10-27T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Isolation of Viable Adipocytes and Stromal Vascular Fraction from Human Visceral Adipose Tissue Suitable for RNA Analysis and Macrophage Phenotyping at JoVE.c

Deze studie werd ondersteund door het Instituto Nacional de Perinatologia (subsidienummers: 3300-11402-01-575-17 en 212250-3210-21002-06-15) en CONACyT, Fondo Sectorial de Investigación en Salud y Seguridad Social (FOSISS) (subsidienummer 2015-3-2-61661).

Dit protocol is goedgekeurd door de IRB van het Instituto Nacional de Perinatologia (212250-3210-21002-06-15). Deelname was vrijwillig en alle ingeschreven vrouwen ondertekenden het formulier voor geïnformeerde toestemming.
1. Verzameling van visceraal vetweefsel
<ol><li>Verkrijg btw-biopsieën door middel van gedeeltelijke omentectomie tijdens een keizersnede van gezonde volwassen vrouwen met eenlingzwangerschappen op termijn zonder arbeid.</li>
	<li>Ga na de sluiting van de baarmoeder en ...

BTW speelt een cruciale rol bij metabole regulatie en ontstekingen. Toenemende belangstelling voor de rol van adipocyten en immuuncellen bij de chronische ontsteking die gepaard gaat met obesitas heeft geleid tot de ontwikkeling van verschillende technieken om de SVF en vetcellen die aanwezig zijn in AT te scheiden. De meeste technieken maken het echter niet mogelijk om deze twee verschillende sets cellen die levensvatbaar zijn voor stroomafwaartse toepassingen uit dezelfde btw-biopsie in één enkele procedure te verkri...

Wit vetweefsel bestaat niet alleen uit vetcellen of adipocyten, maar ook uit een niet-vette celfractie die bekend staat als stromale vasculaire fractie (SVF), die een heterogene celpopulatie bevat die bestaat uit macrofagen, andere immuuncellen als regulerende T-cellen (Tregs) en eosinofielen, preadipocyten en fibroblasten, omgeven door vasculair en bindweefsel 1,2. Vetweefsel (AT) wordt nu beschouwd als een orgaan dat fysiologische processen reguleert die verband houden met metabolisme en ontsteking door middel van adipokines, cytokines en microRNA's die door verschillende cellen worden geproduceerd en in het weefsel worden afgegeven, met autocriene, paracriene en endocriene effecten 3,4. Bij mensen omvat wit vetweefsel het onderhuidse vetweefsel (SAT) en het viscerale vetweefsel (VAT), met belangrijke anatomische, moleculaire, cellulaire en fysiologische verschillen tussen hen 2,5. SAT vertegenwoordigt tot 80% van de menselijke AT, terwijl VAT zich in de buikholte bevindt, voornamelijk in het mesenterium en het omentum, en metabolisch actiever is6. Bovendien is VAT een endocrien orgaan dat mediatoren afscheidt met een substantiële invloed op het lichaamsgewicht, de insulinegevoeligheid, het lipidenmetabolisme en ontstekingen. Bijgevolg leidt btw-accumulatie tot abdominale obesitas en aan obesitas gerelateerde ziekten zoals diabetes type 2, metabool syndroom, hypertensie en het risico op hart- en vaatziekten, wat een betere voorspeller is van obesitas-gerelateerde mortaliteit 6,7,8,9.
In homeostatische omstandigheden werken adipocyten, macrofagen en de andere immuuncellen samen om het VAT-metabolisme in stand te houden door de afscheiding van ontstekingsremmende mediatoren10. Buitensporige btw-verhoging bevordert echter de rekrutering van geactiveerde T-cellen, NK-cellen en macrofagen. In feite is de verhouding van de macrofagen bij magere btw 5%, terwijl deze verhouding oploopt tot 50% bij obesitas, waarbij macrofaagpolarisatie van ontstekingsremmend naar pro-inflammatoir fenotype ontstaat, waardoor een chronische ontstekingsomgeving ontstaat10,11.
Als gevolg van de obesitaspandemie is er een verbazingwekkend aantal rapporten verschenen over verschillende btw-onderzoeksonderwerpen, waaronder adipocytenbiologie, epigenetica, ontsteking, endocriene eigenschappen en opkomende gebieden zoals extracellulaire blaasjes, onder andere 8,10,12,13. Hoewel de btw-omgeving wordt bepaald door overspraak tussen adipocyten en de residente of aankomende macrofagen, hebben de meeste onderzoeken zich gericht op slechts één celpopulatie en is er weinig informatie over de interactie van deze cellen in btw en hun pathofysiologische gevolgen11,14. Bovendien werden waardevolle studies naar het adipocyt-macrofaag-samenspel in AT uitgevoerd met behulp van cellijnen, zonder de in vivo priming-omstandigheden 11,14,15. Een geschikte strategie om de interactie of de specifieke bijdrage van deze cellen in VAT te ontleden, vereist de isolatie van beide celtypen uit dezelfde vetbiopsie om in vitro assays uit te voeren die de in vivo eigenschappen die het VAT-metabolisme reguleren zo veel mogelijk weerspiegelen.
Hoewel de niet-enzymatische dissociatiemethoden op basis van mechanische krachten om de AT te breken minimale manipulatie garanderen, kunnen deze methoden niet worden gebruikt als het doel is om SVF-cellen te bestuderen, omdat ze een lagere efficiëntie hebben bij celherstel en een lage cellevensvatbaarheid in vergelijking met enzymatische methoden, en er een groter weefselvolume nodig is16,17. Enzymatische vertering met behulp van collagenase is een zachte methode die een adequate vertering van collageen en extracellulaire matrixeiwitten van vezelachtige weefsels zoals WAT18 mogelijk maakt en wordt vaak gebruikt wanneer trypsine niet effectief of schadelijk is19. Het protocol biedt fundamentele richtlijnen voor het oplossen van problemen voor efficiënte isolatie van levensvatbare rijpe adipocyten en SVF-cellen uit menselijke VAT-biopsieën in een enkel proces, met behulp van een collagenase-enzymatische verteringstechniek, en geeft informatie om hoge opbrengsten (hoeveelheid, zuiverheid en integriteit) van totaal RNA uit rijpe adipocyten, inclusief microRNA's, te garanderen voor stroomafwaartse expressietoepassingen. Tegelijkertijd is het protocol geoptimaliseerd om macrofaagsubsets van SVF-cellen te identificeren door middel van de kleuring van meerdere membraangebonden markers voor verdere analyse door middel van flowcytometrie20.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.2 mL PCR tubes</td>
			<td>Axygen</td>
			<td>PCR-02-C</td>
			<td>RNase, DNase free and nonpyrogenic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.5 mL microcentrifuge tubes</td>
			<td>Axygen</td>
			<td>MCT-150-C</td>
			<td>RNase, DNase free and nonpyrogenic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 mL serological pipettes</td>
			<td>Corning</td>
			<td>CLS4101-50EA</td>
			<td>Individually plastic wrapped</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 &#181;L universal pipet tip</td>
			<td>Axygen</td>
			<td>T-300-L-R</td>
			<td>RNase, DNase free and nonpyrogenic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 &#181;L universal pipet tip</td>
			<td>Axygen</td>
			<td>T-300-R-S</td>
			<td>RNase, DNase free and nonpyrogenic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1000 &#181;L universal pipet tip</td>
			<td>Axygen</td>
			<td>T-1000-B-R</td>
			<td>RNase, DNase free and nonpyrogenic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2.0 mL microcentrifuge tube</td>
			<td>Axygen</td>
			<td>MCT-200-C</td>
			<td>RNase, DNase free and nonpyrogenic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>200 &#181;L universal pipet tip</td>
			<td>Axygen</td>
			<td>T-200-Y-R</td>
			<td>RNase, DNase free and nonpyrogenic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2100 Bioanalyzer Instrument</td>
			<td>Agilent</td>
			<td>G2939BA</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2101 Bioanalyzer PC</td>
			<td>Agilent</td>
			<td>G2953CA</td>
			<td>2100 Expert Software pre-installed in PC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5 ml Round Bottom Polystyrene Test Tube</td>
			<td>Corning</td>
			<td>352003&#160;</td>
			<td>Snap cap, sterile</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 mL centrifuge tubes</td>
			<td>Corning</td>
			<td>CLS430828-100EA</td>
			<td>Polipropilene, conical bottom and sterile</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acid-guanidinium-phenol based reagent</td>
			<td>Zymo Research</td>
			<td>R2050-1-200</td>
			<td>TRI Reagent or similar</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agilent RNA 6000 Nano Kit</td>
			<td>Agilent</td>
			<td>5067-1511</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agilent Small RNA Kit</td>
			<td>Agilent</td>
			<td>5067-1548</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>APC/Cy7 anti-human CD14 Antibody</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>325620</td>
			<td>0.4 mg/106 cells, present on monocytes/macrophages, clone HCD14</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Baker</td>
			<td>-</td>
			<td>-</td>
			<td>250 ml, non sterile</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine serum albumin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A3912-100G</td>
			<td>Heat shock fraction, pH 5.2, &#8805;96%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chip priming station</td>
			<td>Agilent</td>
			<td>5065-9951</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase type II</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>17101-015</td>
			<td>Powder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-(+)-Glucose</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>G8270-100G</td>
			<td>Powder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Direct-zol RNA Miniprep</td>
			<td>Zymo Research</td>
			<td>R2051</td>
			<td>Supplied with 50 mL TRI reagen</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting forceps</td>
			<td>-</td>
			<td>-</td>
			<td>Steel, serrated jaws and round ends</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissection tray</td>
			<td>-</td>
			<td>-</td>
			<td>Stainless steel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethyl alcohol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>E7023-500ML</td>
			<td>200&#160;proof, for molecular biology</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FACS Flow Sheath Fluid</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>342003</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FACS Lysing Solution</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>349202</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FACSAria III Flow Cytometer/Cell Sorter</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>648282</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FASCDiva Software</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>642868</td>
			<td>Software v6.0 pre-installed</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hemacytometer</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>Z359629-1EA</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Manual cell counter</td>
			<td>-</td>
			<td>-</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mayo dissecting scisors</td>
			<td>-</td>
			<td>-</td>
			<td>Stainless steel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microcentrifuge</td>
			<td>-</td>
			<td>-</td>
			<td>Adjustable temperature</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nanodrop spectrophotometer</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>ND2000LAPTOP</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Orbital shaker</td>
			<td>-</td>
			<td>-</td>
			<td>Adjustable temperature and speed</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>P10&#160;variable volume&#160;micropipette&#160;</td>
			<td>Thermo Scientific-Finnpipette</td>
			<td>4642040</td>
			<td>1 to 10 &#956;L</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>P1000&#160;variable volume&#160;micropipette&#160;</td>
			<td>Thermo Scientific-Finnpipette</td>
			<td>4642090</td>
			<td>100 to 1000 &#956;L</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>P2&#160;variable volume&#160;micropipette&#160;</td>
			<td>Thermo Scientific-Finnpipette</td>
			<td>4642010</td>
			<td>0.2 to 2 &#956;L</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>P200&#160;variable volume&#160;micropipette&#160;</td>
			<td>Thermo Scientific-Finnpipette</td>
			<td>4642080</td>
			<td>20 to 200 &#956;L</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PCR tube storage rack</td>
			<td>Axygen</td>
			<td>R96PCRFSP</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE/Cy5 anti-human HLA-DR Antibody</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>307608</td>
			<td>0.0625 mg/106 cells, present on macrophages, clone L243</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE/Cy7 anti-human CD45 Antibody</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>304016</td>
			<td>0.1 mg/106 cells, present on leukocytes, clone H130</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate buffered saline</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P3813-10PAK</td>
			<td>Powder, pH 7.4, for preparing 1 L solutions</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipette controller</td>
			<td>-</td>
			<td>-</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Red Blood Cells Lysis Buffer</td>
			<td>Roche</td>
			<td>11 814 389 001</td>
			<td>For preferential lysis of red blood cells from human whole blood</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Refrigerated centrifuge</td>
			<td>-</td>
			<td>-</td>
			<td>Whit adapter for 50 mL conical tubes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Specimen container</td>
			<td>-</td>
			<td>-</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transfer pipette</td>
			<td>Thermo Scientific-Samco</td>
			<td>204-1S</td>
			<td>Sterile</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypan Blue</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15250-061</td>
			<td>0.4% Solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tube racks</td>
			<td>-</td>
			<td>-</td>
			<td>For different tube sizes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vortex Mini Shaker</td>
			<td>Cientifica SENNA</td>
			<td>BV101</td>
			<td>-</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

isolation of viable adipocytes and stromal vascular fraction from human visceral adipose tissue suitable for rna analysis and macrophage phenotyping

Visceraal vetweefsel (VAT) is een actief metabolisch orgaan dat voornamelijk bestaat uit rijpe adipocyten en stromale vasculaire fractie (SVF)-cellen, die verschillende bioactieve moleculen afgeven die metabole, hormonale en immuunprocessen regelen; Momenteel is het onduidelijk hoe deze processen in het vetweefsel worden gereguleerd. Daarom is de ontwikkeling van methoden die de bijdrage van elke celpopulatie aan de pathofysiologie van vetweefsel evalueren, cruciaal. Dit protocol beschrijft de isolatiestappen en biedt de nodige richtlijnen voor het oplossen van problemen voor een efficiënte isolatie van levensvatbare rijpe adipocyten en SVF uit menselijke VAT-biopsieën in één enkel proces, met behulp van een collagenase enzymatische verteringstechniek. Bovendien is het protocol ook geoptimaliseerd om macrofaagsubsets te identificeren en volwassen adipocyten-RNA-isolatie uit te voeren voor genexpressiestudies, waardoor studies kunnen worden uitgevoerd om de interactie tussen deze celpopulaties te ontleden. In het kort worden btw-biopsieën gewassen, mechanisch gehakt en verteerd om een eencellige suspensie te genereren. Na centrifugatie worden rijpe adipocyten geïsoleerd door flotatie uit de SVF-pellet. Het RNA-extractieprotocol zorgt voor een hoge opbrengst van totaal RNA (inclusief miRNA's) uit adipocyten voor stroomafwaartse expressietests. Tegelijkertijd worden SVF-cellen gebruikt om macrofaagsubsets (pro- en anti-inflammatoir fenotype) te karakteriseren door middel van flowcytometrie-analyse.

Dit protocol beschrijft een enzymatische methode waarbij gebruik wordt gemaakt van collagenase-digestie gevolgd door differentiële centrifugatie om in één enkel proces levensvatbare rijpe adipocyten en SVF-cellen te isoleren uit VAT-biopsieën verkregen van gezonde zwangere vrouwen na gedeeltelijke omentectomie. In dit geval gebruiken we de adipocyten voor RNA-extractie en de SVF voor macrofaagfenotypering.
Het RNA-extractieprotocol maakte het mogelijk om RNA te verkrijgen met een voldoende...

Watch this Scientific Journal Video about Isolation of Viable Adipocytes and Stromal Vascular Fraction from Human Visceral Adipose Tissue Suitable for RNA Analysis and Macrophage Phenotyping at JoVE.c

Isolation of Viable Adipocytes and Stromal Vascular Fraction from Human Visceral Adipose Tissue Suitable for RNA Analysis and Macrophage Phenotyping

Dit protocol biedt een efficiënte collagenase-verteringsmethode voor isolatie van levensvatbare adipocyten en stromale vasculaire fractie-SVF-cellen uit menselijk visceraal vet in één enkel proces, inclusief methodologie om hoogwaardig RNA uit adipocyten te verkrijgen en fenotypificatie van SVF-macrofagen door kleuring van meerdere membraangebonden markers voor analyse door middel van flowcytometrie.

Isolatie van levensvatbare vetcellen en stromale vasculaire fractie uit menselijk visceraal vetweefsel geschikt voor RNA-analyse en macrofaagfenotypering

Visceral adipose tissue (VAT) is an active metabolic organ composed mainly of mature adipocytes and stromal vascular fraction (SVF) cells, which release ...

This protocol allows for isolation and study of viable adipocytes and stromal vascular fraction SVF cells from human visceral fat. Enzymatic digestion using collagenase ensures high yields of total RNA from mature adipocytes, including microRNAs suitable for expression analysis. Simultaneously, the method is optimized to identify macrophages by flow cytometry.This protocol provides fundamental troubleshooting guidelines for easy and efficient isolation of viable mature adipocytes and SVF cells from human VAT biopsies in a single process. After the uterine closure and hemostasis, identify greater omentum and extend it on a wet compress. Identify an avascular zone and use Kelly forceps to drill the outer side of visceral adipose tissue, or VAT.Use Ochsner forceps to clamp the proximal and distal side in the zone where VAT was drilled, and used Metzenbaum scissors to cut the tissue. Tie the greater omentum with black silk number one, then remove the Ochsner forceps and evaluate the hemostasis. To perform enzymatic digestion, cut four grams of VAT and use scissors to mince the tissue into small pieces in a dissection tray.Transfer the pieces to a new sterile 50-milliliter centrifuge tube and add 25 milliliters of digestion solution. Incubate the tube at 37 degrees Celsius for 60 minutes in an orbital shaker at 125 RPM. Then filter the digested tissue through three layers of gauze into a new sterile 50-milliliter centrifuge tube.Centrifuge the tube at 200 G for five minutes at four degrees Celsius. After centrifugation, two phases should be visible. The upper phase corresponds to mature adipocytes while SVF cells remain in the pellet.Transfer the mature adipocytes to a tube. Lyse cells by adding 1000 microliters of acid-guanidinium-phenol-based reagent and mix thoroughly with a P1000 micropipette to homogenize. Incubate the mixture for five minutes at room temperature to boost dissociation of nucleo-protein complexes.Centrifuge the cell lysate for five minutes at 12, 000 G to obtain three phases, an upper yellow phase corresponding to adipocyte lipids, a middle pink phase corresponding to nucleic acids, and a pellet with cellular debris. Carefully remove the lipid layer with a P200 micro pipette. Then transfer the middle phase into a new two-milliliter tube, taking care not to disturb the other phases.After purifying the RNA and measuring the concentration with a UV visible spectrophotometer, use an RNA integrity kit to determine the RNA integrity number. Then use the small RNA kit to determine the concentration and percent of microRNAs. Place the clip into a bioanalyzer.Dilute 10 microliters of SVF cell suspension into 90 microliters of 0.4%trypan blue solution, and apply 10 microliters to a standard hemocytometer. Count the viable cells carefully, excluding the dead cells, in four squares at the corner of the counting chamber. Transfer a total of 1 million SVF cells per milliliter to a five-milliliter round-bottom polypropylene test tube for flow cytometry and pellet the cells by centrifugation at 800 G for five minutes at four degrees Celsius.Vortex carefully to loosen the pellet and resuspend the cells in 100 microliters of PBS. Add the pre-titrated optimal concentration of each fluorochrome-conjugated monoclonal antibody specific for a cell surface antigen and mix gently, then incubate the cells for 15 minutes in the dark. Add an excess of cold PBS.And centrifuge the SVF at 400 G for five minutes at four degrees Celsius. Decant the supernatant, taking care to not disturb the pellet. Resuspend the pellet in five milliliters of sheath fluid.Then filter the cells through three layers of gauze into a new five-milliliter round-bottom polypropylene test tube. Vortex each tube briefly before analysis and count a minimum of 10, 000 events for flow analysis. This RNA extraction protocol was used to obtain adequate purity and high integrity RNA and microRNAs from mature adipocytes.The RNA integrity was assessed by an RNA quality control analyzer. Approximately 2.8 times 10 to the six nucleated cells were present per gram of visceral adipose tissue. The stromal vascular fraction cells were labeled with fluorophore-conjugated primary antibodies to identify and characterize 18 macrophages by fluorescence-activated cell-sorting analysis.Cell aggregates were eliminated from analysis by plotting the forward scatter area versus forward scatter height. Then cellular debris was excluded by gating the cells, based on the correct size and complexity, using forward scatter area and the side scatter area. To analyze macrophages, the monocyte and macrophage lineage cells were selected using CD45 and CD14 markers.Subsequently, the CD45-CD14 double positive cells were separated based on macrophage marker HLA-DR expression. Two subsets of macrophages were identified. In addition to identifying new cell phenotypes, this protocol makes it possible to use purified cell populations for future analyses, such as DNA methylation, post-translational modifications, and signaling pathways.

Research

JoVE Journal

Medicine

Isolation of Human Islets from Partially Pancreatectomized Patients

Isolatie van de Mens Eilandjes van Gedeeltelijk Pancreatectomized Patiënten

Investigations into the pathogenesis of type 2 diabetes and islets of Langerhans malfunction 1 have been hampered by the limited availability of type 2 ...

Experimental Generation of Carcinoma-Associated Fibroblasts (CAFs) from Human Mammary Fibroblasts

Experimental Generation of Carcinoma-Associated Fibroblasts CAFs from Human Mammary Fibroblasts

Experimentele Generatie van Carcinoom-geassocieerde fibroblasten (cafe&#39;s) van Human Borst fibroblasten

Carcinomas are complex tissues comprised of neoplastic cells and a non-cancerous compartment referred to as the 'stroma'. The stroma consists of ...

Encapsulation Thermogenic Preadipocytes for Transplantation into Adipose Tissue Depots

Inkapseling Thermogenic preadipocyten voor transplantatie in VetWeefsel Depots

Cell encapsulation was developed to entrap viable cells within semi-permeable membranes. The engrafted encapsulated cells can exchange low molecular ...

Isolation and Cellular Phenotyping of Mesenchymal Stem Cells Derived from Synovial Fluid and Bone Marrow of Minipigs

Isolatie en Cellulaire fenotypering van mesenchymale stamcellen afkomstig van de gewrichtsvloeistof en beenmerg van minivarkens

Mesenchymal stem cells (MSCs) have been established after isolation from various tissue sources, including bone marrow and synovial fluid. Recently, ...

Stromal Vascular Fraction-enriched Fat Grafting for the Treatment of Symptomatic End-neuromata

Stromale vasculaire breuk-verrijkt vet enten voor de behandeling van symptomatische einde-neuromata

The purpose of this study was to methodically illustrate and highlight the crucial steps of stromal vascular fraction (SVF)-enriched fat grafting as a ...

Assessment of Human Adipose Tissue Microvascular Function Using Videomicroscopy

Beoordeling van menselijk vetweefsel microvasculaire functie met behulp van Videomicroscopy

While obesity is closely linked to the development of metabolic and cardiovascular disease, little is known about mechanisms that govern these processes. ...

Clinical Protocol of Producing Adipose Tissue-Derived Stromal Vascular Fraction for Potential Cartilage Regeneration

Protocol voor klinische adipeus weefsel afkomstige stromale vasculaire breuk oplevert potentiële regeneratie van het kraakbeen

Osteoarthritis (OA) is one of the most common debilitating disorders.&#160;Recently, numerous attempts have been made to improve the functions of the ...

Isolation of Adipose Derived Regenerative Cells for the Treatment of Erectile Dysfunction Following Radical Prostatectomy

Isolatie van van vetweefsel afgeleide regeneratieve cellen voor de behandeling van erectiestoornissen na radicale prostatectomie

Stem cells are used in many research areas within regenerative medicine in part because these treatments can be curative rather than symptomatic. Stem ...

Technique for Obtaining Mesenchymal Stem Cell from Adipose Tissue and Stromal Vascular Fraction Characterization in Long-Term Cryopreservation

Techniek voor het verkrijgen van mesenchymale stamcel uit vetweefsel en stromale vasculaire fractiekarakterisering bij cryopreservatie op lange termijn

Human mesenchymal stem cells derived from adipose tissue have become increasingly attractive as they show appropriate features and are an accessible ...

Isolation and Culture of Human Adipose-Derived Stem Cells With an Innovative Xenogeneic-Free Method for Human Therapy

Isolatie en kweek van menselijke vetstamcellen met een innovatieve xenogene-vrije methode voor menselijke therapie

Considering the increasing impact of stem cell therapy, biosafety concerns have been raised regarding potential contamination or infection transmission ...