Preparation of Quantum-Dot-Labeled DNA Substrate Materials
3:38
Microfluidic Device Construction
5:58
Surface Tethering of Quantum-Dot-Labeled DNA Substrate
7:07
REase-Mediated DNA Cleavage
7:51
Results: Single-Molecule TIRF Experiment for Parallelized Observations of DNA Cleavage Events
9:32
Conclusion
Transcript
باستخدام هذا البروتوكول ، يمكننا مراقبة انقسام الحمض النووي الخاص بالموقع مباشرة عن طريق تقييد نوكلياز الإندوكلياز على مستوى الجزيء الواحد. يسمح لنا نهجنا المتعدد الإرسال بقياس الوقت الذي تستغرقه مئات REases الفردية لإكمال الدورة الحفازة. يسمح لنا
Sign in or start your free trial to access this content
Using quantum-dot-labeled DNA and total internal reflection fluorescence microscopy, we can investigate the reaction mechanism of restriction endonucleases while using unlabeled protein. This single-molecule technique allows for massively multiplexed observation of individual protein-DNA interactions, and data can be pooled to generate well-populated dwell-time distributions.