मुरीन ओमाया, जो चिकित्सकीय रूप से इस्तेमाल ओमाया जलाशय की नकल करता है, शोधकर्ताओं को मस्तिष्क मेटास्टेस और एक पूर्व नैदानिक मॉडल में सार्वभौमिक घातक लेप्टोमीनिंगियल रोग के लिए प्रत्यक्ष लक्षित उपचारों की एक किस्म का परीक्षण करने की अनुमति देता है । इस तकनीक का लाभ यह है कि शोधकर्ता रक्त-मस्तिष्क बाधा को दरकिनार करते हुए केंद्रीय तंत्रिका तंत्र मेटास्टेस के इलाज के लिए सीधे सेरेब्रोस्पाइनल तरल पदार्थ में दवाओं की माइक्रोलीटर मात्रा वितरित कर सकते हैं। यह मुरीन ओमाया प्रत्यारोपण प्रोटोकॉल शोधकर्ताओं या तकनीशियनों के लिए डिज़ाइन किया गया है जिनके पास स्टीरियोटाटिक सर्जरी अनुभव और एसेप्टिक तकनीक प्रशिक्षण है, जो इस प्रक्रिया की सफलता सुनिश्चित करने के लिए आवश्यक हैं।
प्रक्रिया का प्रदर्शन दक्षिण फ्लोरिडा विश्वविद्यालय में तुलनात्मक चिकित्सा से मार्गी बाल्डविन और मिशेल डेनियलसन, और विंसेंट लॉ, Moffitt कैंसर केंद्र और अनुसंधान संस्थान में डॉ पीटर Forsyth प्रयोगशाला से एक वरिष्ठ अनुसंधान सहयोगी होगा । माउस को एक मिलीग्राम प्रति किलोग्राम निरंतर रिलीज बुप्रेनोरफिन के साथ चमड़े के इंजेक्शन से शुरू करें। माउस को एनेस्थेटाइज करने के बाद, इसे सर्जरी के लिए तैयार करें।
चीरा साइट को दूषित करने से फर रखने के लिए पर्याप्त सीमा क्षेत्र के साथ शल्य चिकित्सा साइट क्लिप। सिर की पूरी सतह के फर को शेव करें, और बाँझ तकनीक का उपयोग करके त्वचा तैयार करें। फिर साइट के केंद्र से परिधि तक काम करते हुए, रोगाणुरोधी त्वचा एंटीसेप्टिक के साथ साइट को संतृप्त करें, और इसे सूखने दें।
रीढ़ की हड्डी को सुनिश्चित करने के लिए शरीर की स्थिति को सिस्टर्ना मैग्ना के साथ स्तर रखा जाता है। पूंछ पर मामूली कर्षण लागू करते समय, इसे सुरक्षित करने के लिए पूंछ के आधार पर टेप रखें। सर्जिकल साइट को प्रदूषण से बचाने के लिए या तो एक बाँझ कपड़ा या एक बाँझ चिपकने वाला प्लास्टिक ड्रेप सामग्री लागू करें।
पूर्ण विस्तार में गर्दन के साथ, सर्जिकल कैंची युक्तियों को नीचे की ओर चलाएं ऑक्सीपिटल हड्डी में मामूली दबाव के साथ, बस पिन्ने के बीच शुरुआत करें। एक छोटे से तीन से पांच मिलीमीटर मिडलाइन चीरा, थोड़ा ऊपर palpated concavity बनाओ । एक 30 गेज हैमिल्टन सिरिंज में सेल निलंबन के पांच माइक्रोलीटर ड्रा ।
सिस्टर्ना मैग्ना पर धीरे-धीरे दबाने के लिए एक से दो मिलीमीटर टिप के साथ कुंद इत्तला दी संदंश का प्रयोग करें। एक बंद स्थिति में सुझावों का परिचय, और उन्हें खोलने के लिए, जबकि ड्यूरा पर नीचे दबाव लागू। कुंद विच्छेदन दोहराएं जब तक कि ड्यूरल झिल्ली आसानी से पहचान न हो जाए और संबंधित रक्त वाहिकाएं उजागर क्षेत्र में दिखाई न दें।
आसपास की मांसपेशी को वापस लेने के लिए संदंश को खुला रखते हुए, बेवेल की कल्पना करने के लिए ड्यूरा के नीचे 30 गेज गैर-स्कोरिंग सुई पेश करें, यह सुनिश्चित करें कि सुई केवल बेवेल से परे पेश की गई है। धीरे-धीरे एक सिरिंज प्लंजर तैनात करें और ड्यूरा के ठीक नीचे कोशिकाओं को वितरित करें। यदि इंजेक्शन साइट पर रिसाव नोट किया जाता है, तो कपास-इत्तला देने वाले एप्लिकेटर के साथ कोमल दबाव लागू करें।
घाव क्लिप या त्वचा चिपकने वाली माइक्रो ड्रॉप लगाने से त्वचा को बंद कर दें। पहले सप्ताह के लिए सर्जरी के बाद दैनिक चूहों की निगरानी करें। यदि कोई माउस दर्द या संकट में दिखाई देता है, तो पशु चिकित्सा परामर्श और निर्देश के आधार पर पांच दिनों तक हर 12 से 24 घंटे में एक बार 10 मिलीग्राम प्रति किलोग्राम कारप्रोफेन के चमड़े के नीचे इंजेक्शन के साथ इसका इलाज करें।
एक 25 गेज लघु इंजेक्शन बंदरगाह और एक मिलीमीटर स्पेसर डिस्क का उपयोग कर मुरीन Ommaya इंजेक्शन डिवाइस इकट्ठा । सही मस्तिष्क गोलार्द्ध में धातु कैनुला के लगभग 2.5 मिलीमीटर की पैठ सुनिश्चित करने के लिए एक साइनोक्रिलेट बाँझ चिपकने वाला का उपयोग करें, और बाँझ तकनीक के अनुसार त्वचा तैयार करें। खोपड़ी का पर्दाफाश करने के लिए अंतर्निहित चमड़े के नीचे ऊतकों के कुंद विच्छेदन के बाद एक छोटी त्वचा चीरा बनाओ।
हाइड्रोजन पेरोक्साइड लथपथ कपास इत्तला दे दी applicator चिपक जाती है का उपयोग कर खोपड़ी सूखी। ड्यूरा मैटर को बेनकाब करने के लिए खोपड़ी 0.5 मिलीमीटर पीछे और ब्रेग्मा के 1.1 मिलीमीटर पार्श्व में 0.9 मिलीमीटर बर्र छेद ड्रिल करें। माइक्रोड्रिल को एक तरफ ले जाएं और धीरे-धीरे बर्र होल के आसपास की हड्डी को स्कोर करें।
एक साइनोक्रेलेट बाँझ चिपकने वाला का उपयोग करके खोपड़ी में एक इंजेक्शन पोर्ट को चिपकाएं, और इसे लगभग 2.5 मिलीमीटर की गहराई में डालें। सीवन एक बाधित सिलाई पैटर्न या पर्सस्ट्रिंग सीवन में 4-0 गैर-अवशोषित नायलॉन टांके का उपयोग करके चीरा। वसूली के लिए व्यक्तिगत पिंजरों में हाउस के बाद सर्जरी चूहों ।
माउस की खुराक के लिए, एक बंदरगाह इंजेक्शन एडाप्टर और एक हैमिल्टन सिरिंज का उपयोग कर मुरीन ओमाया का उपयोग करें । संदंश का उपयोग करना, लघु इंजेक्शन बंदरगाह के शीर्ष पकड़ो और धीरे बंदरगाह इंजेक्टर एडाप्टर पूरी तरह से बंदरगाह पट में डालें । एक बार इंजेक्शन लगने के बाद, पोर्ट इंजेक्शन एडाप्टर से मुरीन ओमाया को संदंश के साथ अलग कर दें।
इंजेक्शन के मार्ग की कल्पना करने के उद्देश्य से, 2% इवांस ब्लू को मुरीन ओमाया मॉडल के माध्यम से इंजेक्शन दिया गया था। डाई ने 15 मिनट में वेंट्रिकल्स और मस्तिष्क में सफलतापूर्वक घुसपैठ की। 30 मिनट बाद रीढ़ की हड्डी पर डाई दिखाई देने लगी।
अवधारणा के एक सबूत के रूप में, BALB/c चूहों एक लूसिफ़ेरेस लेबल Her2 + TUBO स्तन कैंसर सेल लाइन intracisternally के साथ इंजेक्शन थे, और Murine Ommayas प्रत्यारोपित किया गया । इंजेक्शन के लगभग एक सप्ताह बाद, चूहों ने एलएमडी विकसित करना शुरू किया। इन चूहों को सप्ताह में एक बार हर् 2 एंटीबॉडी इम्यूनोथेरेपी के साथ चार सप्ताह तक इलाज किया गया था, या तो इंट्रापरिटोनियल इंजेक्शन के माध्यम से प्रणालीगत चिकित्सा के माध्यम से या मुरीन ओमाया के माध्यम से इंट्राथेकाली।
जबकि अनुपचारित चूहों 19 दिन तक मर गया, सभी चूहों कि Murine Ommaya के माध्यम से इंट्राथेकल चिकित्सा प्राप्त बच गया । चार सप्ताह तक, ट्यूमर का एक पूर्ण प्रतिगमन देखा गया था । प्रणालीगत चिकित्सा के साथ इलाज चूहों की तुलना में, चूहों कि इंट्राथेकल थेरेपी प्राप्त एक बहुत लंबे समय तक समग्र अस्तित्व था ।
इस प्रक्रिया का प्रयास करते समय, यह महत्वपूर्ण है कि मुरीन ओमाया रखने से पहले खोपड़ी सूखी है। थोड़ी मात्रा में गोंद का प्रयोग करें और खोपड़ी का पालन करने के लिए लगभग 10 सेकंड तक मुरीन ओमाया को स्थिति में रखें। इस तकनीक के साथ, शोधकर्ता माउस मॉडल में कैंसर दवाओं की एक विस्तृत सरणी का पता लगा सकते हैं जो केंद्रीय तंत्रिका तंत्र मेटास्टेसिस के रोगियों के लिए तर्कसंगत चिकित्सीय रणनीतियों को डिजाइन करने के लिए चिकित्सकीय रूप से प्रासंगिक हैं।
