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•
08:57 min
February 4th, 2021
DOI :
10.3791/62180-v
Chapters
0:05
Introduction
1:04
Gliding Actin Filament Assay
5:02
Performing the Myosin 5a TIRF Microscopy Assay
6:40
Results: Gliding Activity Assay of the NM2b and M5a-HMM Filaments
8:05
Conclusion
Transcript
此协议可用于在蛋白质水平上描述非肌肉肌素动力学,这可以告知有助于它们在细胞中发挥作用的动体特性。这是一种快速、可重复和高度控制的方法,可用于研究各种调节条件对肌素活动的影响,告知其细胞行为。这些技术可用于研究非肌肉肌素的致病突变如何影响单分子和合奏水平的行为。
其方法的一般方法可用于其他各种细胞骨骼系统,如用微管对纯化运动素和狄宁的表征。此协议的多功能性可能会引发关于哪些氟和化学条件最合适的问题,但该方法可以相对快速地进行优化。了解如何设置和涂覆流室,为适应这些实验的各种条件打
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Summary
这里介绍的是一个过程来表达和净化肌素5a,然后讨论其特征,使用合奏和单分子体外荧光显微镜为基础的测定,以及如何修改这些方法来描述非肌肉肌素2b。
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