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•
08:57 min
February 4th, 2021
DOI :
10.3791/62180-v
Chapters
0:05
Introduction
1:04
Gliding Actin Filament Assay
5:02
Performing the Myosin 5a TIRF Microscopy Assay
6:40
Results: Gliding Activity Assay of the NM2b and M5a-HMM Filaments
8:05
Conclusion
Transcript
このプロトコルは、非筋肉筋筋のダイナミクスをタンパク質レベルで特徴付けるために使用することができ、細胞内での役割に寄与する運動特性を知らせることができる。これは、様々な調節条件がミオシン運動に及ぼす影響を研究し、細胞行動を知らせる高速で再現性の高い高度に制御された方法です。これらの技術は、非筋肉ミオシンの疾患を引き起こす突然変異が単一分子およびアンサンブルレベルでの行動にどのような影響を与えるかを調べるのに使用することができる。
その方法論の一般的なアプローチは、微小管を用いた
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Summary
ここで提示されるミオシン5aを発現および精製する手順は、その特徴付け、アンサンブルおよび単分子の両方を用いて蛍光顕微鏡ベースのアッセイ、およびこれらの方法を非筋筋筋筋2bの特徴付けのためにどのように修飾することができるかである。
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