Name: whole-mount staining, visualization, and analysis of fungiform, circumvallate, and palate taste buds
Uploaded: 2021-02-11T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Whole-Mount Staining, Visualization, and Analysis of Fungiform, Circumvallate, and Palate Taste Buds at JoVE.com

Vi takker Kavisca Kuruparanantha for hennes bidrag til vevsfarging og avbildning av omskjærende smaksløker, Jennifer Xu for farging og avbildning av innervering til papillaen, Kaytee Horn for dyrepleie og genotyping, og Liqun Ma for hennes vevfarging av bløtpalte smaksløkene. Dette prosjektet ble støttet av R21 DC014857 og R01 DC007176 til R.F.K og F31 DC017660 til L.O.

MERK: Alle dyrene ble tatt vare på i henhold til retningslinjene som er fastsatt i US Public Health Service Policy on the Humane Care and Use of Laboratory Animals og NIH Guide for care and use of Laboratory Animals. Phox2b-Cre mus (MMRRC stamme 034613-UCD, NP91Gsat/Mmcd) eller TrkBCreER mus (Ntrk2tm3.1(cre/ERT2)Ddg) ble oppdrettet med tdTomato reporter mus (Ai14). AdvillinCreER47 ble oppdrettet med Phox2b-flpo48 og Ai65. For 5-eth...

Utviklingen av en tilnærming til konsekvent å samle og flekke hele smaksløker fra tre smaksregioner i munnhulen (soppform, omkrets og ganen) gir betydelige forbedringer for å analysere smakstransduserende celler, spore nyinkorporerte celler, innervasjon og relasjoner mellom disse strukturene. I tillegg letter det lokalisering av en potensiell sekundær neuronmarkør både innenfor eller utenfor en merket befolkning50. Dette er spesielt relevant gitt at gustatory papillae også får robust soma...

Smaksløker er samlinger av 50-100 spesialiserte epitelceller som binder undergrupper av kjemisk smak stimuli tilstede i munnhulen. Smakstransduserende celler antas generelt å eksistere som type1,2,3,4,5,6,7,8,9, først basert på elektronmikroskopikriterier som senere ble korrelert med molekylære markører. Type II-celler uttrykker fosfolipase C-beta 2 (PLCβ2)2 og forbigående reseptorpotensial kationkanal, underfamilie M medlem 51 og inkluderer celler som transduserer søt, bitter og umami1,10. Type III-celler uttrykker karbonanhydrase 4 (Car4)11 og synaptosomalt assosiert protein 258 og betegner celler som hovedsakelig reagerer på sur smak11. Cellene som transduserer salthet, er ikke like tydelig avgrenset12,13,14, men kan potensielt inneholde cellene Type I, Type II og Type III15,16,17,18,19. Smaksløkmiljøet er komplekst og dynamisk, gitt at smakstransduserende celler kontinuerlig snur gjennom voksen alder og erstattes av basale forfedre3,20,21. Disse smakstransduserende cellene kobles til pseudo-unipolare nervefibre fra geniculatet og petrosale ganglia, som sender smaksinformasjon til hjernestammen. Disse nevronene har primært blitt kategorisert basert på den typen smaksinformasjon de bærer22,23 fordi informasjon om deres morfologi har vært unnvikende til nylig24. Type II celler kommuniserer med nervefibre via kalsium homeostase modulator protein 1 ion kanaler25, mens Type III celler kommunisere via klassiske synapser8,26. Videre karakterisering av smaksløkceller - inkludert transduserende celletypeavstamninger, faktorer som påvirker deres differensiering, og strukturene til å koble arbors er alle områder av aktiv undersøkelse.
Smaksløkstudier har blitt hindret av flere tekniske utfordringer. Det heterogene og tette vevet som utgjør tungen reduserer signifikant antistoffgjennomtrengelighet for immunhiistokjemi27,28,29. Disse hindringene har nødvendiggjort seksjonsprotokoller som resulterer i splitting av smaksløker på tvers av seksjoner, slik at målingene enten tilnærmes basert på representative seksjoner eller summeres på tvers av seksjoner. Tidligere har representative tynne seksjoner blitt brukt til å tilnærme seg både volumverdier og transduseringscelleantall30. Tykkere seriell seksjonering gir mulighet for avbildning av alle smaksløkseksjoner og summering av målinger fra hver seksjon31. Kutte slike tykke seksjoner og velge bare hele smaksløker fordommer prøvetaking mot mindre smaksløker32,33,34. Nerveinnvandringsestimater fra seksjonerte smaksløker har vært basert på analyser av pikseltall13,35, hvis kvantifisert i det hele tatt36,37,38. Disse målingene ignorerer helt strukturen og antall individuelle nerve arbors, fordi arbors er delt (og vanligvis dårlig merket). Til slutt, selv om peeling bort epitelet tillater hele smaksløker å bli farget39,40, fjerner det også smak-knopp nervefibre og kan forstyrre de normale forholdene mellom celler. Derfor har undersøkelser av de strukturelle forholdene innen smaksløker vært begrenset på grunn av denne forstyrrelsen forårsaket av fargingsmetoder.
Samling av hele strukturen eliminerer behovet for representative inndelinger og tillater bestemmelse av absolutte verdimålinger av volumer, celleantall og strukturmorfologier41. Denne tilnærmingen øker også nøyaktigheten, begrenser skjevheter og reduserer teknisk variasjon. Dette siste elementet er viktig fordi smaksløker viser betydelig biologisk variasjon både innenfor34,42 og på tvers av region43,44, og hele smaksløkanalyser gjør at absolutte cellenumre kan sammenlignes mellom kontroll og eksperimentelle forhold. Videre tillater evnen til å samle intakte smaksløker analysen av de fysiske forholdene mellom forskjellige transduserende celler og deres tilhørende nervefibre. Fordi smakstransduserende celler kan kommunisere med hverandre45 og kommunisere med nervefibre46, er disse forholdene viktige for normal funksjon. Dermed kan det hende at funksjonstapsbetingelser ikke skyldes tap av celler, men i stedet for endringer i cellerelasjoner. Gitt her er en metode for å samle hele smaksløker for å oppnå fordelene med absolutte målinger for raffinering av volumanalyser for både smaksløker og deres innerveringer, smakscelletall og former, og for å lette analyser av transduserende celleforhold og nerve-arbor morfologier. To arbeidsflyter presenteres også nedstrøms for denne nye helmonterte metoden for vevsforberedelse: 1) for å analysere smaksløkvolum og total innervasjon og 2) for sparsommelig celle genetisk merking av smaksnevroner (med undergrupper av smakstransduserende celler merket) og påfølgende analyser av smak-nerve arbor morfologi, antall smakscelletyper og deres former, og bruk av bildeanalyseprogramvare for å analysere de fysiske forholdene mellom transduserende celler og de mellom transduserende celler og deres nerve arbors. Sammen gir disse arbeidsflytene en ny tilnærming til vevsforberedelse og for analyser av hele smaksløker og fullstendig morfologi av deres innervating arbors.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr >
			<td >2,2,2-Tribromoethanol</td>
			<td >ACROS Organics</td>
			<td >AC421430100</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >2-Methylbutane</td>
			<td>ACROS</td>
			<td>126470025</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >AffiniPure Fab Fragment Donkey Anti-Rabbit IgG</td>
			<td>Jackson ImmunoResearch</td>
			<td>711-007-003</td>
			<td>15.5&#956;L/mL</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Alexa Fluor&#174; 647 AffiniPure Donkey Anti-Rat IgG</td>
			<td>Jackson Immuno Research</td>
			<td>712-605-150</td>
			<td>(1:500)</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >AutoQuant X3 software</td>
			<td>&#160;Media Cybernetics</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Blunt End Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools&#160;</td>
			<td>FST 91100-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Click-iT&#8482; Plus EdU Cell Proliferation Kit</td>
			<td>Molecular Probes</td>
			<td>C10637</td>
			<td>Follow kit instructions&#160;</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Coverglass</td>
			<td>Marienfeld</td>
			<td>107242</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Cytokeratin-8</td>
			<td>Developmental Studies Hybridoma Bank (DSHB), (RRID: AB_531826)&#160;</td>
			<td>Troma1 supernatant</td>
			<td>(1:50, store at 4&#176;C)</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Dissection Scissors (coarse)</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-5619</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Dissection Scissors (fine)</td>
			<td>Moria</td>
			<td>MC19B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Donkey anti-Rabbit IgG (H+L) Highly Cross-Adsorbed Secondary Antibody, Alexa Fluor 488</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>A21206</td>
			<td>(1:500)</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Donkey anti-Rabbit, Alexa Fluor&#174; 555</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>A31572</td>
			<td>(1:500)</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >DyLight&#8482; 405 AffiniPure Fab Fragment Bovine Anti-Goat IgG</td>
			<td>Jackson Immuno Research</td>
			<td>805-477-008</td>
			<td>(1:500)</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Fluoromount G</td>
			<td>Southern Biotech</td>
			<td>0100-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Glass slides</td>
			<td>Fisher Scientific (Superfrost Plus Miscroscope Slides)</td>
			<td>12-550-15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Goat anti-Car4</td>
			<td>R&#38;D Systems&#160;</td>
			<td>AF2414</td>
			<td>(1:500)</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Imaris&#160;</td>
			<td>Bitplane&#160;</td>
			<td>pixel-based image analysis software</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Neurolucida 360 + Explorer</td>
			<td>MBF Biosciences</td>
			<td>3D vector based image analysis software</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Normal Donkey Serum</td>
			<td>Jackson Immuno Research</td>
			<td>017-000-121</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Normal Rabbit Serum&#160;</td>
			<td>Equitech-Bio, Inc</td>
			<td>SR30</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Olympus FV1000</td>
			<td></td>
			<td >(multi-Argon laser with wavelengths 458, 488, 515 and additional HeNe lasers emitting 543 and 633)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Paraformaldehyde</td>
			<td>EMD</td>
			<td>PX0055-3</td>
			<td>4% in 0.1M PB</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Rabbit anti-dsRed</td>
			<td>Living Colors DsRed Polyclonal Antibody; Clontech Clontech Laboratories, Inc. (632496)</td>
			<td>632496</td>
			<td>(1:500)</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Rabbit anti-PLC&#946;2&#160;</td>
			<td>Santa Cruz Biotechnology</td>
			<td>Cat# sc-206</td>
			<td>(1:500)</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Sodium Phosphate Dibasic Anhydrous</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP332-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Sodium Phosphate Monobasic</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP330-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >tert-Amyl alcohol</td>
			<td>Aldrich Chemical Company</td>
			<td>8.06193</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Tissue Molds</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>70180</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Tissue-Tek&#174;&#160;O.C.T. Compound</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>4583</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Triton X-100</td>
			<td>BIO-RAD</td>
			<td>#161-0407</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Zenon&#8482; Alexa Fluor&#8482; 555 Rabbit IgG Labeling Kit</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Z25305</td>
			<td>Follow kit instructions&#160;</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

whole-mount staining, visualization, and analysis of fungiform, circumvallate, and palate taste buds

Smaksløker er samlinger av smakstransduserende celler spesialisert for å oppdage undergrupper av kjemiske stimuli i munnhulen. Disse transduserende cellene kommuniserer med nervefibre som bærer denne informasjonen til hjernen. Fordi smakstransduserende celler kontinuerlig dør og erstattes gjennom hele voksen alder, er smaksløkmiljøet både komplekst og dynamisk, og krever detaljerte analyser av celletypene, plasseringene deres og eventuelle fysiske forhold mellom dem. Detaljerte analyser har vært begrenset av tungevevs heterogenitet og tetthet som har redusert antistoffpermeabiliteten betydelig. Disse hindringene krever seksjoneringsprotokoller som resulterer i å dele smaksløker på tvers av seksjoner, slik at målingene bare blir tilnærmet, og celleforhold går tapt. For å overvinne disse utfordringene innebærer metodene som er beskrevet her, å samle, forestille seg og analysere hele smaksløker og individuelle terminal arbors fra tre smaksregioner: soppform papillae, circumvallate papillae og ganen. Innsamling av hele smaksløker reduserer skjevheter og teknisk variasjon og kan brukes til å rapportere absolutte tall for funksjoner, inkludert smaksløkvolum, total smaksløkinning, transduseringscelleantall og morfologien til individuelle terminal arbors. For å demonstrere fordelene med denne metoden, gir dette papiret sammenligninger av smaksløk og innervasjonsvolumer mellom soppform og omskjære smaksløker ved hjelp av en generell smaksløkmarkør og en etikett for alle smaksfibre. En arbeidsflyt for bruk av sparsommelig celle genetisk merking av smaksnevroner (med merkede undergrupper av smakstransduserende celler) er også gitt. Denne arbeidsflyten analyserer strukturene til individuelle smak-nerve arbors, celle type tall, og de fysiske relasjonene mellom celler ved hjelp av bildeanalyse programvare. Sammen gir disse arbeidsflytene en ny tilnærming for vevsforberedelse og analyse av både hele smaksløker og den komplette morfologien til deres innervating arbors.

Farging av det linguale epitelet med antistoffer mot dsRed og keratin-8 (en generell smaksløkmarkør) merket både hele smaksløkene og all smaksløkeinnvandring i Phox2b-Cre:tdTomato mus50,51 (Figur 3A). Avbildning av disse smaksløkene fra porene til basene ga de høyeste x-y-planbildene med høyest oppløsning (Figur 3A,B). Konturfunksjonen til det pikselbaserte bildebehandlingsprogr...

Watch this Scientific Journal Video about Whole-Mount Staining, Visualization, and Analysis of Fungiform, Circumvallate, and Palate Taste Buds at JoVE.com

Whole-Mount Staining, Visualization, and Analysis of Fungiform, Circumvallate, and Palate Taste Buds

Dette dokumentet beskriver metoder for vevsforberedelse, farging og analyse av hele soppform, omkrets og gane smaksløker som konsekvent gir hele og intakte smaksløker (inkludert nervefibrene som innervate dem) og opprettholder forholdet mellom strukturer innen smaksløker og den omkringliggende papillaen.

Helfjellsfarging, visualisering og analyse av soppform, circumvallate og ganens smaksløker

Taste buds are collections of taste-transducing cells specialized to detect subsets of chemical stimuli in the oral cavity. These transducing cells ...

Denne helmonterte disseksjons- og analysearbeidsflyten gir en ny tilnærming for å analysere den komplette morfologien til individuelle smaksnerve arbors, transduserende celletypenumre og de fysiske forholdene mellom celler. Innsamling av hele det linguale epitelet tillater oss å måle det absolutte antall celler og volumet av innervering i hele smaksløken. Denne tilnærmingen er mer nøyaktig enn estimater av cellestruktur basert på prøvetaking fra seksjoner, noe som reduserer teknisk variasjon.Dette er også den første metoden som gir detaljert analyse av smaksløkcellene i forhold til deres innervasjon. Denne metoden kan forbedre undersøkelser av de potensielle kretsene i smaksløken, samt sykdomsprosesser og kjemoterapier som forstyrrer normal smaksfunksjon. I de fleste av disse tilfellene er det uklart hvilken struktur eller relasjon som er forstyrret, så å opprettholde alle disse faktorene intakt tillater alle analyser innenfor et enkelt preparat.Den vanligste feilen er å prøve å unngå å skade epitelet ved ikke å dissekere nær nok til undersiden av epitelet. Det er viktig å fjerne så mye underliggende vev som mulig før du fryser vevet i vevsformen. Det er også viktig å sikre at epitelet ligger flatt i bunnen av vevsformen.Begynn med å tine og skylle tungen i 0,1 molar fosfatbuffer. Plasser deretter 1/2 av den fremre tungen som inneholder soppform papillen på et glasssklie under et dissekerende mikroskop. Bruk stumpe tang og disseksjon saks for å fjerne muskelen og holde vevet åpent som lingual epitel er buet, sikre en flat orientering av vev ved å holde bladene av grov disseksjon saks parallelt med epitelet.Kast det ventrale ikke-keratiniserte epitelet på tungen, da det ikke inneholder smaksløker. Bruk deretter fin disseksjon saks for nærmere disseksjon til undersiden av keratinisert epitel. Bruk stumpe tang for å legge et stykke epitel i en vevsform og sørg for at den ligger flatt.Legg deretter en dråpe optimal skjæretemperaturforbindelse, eller OCT, til vevet. Plasser vevsformen på en tidligere avkjølt metallbase under dissekeringsområdet, og fortsett deretter å banke vevet lett med tangene til OCT har frosset, og sørg for at vevet fryser så flatt som mulig. Når OCT har frosset, legg raskt til ekstra OKT og legg formen i et beger av avkjølt 2-metylbutane til frossen.Monter OCT-formen på kryostaten og kutt den i 20 mikron seksjoner. Samle hver seksjon og se den under lysmikroskopet for å vurdere nærheten til bunnen av epitelet. Etter at vevet er barbert fra undersiden av epitelet, tin epitelet og skyll det to ganger i 0,1 molar PB på en shaker.Klipp den harde ganen fremre til krysset mellom den myke og harde ganen, og skill deretter den myke ganen fra det underliggende vevet, og sørg for at eventuelle gjenværende beinfragmenter blir kuttet bort og fjerner ekstra muskel- og bindevev. Hold ganen med stumpe tang og fjern de resterende kjertlene og miste bindevev ved å forsiktig skrape dem med et barberblad. Hele smaksløker og all smaksløkeinnvandring i Phox2b-Cre TdTomato-mus ble merket ved å fargelegge det linguale epitelet med antistoffer for DsRed og keratin åtte.Smaksløkvolumet ble målt og viste ingen sammenhenger mellom smaksløkvolumer og innervasjonsvolumer i verken soppformen eller de omskjærte måleområdene. Administrering av en lav dose tamoxifen hos TrkB CreER TdTomato-mus forårsaker genrekombinasjon og merking av et lite antall nevroner. En helmontert smaksløk farget med smakstransduserende cellemarkører karbonanhydrase fire og fosfolipase C beta to er vist her.Denne smaksløken har to merkede terminal arbors, som vises med smaksløken fjernet etter rekonstruering av fibrene. Ved hjelp av celle pikselbasert bildebehandlingsprogramvare for å bestemme den nærmeste nærheten mellom nervefibre og smakstransduserende celler avslørte at av 19 smakstransduserende celler var den blå terminal arbor innen 200 nanometer av den lyseblå karboniske anhydrase fire plusscellen. Terminal arbor knyttet til den grønne sporingen er vist i magenta og er innenfor 200 nanometer av både den lyse og mørkeblå karboniske anhydrasen fire pluss celler.Helmontert keratin åtte og 5-ethynyl-2'deoxyuridine eller EdU farging av soppform smaksløker avslørte at EdU-merkede celler var til stede både i og utenfor smaksløkene. Magenta og lilla kjerner observeres utenfor keratin åtte pluss grensen til smaksløken. De gule, blågrønne og blå cellene var innenfor smaksløken.Når du prøver denne protokollen, er vevsrehandlingen og frysetrinnene avgjørende. Disse vevs disseksjonsmetodene kan etterfølges av farging for en rekke celler og strukturer for å analysere forholdene både innenfor smaksløken og utenfor smaksløken, men innenfor papillaen. Dette er den første analysen av hele smak arbors i smaksløken, samt deres forhold til smakstransduserende celler.Bevaring og farging for flere av disse elementene i et enkelt preparat utvider både mulighetene for analyse og foredler målingene som er mulige.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Visualization of the Embryonic Nervous System in Whole-mount Drosophila Embryos

Visualization of the Embryonic Nervous System in Whole-mount Drosophila Embryos

The Drosophila embryo is an attractive model system for investigating the cellular and molecular basis of neuronal development. Here we describe the ...

Dissection of a Mouse Eye for a Whole Mount of the Retinal Pigment Epithelium

The retinal pigment epithelium (RPE) lies at the back of the mammalian eye, just under the neural retina, which contains the photoreceptors (rods and ...

Reproducible Mouse Sciatic Nerve Crush and Subsequent Assessment of Regeneration by Whole Mount Muscle Analysis

Reproduserbar Mouse hoftenervene Crush og påfølgende vurdering av Regeneration av Whole Mount Muscle Analysis

Regeneration in the peripheral nervous system (PNS) is widely studied both for its relevance to human disease and to understand the robust regenerative ...

Isolation and Culture of Human Fungiform Taste Papillae Cells

Isolering og kultur for Human Fungiform Taste papillae Cells

Taste cells are highly specialized, with unique histological, molecular and physiological characteristics that permit detection of a wide range of simple ...

Visualization and Genetic Manipulation of Dendrites and Spines in the Mouse Cerebral Cortex and Hippocampus using In utero Electroporation

Visualization and Genetic Manipulation of Dendrites and Spines in the Mouse Cerebral Cortex and Hippocampus using In utero Electroporation

Visualisering og genetisk manipulering av dendritter og pigger i Mus hjernebarken og hippocampus hjelp<em&gt; I fosterlivet</em&gt; Electroporation

In utero electroporation (IUE) has become a powerful technique to study the development of different regions of the embryonic nervous system 1-5. To date ...

Whole Mount Immunofluorescent Staining of the Neonatal Mouse Retina to Investigate Angiogenesis In vivo

Whole Mount Immunofluorescent Staining of the Neonatal Mouse Retina to Investigate Angiogenesis In vivo

Hele Mount Immunofluorescent Farging av Neonatal Mouse Retina å etterforske Angiogenesis<em&gt; In vivo</em

Angiogenesis  is the complex process of new blood vessel formation defined by the sprouting  of new blood vessels from a pre-existing vessel network. ...

Dissection of the Transversus Abdominis Muscle for Whole-mount Neuromuscular Junction Analysis

Dissection of the Transversus Abdominis Muscle for Whole-mount Neuromuscular Junction Analysis

Disseksjon av Transversus Abdominis Muscle for hel-mount Neuromuscular Junction Analyse

Analysis of neuromuscular junction morphology can give important insight into the physiological status of a given motor neuron. Analysis of thin flat ...

Whole Mount Immunolabeling of Olfactory Receptor Neurons in the Drosophila Antenna

Whole Mount Immunolabeling of Olfactory Receptor Neurons in the Drosophila Antenna

Hele Mount immunolabeling av olfactory Receptor nevroner i<em&gt; Drosophila</em&gt; Antenne

Odorant molecules bind to their target receptors in a precise and coordinated manner. Each receptor recognizes a specific signal and relays this ...

Whole-mount Imaging of Mouse Embryo Sensory Axon Projections

Hel-mount Imaging av Mouse Embryo Sensory Axon Anslag

The visualization of full-length neuronal projections in embryos is essential to gain an understanding of how mammalian neuronal networks develop. Here we ...

Whole Mount Labeling of Cilia in the Main Olfactory System of Mice

Hele Mount Merking av Cilia i hovedluktsystemet av Mus

The mouse olfactory system comprises 6-10 million olfactory sensory neurons in the epithelium lining the nasal cavity. Olfactory neurons extend a single ...