Name: comparative analysis of experimental methods to quantify animal activity in caenorhabditis elegans models of mitochondrial disease
Uploaded: 2021-04-04T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Comparative Analysis of Experimental Methods to Quantify Animal Activity in Caenorhabditis elegans Models of Mitochondrial Disease at JoVE.com

Vi er taknemmelige for Anthony Rosner, ph.d., med hans organisatoriske støtte til den tidlige forberedelse af dette projekt, og at Erin Haus for at bidrage til protokol analyse. Dette arbejde blev finansieret af Juliet's Cure FBXL4 Mitochondrial Disease Research Fund, Jaxson Flynt C12ORF65 Research Fund og National Institutes of Health (R01-GM120762, R01-GM120762-08S1, R35-GM134863 og T32-NS007413). Indholdet er udelukkende forfatternes ansvar og repræsenterer ikke nødvendigvis finansieringskildernes eller de nationale sundhedsinstitutters officielle synspunkter.

1. Orm lokomotorisk aktivitetsanalyse i flydende medier på glasrutschebaner ved hjælp af ZebraLab-software
<ol><li>Nematode vækst og håndtering<ol>
<li>Grow C. elegans på Petri plader, der indeholder nematode vækstmedier (NGM) og spredes med Escherichia coli OP50 som fødekilde. Bevar ormkulturen ved 20 °C, som tidligere beskrevet8.</li>
		<li>Synkroniser orme, der udfører et tidet æg, lå52 og studerer orme på det ønskede stadium. I denne pro...

Her opsummerede undersøgelsen detaljerede oplysninger og rationaler til at studere C. elegans neuromuskulær aktivitet på niveau med forskellige resultater, herunder orm thrashing, bevægelse, svælg pumpning, og chemotaxis. Sammenligningen af 16 forskellige aktivitetsanalysemetoder blev udført med hensyn til den relative gennemløb, fordele og begrænsninger af kvantificere nematodeaktiviteter i en enkelt orm eller ormpopulationer i forskellige aldre og eksperimentelle varigheder. Blandt disse blev to nye ti...

Caenorhabiditis elegans er bredt anerkendt som en fremragende model i neurovidenskab baseret på det at have 302 neuroner, der koordinerer alle orm adfærd, herunder parring, fodring, æglægning, afføring, svømning, og bevægelse på solide medier1. Disse hermafroditiske nematoder bruges også i vid udstrækning til at forstå en bred vifte af menneskelige sygdomsmekanismer, muliggjort af dets velkarakteriserede genom og høje homologi af ~ 80% gener mellem C. elegans og mennesker2,3,4. C. elegans har længe været brugt til at afhøre human mitokondriesygdom5,6,7,8,9,10, som er en meget genetisk og fænotype heterogen gruppe af arvelige metaboliske lidelser, der deler nedsat kapacitet til at generere cellulær energi og ofte klinisk til stede med væsentligt nedsat neuromuskulær funktion, motion intolerance og træthed11 ,12,13,14. Med henblik herpå muliggør brugen af C. elegans modeller præklinisk modellering af kvantitative aspekter af dyrs aktivitet og neuromuskulær funktion i forskellige genetiske undertyper af mitokondriesygdom samt deres reaktion på kandidatbehandlinger, der kan forbedre deres neuromuskulære funktion og samlede aktivitet.
Neuromuskulær aktivitet i C. elegans er objektivt målbar ved en række eksperimentelle metoder, herunder både manuelle og halvautomatiske tilgange, der tillader funktionelle analyser i enten faste eller flydende medier (Tabel 1)1,15. Nøjagtig kvantificering af C. elegans aktivitet har vist sig vigtigt at gøre det muligt opdagelser relateret til funktion og udvikling af muskel-og nervesystemet16,17,18. Denne undersøgelse opsummerer og sammenligner eksperimentelle krav, fordele og begrænsninger af 17 forskellige analyser, der kan udføres i forskningslaboratorier for at evaluere neuromuskulær funktion og aktivitet på fire vigtige resultater i C. elegans sygdomme modeller, både ved baseline på en række udviklingsstadier og aldre samt som reaktion på kandidat behandlinger (Tabel 1 ). Undersøgelsen giver faktisk et detaljeret overblik over rækken af tilgængelige eksperimentelle tilgange til at karakterisere satser for C. elegans thrashing (krop bøjninger pr minut), lokomotorisk aktivitet, svælg pumpning, og chemotaxis-i hvert enkelt tilfælde angiver den eksperimentelle og analytiske metode, der anvendes, fordele og begrænsninger af hver metode, udstyr og software er nødvendige for at udføre og analysere hver analyse, og gennemløbskapaciteten for hver metode til at understøtte dens anvendelse til genetiske eller lægemiddelscreeningsformål med høj kapacitet. Gennemløbskapaciteten for hver analyse beskrives som lav, mellem eller høj baseret på den eksperimentelle protokolkompleksitet, herunder ormvedligeholdelse, behandlingstid, brug af enkelt- eller multi-brøndplader og/ eller eksperimentatortid, der er nødvendig for at fuldføre den eksperimentelle indstilling og dataanalyser.
Manuelle analyser af thrashing19, locomotorisk aktivitet20, svælgpumpning17,21og chemotaxis22,23 er veletablerede metoder til evaluering af ormaktivitet, der kræver et stereomikroskop24. Mens måling af thrashing aktivitet orme kræver analyse i flydende medier til at bestemme hyppigheden af kroppen bøjninger per minut, orm lokomotorisk aktivitet kan måles enten på faste medier eller i flydende medier. Manuelle analyser af individuelle ormaktivitet er dog i sagens natur tidskrævende og involverer uundgåelig brugergenereret bias. Automatisering af ormaktivitetsanalyser minimerer brugergenereret bias og kan i høj grad øge eksperimentelle gennemløb25. Videooptagelser af orm thrashing aktivitet i flydende medier kan analyseres ved hjælp af wrMTrck, en ImageJ plugin26. Men de oprindelige eksperimentelle indstillinger, der blev udviklet til wrMTrck begrænset sin nytte, da alt for mange orme i en enkelt flydende dråbe førte til overlapning af orme, der gjorde præcis sporing vanskelig. Mens denne eksperimentelle begrænsning er blevet løst27, wrMTrck metode er ikke i stand til at støtte high-throughput screening.
Der findes en række metoder til at kvantificere orm lokomotorisk aktivitet ved baseline og som reaktion på kandidatbehandlinger i C. elegans mitokondriesygdomsmodeller. Disse omfatter ZebraLab (ViewPoint Life Sciences), Tierpsy Tracker28, wide field-of-view nematode tracking platform (WF-NTP)29, WormMotel, WormWatcher30, WormLab31, Infinity Chip32og WMicrotracker One33 (Tabel 1). Disse metoder muliggør samtidig analyse af bevægelse i flere ormstammer eller tilstande, typisk på multi-brønd plader, og dermed støtte højere gennemløb lægemiddelscreening applikationer. Nogle af disse metoder har unikke overvejelser, der kan begrænse eller forbedre deres generelle nytte, såsom behovet for dyrt udstyr versus open-access software, og varierende lethed at udføre eksperimentelle protokoller. Samlet set er intet enkelt eksperimentelt system eller protokol ideelt egnet til alle C. elegans lokomotoriske aktivitetseksperimenter. Det er snarere vigtigt omhyggeligt at vælge, hvilken metode der passer bedst til den specifikke investigators eksperimentelle mål og krav.
Pharyngeal pumpning repræsenterer et andet vigtigt resultat til at vurdere neuromuskulær aktivitet i C. elegans. C. elegans svælg består af 20 muskelceller, 20 neuroner, og 20 andre celler, der muliggør indtagelse af Escherichia coli (E. coli) i den forreste ende af ormens fordøjelseskanalen34,35,36. Flere manuelle metoder er blevet etableret til at bestemme svælg pumpehastigheder17,21,37,38. De fleste metoder er baseret på brugen af et stereomikroskop og kamera til at visualisere og registrere svælg pumpefrekvens med direkte optælling af den eksperimentelleobservatør 21. Automatiseret pharyngeal pumpehastighed analyse er mulig ved at udføre en ekstracellulær optagelse kaldes elektropharyngeogram (EPG), som giver yderligere oplysninger om varigheden af hver pumpe39. Pharyngeal pumpehastighed analyse er også muligt i et mikrofluidisk system, WormSpa, hvor de enkelte orme er begrænset ikamre 40,41. En kommerciel metode til rådighed for at lette analysen af den svælg pumpehastighed er ScreenChip System (InVivo Biosystems), som måler, visualiserer og analyserer de neuromuskulære aspekter af fodringsadfærd i en enkelt orm, der er immobiliseret i en brugerdefineret chip. Denne svælg pumpe kvantificering tilgang kan bruges til at vurdere både neuronal og fysiologiske reaktioner på narkotika, aldring, og andre faktorer42,43,44,45.
Chemotaxis beskriver bevægelsen af C. elegans som reaktion på et lugtstof placeret væk fra ormene i et defineret område af nematode vækstmedier (NGM) plade. Vurdering af chemotaxis respons giver et integreret mål for orm neuronal og neuromuskulær aktivitet, der kan kvantificeres ved at observere og måle den fysiske afstand, der rejses af orme mod lugtstof i en defineret periode46. Multi-Worm Tracker er en automatisk metode, der kan bruges til at forbedre den eksperimentelle effektivitet at kvantificere den afstand, der rejses af orme mod et attractant eller fra en afvisende47.
Her beskrives den detaljerede protokol for to nye, halvautomatiske metoder, der er etableret til kvantificering af ormaktivitet. Den første tilgang udnytter ZebraLab en kommerciel software, der oprindeligt blev udviklet til at studere svømning aktivitet Danio rerio (zebrafisk), for en ny medium-throughput ansøgning om at kvantificere den samlede lokomotoriske aktivitet i flydende medier af C. elegans baseret på pixel ændringer under bevægelse (Tabel 1, Figur 1). Data output er hurtigt opnået fra et stort antal samtidige forhold og prøver analyseret på et glas dias, selv om denne metode ikke er egnet til en multi-brønd plade format. Den anden tilgang er en ny tilpasning af WormScan metode48,49 ( Figur2), som bruger en flatbed scanner til at skabe et differentieret billede af to sekventielle scanninger, der kan varierende bruges med open source-software til at muliggøre semi-automatiseret kvantitativ analyse af integrerede fysiologiske resultater såsom fecundity og overlevelse. Her blev der udviklet en ny high-throughput tilpasning af WormScan-metoden til at kvantificere orm lokomotorisk aktivitet i flydende medier i populationer af femten larvetrin 4 (L4) orme pr. brønd af en 96-brønd, fladbundsplade. Denne semi-automatiserede og billige WormScan metode kan let tilpasses til high-throughput drug skærme, samt til analyser af forskellige dyr faser og alderen48,49.
Her er protokollen og effekten af at analysere C. elegans locomotorisk aktivitet ved hjælp af både ZebraLab og WormScan semi-automatiserede metoder demonstreret i en veletableret C. elegans model for mitokondrie kompleks I sygdom, gas-1(fc21). gas-1 (K09A9.5 gen) er en ortholog af human NDUFS2 (NADH: ubiquinon oxidoreductase kerne (jern-svovlprotein) subunit 2) (Figur 3). Den mutante si C. elegans gas-1(fc21) bærer en homoseksuøs p.R290K missense mutation i den menneskelige ortholog af NDUFS250, forårsager signifikant nedsat fecundity og levetid, nedsat respiratorisk kædeoxidativ fosforylering (OXPHOS) kapacitet51, samt nedsat mitokondrie masse og membran potentiale med øget oxidativ stress5,8 . På trods af den veletablerede brug i løbet af de sidste to årtier til at studere mitokondriesygdom blev lokomotorisk aktivitet af gas-1(fc21) mutanter ikke tidligere rapporteret. Her blev ZebraLab og WormScan metoder anvendt til selvstændigt at kvantificere lokomotorisk aktivitet af gas-1(fc21) i forhold til vilde-type (WT, N2 Bristol) orme, både som en måde at validere metoder samt at demonstrere deres komparative nytte og effektivitet af de eksperimentelle protokoller og informatik analyser. ZebraLab software tilladt hurtig kvantificering af flere samtidige betingelser for orm locomotor aktivitet i C. elegans mitokondrie sygdom modeller, med potentiel anvendelse for målrettet lægemiddelscreening eller validering undersøgelser. WormScan analyse, især, er velegnet til let at muliggøre høj-throughput lægemiddel skærme af sammensatte biblioteker og prioritere fører, der forbedrer dyret neuromuskulære funktion og lokomotorisk aktivitet i prækliniske C. elegans modeller af primær mitokondriesygdom.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>C. elegans wild isolate</td>
			<td>&#160;Caenorhabditis Genetics Center (CGC)</td>
			<td>N2 Bristol</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Camera</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>DP73</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>gas-1(fc-21)</td>
			<td>CGC</td>
			<td>CW152</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope slides</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>4951PLUS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nematode Growth Medium (NGM)</td>
			<td>Research Products International Corp.</td>
			<td>N81800-1000.0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OP50 Escherichia coli</td>
			<td>CGC</td>
			<td></td>
			<td>Uracil auxotroph E. coli strain</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dishes (60 mm)</td>
			<td>&#160;VWR international</td>
			<td>25373-085</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>S. Basal</td>
			<td>VWR 5.85 g NaCl, 1 g K2 HPO4, 6 g KH2PO4, and 5 mg cholesterol, in 1 l H2O</td>
			<td>VWR 101175-162, 103467-156, EM1.09828.1000, 97061-660</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scanner</td>
			<td>EPSON</td>
			<td>V800</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereomicroscope</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>MVX10 microscope</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96-well flat bottom</td>
			<td>&#160;VWR international</td>
			<td>29442-056</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>WormScan software</td>
			<td>Mathew et al. 45</td>
			<td>S1 Standalone Java platform</td>
			<td>Software for automation of difference image of scanned plates</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ZebraLab software</td>
			<td>ViewPoint</td>
			<td></td>
			<td>Software for automated quantization and tracking of zebrafish behavior, designed by ViewPoint (http://www.viewpoint.fr/en/p/software/zebralab-zebrafish-behavior-screening) and here applied to C. elegans. This system is applicable for high-throughput behavioral analysis</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

comparative analysis of experimental methods to quantify animal activity in caenorhabditis elegans models of mitochondrial disease

Caenorhabditis elegans er bredt anerkendt for sin centrale nytte som en translationel dyremodel til effektivt at afhøre mekanismer og behandlinger af forskellige menneskelige sygdomme. Orme er særligt velegnede til højgennemsigtige genetiske og lægemiddelskærme for at få dybere indsigt i terapeutiske mål og terapier ved at udnytte deres hurtige udviklingscyklus, stor brødstørrelse, kort levetid, mikroskopisk gennemsigtighed, lave vedligeholdelsesomkostninger, robust pakke af genomiske værktøjer, mutantlagre og eksperimentelle metoder til at afhøre både in vivo og ex vivo fysiologi. Orm lokomotorisk aktivitet repræsenterer en særlig relevant fænotype, der ofte forringes i mitokondriesygdom, som er meget heterogen i årsager og manifestationer, men kollektivt deler en nedsat evne til at producere cellulær energi. Mens en suite af forskellige metoder kan bruges til at afhøre orm adfærd, disse varierer meget i eksperimentelle omkostninger, kompleksitet, og nytte for genomiske eller stof high-throughput skærme. Her blev den relative gennemløb, fordele og begrænsninger af 16 forskellige aktivitetsanalysemetoder sammenlignet, der kvantificerer nematode-bevægelse, thrashing, svælgpumpning og / eller chemotaxis i enkelte orme eller ormpopulationer af C. elegans på forskellige stadier, aldre og eksperimentelle varigheder. Detaljerede protokoller blev demonstreret for to halvautomatiske metoder til at kvantificere nematode lokomotorisk aktivitet, der repræsenterer nye anvendelser af tilgængelige softwareværktøjer, nemlig ZebraLab (en medium-throughput tilgang) og WormScan (en høj-throughput tilgang). Data fra anvendelsen af disse metoder viste lignende grader af reduceret animalsk aktivitet forekom på L4 larvestadiet, og skred frem i dag 1 voksne, i mitokondrie kompleks I sygdom (gas-1(fc21)) mutant orme i forhold til vilde-type (N2 Bristol) C. elegans. Disse data validerer nytten for disse nye applikationer ved hjælp af ZebraLab eller WormScan softwareværktøjer til at kvantificere orm lokomotorisk aktivitet effektivt og objektivt, med variabel kapacitet til at støtte high-throughput lægemiddel screening på orm adfærd i prækliniske dyremodeller af mitokondriesygdom.

Analyse af C. elegans lokomotorisk aktivitet i de flydende medier kunne nemt fange en integreret fænotype af mitokondrie sygdom orm modeller, der ikke kan være let kvantificerbare på faste medier. ZebraLab blev brugt til at kvantificere lokomotorisk aktivitet af det veletablerede mitokondriekompleks I sygdom gas-1(fc21)stamme i forhold til WTworms i flydende medier på L4 larvestadiet. Aktiviteten af 5 orme i et enkelt flydende fald blev registreret over 1 min, med i alt 19 videoer (tekniske...

Watch this Scientific Journal Video about Comparative Analysis of Experimental Methods to Quantify Animal Activity in Caenorhabditis elegans Models of Mitochondrial Disease at JoVE.com

Comparative Analysis of Experimental Methods to Quantify Animal Activity in Caenorhabditis elegans Models of Mitochondrial Disease

Denne undersøgelse præsenterer protokoller for to semi-automatiserede lokomotorisk aktivitet analyse tilgange i C. elegans kompleks I sygdom gas-1(FC21) orme, nemlig ZebraLab (en medium-throughput assay) og WormScan (en high-throughput assay) og give sammenlignende analyse blandt en bred vifte af forskningsmetoder til at kvantificere nematode adfærd og integreret neuromuskulær funktion.

Sammenlignende analyse af eksperimentelle metoder til kvantificering af dyrs aktivitet i Caenorhabditis elegans Modeller af Mitokondriesygdom

Caenorhabditis elegans is widely recognized for its central utility as a translational animal model to efficiently interrogate mechanisms and therapies of ...

Denne protokol bruger to forskellige semiautomaterede assays til hurtigt kvantificere C.elegans lokomotorisk aktivitet i flydende medium, og har potentiale til at blive anvendt til lægemiddelscreening i C.elegans sygdom modeller. De vigtigste fordele ved disse to teknikker er deres brugervenlighed og nem reproducerbarhed. Begge teknikker har potentiale til at evaluere lægemiddeleffekter på orm adfærd med variabel gennemløb.Disse motilitet assays er nyttige til evaluering af locomotorisk aktivitet af C.elegans mitokondrie sygdom modeller, hvor neuromuskulære system af dyrene er nedsat. For at analysere C.elegans lokomotorisk aktivitet i flydende medium på glas dias efter synkronisering kontrol i mutant orme stammer på NGM plader med og uden lægemiddel behandlinger af interesse for L4 fase, skal du bruge en orm pick og et stereomikroskop til at plukke fem orme per stamme og tilstand i individuelle 20 mikroliter dråber S.basal opløsning på et glas dias. Tilføj orme fra samme eksperimentelle tilstand fra forskellige NGM-plader til flere dråber på samme dias for at opnå flere tekniske replikeringer.Når alle ormene er blevet indsamlet, skal dyrene akklimatificere på diaset i et minut ved stuetemperatur, før du registrerer ormene svømmeaktivitet i hvert fald i et minut ved 15 billeder i sekundet pr. dråbe. For at analysere den optagede C.elegans lokomotoriske aktivitet ved hjælp af ZebraLab-software skal du bruge ZEBRALAB AVI-indstillingen til at uploade videoer til softwaren. Klik på indstillingen Kvantisering med AVI-filer.Hvis du vil oprette en ny protokol, skal du vælge Parametre, Protokolparametre og Klokkeslæt og angive eksperimentvarigheden til et minut. Vælg Ingen tidsplacering, og fjern markeringen af integrationsperioden i henhold til det ønskede dataoutput, og vælg Filer og Åbn en film for at overføre hver enkelt tidligere optaget videofil. Hvis du vil opbygge et enkelt detektionsområde, skal du bruge cirkelværktøjet til at oprette et område omkring hele væskedråben, hvor ormene er placeret.Aktiviteten af alle ormene i det valgte område registreres. Hvis du vil angive den afstand, der skal kalibreres, skal du tegne en vandret linje fra venstre til højre for videoområdet og vælge Kalibrering, Tegning og Anvend på gruppe. Hvis du vil gøre det muligt at analysere registreringen af alle de forskellige C.elegans-ormestammer, skal du fjerne markeringen af ikonet Område og justere detektionsfølsomheden i aktivitetstærsklen.Hvis du vil visualisere de spor, som dyrene har lavet, mens aktivitetsanalysen er i gang, skal du indstille displayskalaen til 70 og vælge Anvend på gruppe. Hvis du vil analysere videoerne, skal du klikke på Afspil og vælge Eksperimentér og Udfør for at angive et filnavn til videoen. Når du har gemt, vises et vindue, hvor du bliver spurgt, om videoen skal analyseres med den maksimale computerhastighed.Klik på Ja. Det kørende eksperiment åbnes. Klik på Start.Når optagelsesanalysen er fuldført, skal du klikke på Eksperimentér og stoppe for at gemme den aktivitet, der er analyseret i dropleten, i et regneark. For at analysere C.elegans lokomotorisk aktivitet i flydende medium i et 96-brønds pladeformat, når ormene nåede L4-stadiet, tilsættes 50 mikroliter på 2% vægt pr. volumen af E.coli OP50 og S.basal medium til hver brønd af en klar 96-godt flad bund mikroplade. Brug stereomikroskopet til manuelt at vælge 15 synkroniserede orme pr. brønd af 96-brøndspladen og lad ormene akklimatere i 20 minutter.Ved afslutningen af akklimatationsperioden skal du bruge en standard flatbedscanner til at scanne hver mikroplade to gange med mindre end 10 sekunder mellem scanninger For at analysere scanningerne skal du bruge open source-software til at justere de to sekventielle scanninger og erhverve pixelændringsdata mellem de to billeder og den relative ormscanningsscore for at bestemme ændringerne i lokomotorisk respons baseret på den lysintensitet, der produceres af scanneren, når de er indstillet til en pixel tærskel på fem. I denne analyse af C.elegans lokomotorisk aktivitet i en enkelt dråbe flydende medium, mitokondrie kompleks I sygdom orme vist en betydelig 38% fald i deres lokomotoriske aktivitet på L4 fase i forhold til vilde-type orme. Tilsvarende orme scanning analyse af de samme populationer viste en betydelig reduktion i lokomotorisk aktivitet for L4 fase sygdom model orme i forhold til N2 Bristol vilde-type orme.Dette lokomotiv aktivitetstab blev også observeret i voksen dag et stadium mitokondrie kompleks I sygdom orme som vurderet ved orm scanning analyse. Det er vigtigt at huske at bruge det korrekte antal orme, når du opretter hver analyse. Efter denne procedure udfører vores laboratorium ofte en lægemiddelscreening.Disse to teknikker anvendes i vores laboratorium til evaluering af virkningerne af lægemidler af interesse på ormaktivitet i prækliniske dyremodeller af mitokondriesygdom.

Research

JoVE Journal

Behavior

Comparative Analysis of Experimental Methods to Quantify Animal Activity in Caenorhabditis elegans Models of Mitochondrial Disease

Assessment of Sensorimotor Function in Mouse Models of Parkinson's Disease

Vurdering af sensorimotorisk Funktion i musemodeller af Parkinsons sygdom

Sensitive and  reliable behavioral outcome measures are essential to the evaluation of  potential therapeutic treatments in preclinical trials for many  ...

Nest Building as an Indicator of Health and Welfare in Laboratory Mice

The minimization and alleviation of  suffering has moral and scientific implications. In order to mitigate this  negative experience one must be able to ...

Measurement of Fronto-limbic Activity Using an Emotional Oddball Task in Children with Familial High Risk for Schizophrenia

Måling af Fronto-limbiske aktivitet Brug af en følelsesmæssig Oddball Opgave i børn med Familiær høj risiko for skizofreni

Adolescence is a critical developmental period where the early symptoms of schizophrenia frequently emerge. First-degree relatives of people with ...

A Computational Method to Quantify Fly Circadian Activity

En beregningsudstyr til at kvantificere flyve døgnrytmen aktivitet

In most animals and plants, circadian clocks orchestrate behavioral and molecular processes and synchronize them to the daily light-dark cycle. ...

Systematic Assessment of Well-Being in Mice for Procedures Using General Anesthesia

Systematisk vurdering af velvære i mus til procedurer ved hjælp af generel anæstesi

In keeping with the 3R Principle (Replacement, Reduction, Refinement) developed by Russel and Burch, scientific research should use alternatives to animal ...

Biomechanical Analysis Methods to Assess Professional Badminton Players' Lunge Performance

Biomekaniske analysemetoder til at vurdere professionelle badminton Players ' lunge performance

Under the condition of simulating a badminton court in the laboratory, this study used the injury mechanism model to analyze the maximal right lunge ...

Swimming Induced Paralysis to Assess Dopamine Signaling in Caenorhabditis elegans

Swimming Induced Paralysis to Assess Dopamine Signaling in Caenorhabditis elegans

Svømning induceret lammelse at vurdere dopamin signalering i Caenorhabditis elegans

The swimming assay described in this protocol is a valid tool to identify proteins regulating the dopaminergic synapses. Similar to mammals, dopamine (DA) ...

Use of a Wireless Video-EEG System to Monitor Epileptiform Discharges Following Lateral Fluid-Percussion Induced Traumatic Brain Injury

Brug af et trådløst video-EEG-system til overvågning af Epileptiform udledninger efter lateral Fluid-percussion induceret traumatisk hjerneskade

The lateral fluid percussion injury (FPI) model is well established and has been used to study TBI and post-traumatic epilepsy (PTE). However, ...

Comparative Lesions Analysis Through a Targeted Sequencing Approach

Sammenlignende læsioner analyse gennem en målrettet sekvensering tilgang

Assessing intra-tumoral heterogeneity (ITH) is of paramount importance to anticipate failure of targeted therapies and design accordingly effective ...

Low-Cost Gait Analysis for Behavioral Phenotyping of Mouse Models of Neuromuscular Disease

Lavpris gangart analyse for adfærdsmæssige Phenotyping af musemodeller af neuromuskulær sygdom

Measurement of animal locomotion is a common behavioral tool used to describe the phenotype of a given disease, injury, or drug model. The low-cost method ...