Name: comparative analysis of experimental methods to quantify animal activity in caenorhabditis elegans models of mitochondrial disease
Uploaded: 2021-04-04T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Comparative Analysis of Experimental Methods to Quantify Animal Activity in Caenorhabditis elegans Models of Mitochondrial Disease at JoVE.com

Vi er takknemlige til Anthony Rosner, PhD., med hans organisatoriske støtte til den tidlige utarbeidelsen av dette prosjektet, og til Erin Haus for å bidra til protokollanalyse. Dette arbeidet ble finansiert av Juliet's Cure FBXL4 Mitochondrial Disease Research Fund, Jaxson Flynt C12ORF65 Research Fund og National Institutes of Health (R01-GM120762, R01-GM120762-08S1, R35-GM134863 og T32-NS007413). Innholdet er utelukkende forfatternes ansvar og representerer ikke nødvendigvis de offisielle synspunktene til funderne eller National Institutes of Health.

1. Orm lokomotorisk aktivitetsanalyse i flytende medier på glasssklier ved hjelp av ZebraLab programvare
<ol><li>Nematode vekst og håndtering<ol>
<li>Vokse C. elegans på Petri plater som inneholder nematode vekstmedier (NGM) og spred med Escherichia coli OP50 som matkilde. Opprettholde ormekultur ved 20 °C, som tidligere beskrevet8.</li>
		<li>Synkroniser ormer som utfører et tidsbelagt egg lå52 og studerer ormer på ønsket stadium. I denne protok...

Her oppsummerte studien detaljert informasjon og begrunnelser for å studere C. elegans nevromuskulær aktivitet på nivået av forskjellige resultater, inkludert orm thrashing, bevegelse, faryngeal pumping og chemotaxis. Sammenligningen av 16 forskjellige aktivitetsanalysemetoder ble utført når det gjelder relativ gjennomstrømning, fordeler og begrensninger ved kvantifisere nematodeaktiviteter i en enkelt orm- eller ormpopulasjoner i forskjellige aldre og eksperimentelle varigheter. Blant disse ble to nye ti...

Caenorhabiditis elegans er allment anerkjent som en fremragende modell innen nevrovitenskap basert på at den har 302 nevroner som koordinerer all ormadferd, inkludert parring, fôring, egglegging, avføring, svømming og bevegelse på faste medier1. Disse hermafrodittiske nematodene er også mye brukt til å forstå et bredt spekter av menneskelige sykdomsmekanismer, muliggjort av sitt godt karakteriserte genom og høye homologi av ~ 80% gener mellom C. elegans og mennesker2,3,4. C. elegans har lenge vært brukt til å forhøre menneskelig mitokondriesykdom5,6,7,8,9,10, som er en svært genetisk og fenotypisk heterogen gruppe arvelige metabolske forstyrrelser som deler nedsatt kapasitet til å generere cellulær energi og ofte klinisk tilstede med betydelig nedsatt nevromuskulær funksjon, treningsintoleranse og tretthet11 ,12,13,14. For dette formål muliggjør bruk av C. elegans-modeller preklinisk modellering av kvantitative aspekter av dyreaktivitet og nevromuskulær funksjon i forskjellige genetiske undertyper av mitokondriesykdom, samt deres respons på kandidatterapier som kan forbedre deres nevromuskulære funksjon og generell aktivitet.
Nevromuskulær aktivitet i C. elegans er objektivt målbar ved en rekke eksperimentelle metoder, inkludert både manuelle og halvautomatiske tilnærminger som tillater funksjonelle analyser i enten faste eller flytende medier (Tabell 1)1,15. Nøyaktig kvantitet av C. elegans aktivitet har vist seg viktig for å muliggjøre funn knyttet til funksjon og utvikling av muskel- og nervesystemet16,17,18. Denne studien oppsummerer og sammenligner eksperimentelle krav, fordeler og begrensninger ved 17 ulike analyser som kan utføres i forskningslaboratorier for å evaluere nevromuskulær funksjon og aktivitet på fire nøkkelutfall i C. elegans sykdomsmodeller, både ved baseline ved en rekke utviklingsstadier og aldre, samt som svar på kandidatterapier ( Tabell 1 elegans sykdomsmodeller, både ved baseline i en rekke utviklingsstadier og aldre, samt som svar på kandidatterapier (Tabell 1 ). Faktisk gir studien en detaljert oversikt over utvalget av tilgjengelige eksperimentelle tilnærminger for å karakterisere rater av C. elegans thrashing (kroppsbøyninger per minutt), lokomotorisk aktivitet, faryngeal pumping og chemotaxis-i hvert tilfelle som spesifiserer eksperimentell og analytisk metodikk som brukes, fordelene og begrensningene ved hver metode, utstyret og programvaren som trengs for å utføre og analysere hver analyse, og gjennomstrømningskapasiteten til hver metode for å støtte bruken til genetiske eller narkotikascreeningsformål med høy gjennomstrømning. Gjennomstrømningskapasiteten til hver analyse beskrives som lav, middels eller høy basert på den eksperimentelle protokollkompleksiteten, inkludert ormvedlikehold, behandlingstid, bruk av enkeltplater eller flerbrønnplater og/eller eksperimenteringstid som trengs for å fullføre eksperimentelle innstillings- og dataanalyser.
Manuelle analyser av thrashing19, lokomotorisk aktivitet20, farynngeal pumping17,21og chemotaxis22,23 er veletablerte metoder for å evaluere ormaktivitet som krever et stereomikroskop24. Mens måling av thrashing aktivitet av ormer krever analyse i flytende medier for å bestemme frekvensen av kroppsbøyninger per minutt, orm locomotor aktivitet kan måles enten på faste medier eller i flytende medier. Manuelle analyser av individuell ormaktivitet er imidlertid iboende tidkrevende og innebærer uunngåelig brukergenerert skjevhet. Automatisering av ormaktivitetsanalyser minimerer brukergenererte skjevheter og kan i stor grad øke eksperimentell gjennomstrømning25. Videoopptak av orm thrashing aktivitet i flytende medier kan analyseres ved hjelp av wrMTrck, en ImageJ plugin26. Imidlertid begrenset de opprinnelige eksperimentelle innstillingene som ble utviklet for wrMTrck sitt verktøy, siden for mange ormer i en enkelt væskedråpe førte til overlapping av ormer som gjorde nøyaktig sporing vanskelig. Selv om denne eksperimentelle begrensningen er løst27, kan ikke wrMTrck -metoden støtte screening med høy gjennomstrømning.
Det finnes en rekke metoder for å kvantifisere orm lokomotorisk aktivitet ved baseline og som svar på kandidatbehandlinger i C. elegans mitokondrie sykdomsmodeller. Disse inkluderer ZebraLab (ViewPoint Life Sciences), Tierpsy Tracker28, wide field-of-view nematode tracking platform (WF-NTP)29, WormMotel, WormWatcher30, WormLab31, Infinity Chip32og WMicrotracker One33 (Tabell 1). Disse metodene muliggjør samtidig analyse av bevegelse i flere ormstammer eller forhold, vanligvis på multi-brønnplater, og støtter dermed applikasjoner for narkotikascreening med høyere gjennomstrømning. Noen av disse metodene har unike hensyn som kan begrense eller forbedre deres generelle verktøy, for eksempel behovet for dyrt utstyr kontra programvare med åpen tilgang, og varierende enkel utførelse av eksperimentelle protokoller. Totalt sett er ingen enkelt eksperimentelt system eller protokoll ideelt egnet for alle C. elegans lokomotoriske aktivitetseksperimenter. Snarere er det viktig å nøye velge hvilken metode som passer best til den spesifikke undersøkerens eksperimentelle mål og krav.
Pharyngeal pumping representerer et annet viktig resultat for å vurdere nevromuskulær aktivitet i C. elegans. C. elegans pharynx består av 20 muskelceller, 20 nevroner og 20 andre celler som muliggjør inntak av Escherichia coli (E. coli) i den fremre enden av ormens fordøyelseskanal34,35,36. Det er etablert flere manuelle metoder for å bestemme pharyngeal pumpehastigheter17,21,37,38. De fleste metoder er basert på bruk av et stereomikroskop og kamera for å visualisere og registrere faryngeal pumpefrekvens med direkte telling av den eksperimentelle observatøren21. Automatisert pharyngeal pumpehastighetsanalyse er mulig ved å utføre en ekstracellulær registrering kalt elektropharyngeogram (EPG), som gir ytterligere informasjon om varigheten av hver pumpe39. Pharyngeal pumpehastighetsanalyse er også mulig i et mikrofluidisk system, WormSpa, hvor individuelle ormer er begrenset i kamre40,41. En kommersiell metode tilgjengelig for å lette analysen av pharyngeal pumpehastigheten er ScreenChip System (InVivo Biosystems), som måler, visualiserer og analyserer de nevromuskulære aspektene ved fôringsadferd i en enkelt orm som er immobilisert i en tilpasset brikke. Denne pharyngeal pumpende kvantumstilnærmingsmetoden kan brukes til å vurdere både nevronale og fysiologiske responser på narkotika, aldring og andre faktorer42,43,44,45.
Chemotaxis beskriver bevegelsen av C. elegans som svar på en luktstoff plassert vekk fra ormene i et definert område av nematode vekstmediene (NGM) plate. Vurdering av chemotaxis-responsen gir et integrert mål på orm nevronal og nevromuskulær aktivitet som kan kvantifiseres ved å observere og måle den fysiske avstanden som er reist av ormer mot luktstoffet i en definert tidsperiode46. Multi-Worm Tracker er en automatisk metode som kan brukes til å forbedre den eksperimentelle effektiviteten ved å kvantifisere avstanden som er reist av ormer mot en tiltrekningskraft eller fra en avstøtende47.
Her beskrives den detaljerte protokollen for to nye, halvautomatiske metoder etablert for kvantifisering av ormaktivitet. Den første tilnærmingen benytter ZebraLab en kommersiell programvare som opprinnelig ble utviklet for å studere svømmeaktivitet av Danio rerio (sebrafisk), for en ny medium-gjennomstrømningsapplikasjon for å kvantifisere generell lokomotorisk aktivitet i flytende medier av C. elegans basert på pikselendringer under bevegelse (Tabell 1, figur 1). Datautgang hentes raskt fra et stort antall samtidige forhold og prøver analysert på et glasssklie, selv om denne metoden ikke er egnet for et multi-brønns plateformat. Den andre tilnærmingen er en ny tilpasning av WormScan-metoden48,49 ( figur2), som bruker en planskanner til å lage et differensialbilde av to sekvensielle skanninger som kan brukes med åpen kildekode-programvare for å muliggjøre halvautomatisk kvantitativ analyse av integrerte fysiologiske resultater som fecundity og overlevelse. Her ble det utviklet en ny høygjennomstrømningstilpasning av WormScan-metoden for å kvantifisere orm lokomotorisk aktivitet i flytende medier i populasjoner av femten larvaltrinn 4 (L4) ormer per brønn av en 96-brønns, flatbunnplate. Denne halvautomatiske og rimelige WormScan-metodikken kan lett tilpasses høygjennomstrømningsmedisinske skjermer, samt til analyser av ulike dyrestadier og alder48,49.
Her demonstreres protokollen og effekten av å analysere C. elegans lokomotorisk aktivitet ved hjelp av både ZebraLab og WormScan halvautomatiske metoder i en veletablert C. elegans-modell for mitokondriekompleks I sykdom, gass-1(fc21). gas-1 (K09A9,5 gen) er en ortolog av humant NDUFS2 (NADH: ubiquinone oxidoreductase core (jern-svovelprotein) subenhet 2) (Figur 3). C. elegans gas-1(fc21) mutantstamme bærer en homozygot p.R290K missense mutasjon i den menneskelige ortologen av NDUFS250, forårsaker betydelig redusert fecundity og levetid, nedsatt respiratorisk kjede oksidativ fosforylering (OXPHOS) kapasitet51, samt redusert mitokondriemasse og membranpotensial med økt oksidativ stress5,8 , . Til tross for sin veletablerte bruk de siste to tiårene for å studere mitokondriesykdom, ble lokomotorisk aktivitet av gass-1(fc21) mutanter ikke tidligere rapportert. Her ble ZebraLab- og WormScan-metoder brukt til uavhengig kvantifisere den lokomotoriske aktiviteten til gass-1(fc21) sammenlignet med wild-type (WT, N2 Bristol) ormer, både som en måte å validere metodene på, samt å demonstrere deres komparative nytte og effektivitet av eksperimentelle protokoller og informatikkanalyser. ZebraLab programvare tillot rask kvantitet av flere samtidige forhold av orm locomotorisk aktivitet i C. elegans mitokondrie sykdom modeller, med potensiell anvendelse for målrettet narkotika screening eller validering studier. Spesielt WormScan-analyse er godt egnet til å enkelt muliggjøre høygjennomstrømningsmedisinske skjermer av sammensatte biblioteker og prioritere ledninger som forbedrer dyrets nevromuskulære funksjon og lokomotorisk aktivitet i prekliniske C. elegans-modeller av primær mitokondriesykdom.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>C. elegans wild isolate</td>
			<td>&#160;Caenorhabditis Genetics Center (CGC)</td>
			<td>N2 Bristol</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Camera</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>DP73</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>gas-1(fc-21)</td>
			<td>CGC</td>
			<td>CW152</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope slides</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>4951PLUS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nematode Growth Medium (NGM)</td>
			<td>Research Products International Corp.</td>
			<td>N81800-1000.0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OP50 Escherichia coli</td>
			<td>CGC</td>
			<td></td>
			<td>Uracil auxotroph E. coli strain</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dishes (60 mm)</td>
			<td>&#160;VWR international</td>
			<td>25373-085</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>S. Basal</td>
			<td>VWR 5.85 g NaCl, 1 g K2 HPO4, 6 g KH2PO4, and 5 mg cholesterol, in 1 l H2O</td>
			<td>VWR 101175-162, 103467-156, EM1.09828.1000, 97061-660</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scanner</td>
			<td>EPSON</td>
			<td>V800</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereomicroscope</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>MVX10 microscope</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96-well flat bottom</td>
			<td>&#160;VWR international</td>
			<td>29442-056</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>WormScan software</td>
			<td>Mathew et al. 45</td>
			<td>S1 Standalone Java platform</td>
			<td>Software for automation of difference image of scanned plates</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ZebraLab software</td>
			<td>ViewPoint</td>
			<td></td>
			<td>Software for automated quantization and tracking of zebrafish behavior, designed by ViewPoint (http://www.viewpoint.fr/en/p/software/zebralab-zebrafish-behavior-screening) and here applied to C. elegans. This system is applicable for high-throughput behavioral analysis</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

comparative analysis of experimental methods to quantify animal activity in caenorhabditis elegans models of mitochondrial disease

Caenorhabditis elegans er allment anerkjent for sin sentrale nytte som en translasjonell dyremodell for effektivt å forhøre mekanismer og terapier av ulike menneskelige sykdommer. Ormer er spesielt godt egnet for genetiske skjermer og legemiddelskjermer med høy gjennomstrømning for å få dypere innsikt i terapeutiske mål og terapier ved å utnytte deres raske utviklingssyklus, stor brødstørrelse, kort levetid, mikroskopisk transparens, lave vedlikeholdskostnader, robust pakke med genomiske verktøy, mutante depoter og eksperimentelle metoder for å forhøre både in vivo og ex vivo fysiologi. Orm lokomotorisk aktivitet representerer en spesielt relevant fenotype som ofte svekkes ved mitokondriesykdom, som er svært heterogen i årsaker og manifestasjoner, men som samlet deler en svekket kapasitet til å produsere cellulær energi. Mens en pakke med forskjellige metoder kan brukes til å forhøre ormadferd, varierer disse sterkt i eksperimentelle kostnader, kompleksitet og verktøy for genomiske eller narkotika high-throughput skjermer. Her ble den relative gjennomstrømningen, fordelene og begrensningene til 16 forskjellige aktivitetsanalysemetoder sammenlignet som kvantifiserer nematode-bevegelse, thrashing, faryngeal pumping og / eller chemotaxis i enkelt ormer eller ormpopulasjoner av C. elegans på forskjellige stadier, aldre og eksperimentelle varigheter. Detaljerte protokoller ble demonstrert for to halvautomatiske metoder for å kvantifisere nematode lokomotorisk aktivitet som representerer nye anvendelser av tilgjengelige programvareverktøy, nemlig ZebraLab (en middels gjennomstrømningstilnærming) og WormScan (en tilnærming med høy gjennomstrømning). Data fra å anvende disse metodene viste lignende grader av redusert dyreaktivitet på L4 larvalstadiet, og utviklet seg på dag 1 voksne, i mitokondriekompleks I sykdom (gass-1(fc21)mutante ormer i forhold til wild-type (N2 Bristol) C. elegans. Disse dataene validerer verktøyet for disse nye applikasjonene ved bruk av ZebraLab- eller WormScan-programvareverktøy for å kvantifisere orm lokomotorisk aktivitet effektivt og objektivt, med variabel kapasitet til å støtte høygjennomstrømningsmedisin screening på ormadferd i prekliniske dyremodeller av mitokondriesykdom.

Analyse av C. elegans lokomotorisk aktivitet i flytende medier kan lett fange en integrert fenotype av mitokondriesykdom ormmodeller som kanskje ikke er lett kvantifiserbare på faste medier. ZebraLab ble brukt til å kvantifisere lokomotorisk aktivitet av det veletablerte mitokondriekomplekset I sykdom gass-1(fc21) stamme i forhold til WTworms i flytende medier på L4 larvalstadiet. Aktiviteten til 5 ormer i en enkelt væskedråpe ble registrert over 1 min, med totalt 19 videoer (tekniske repl...

Watch this Scientific Journal Video about Comparative Analysis of Experimental Methods to Quantify Animal Activity in Caenorhabditis elegans Models of Mitochondrial Disease at JoVE.com

Comparative Analysis of Experimental Methods to Quantify Animal Activity in Caenorhabditis elegans Models of Mitochondrial Disease

Denne studien presenterer protokoller for to halvautomatiske lokomotoriske aktivitetsanalyser i C. elegans kompleks I sykdom gass-1(fc21) ormer, nemlig ZebraLab (en middels gjennomstrømningsanalyse) og WormScan (en høy gjennomstrømningsanalyse) og gir komparativ analyse blant et bredt spekter av forskningsmetoder for å kvantifisere nematodeadferd og integrert nevromuskulær funksjon.

Komparativ analyse av eksperimentelle metoder for å kvantifisere dyreaktivitet i Caenorhabditis elegans Modeller av mitokondriesykdom

Caenorhabditis elegans is widely recognized for its central utility as a translational animal model to efficiently interrogate mechanisms and therapies of ...

Denne protokollen bruker to forskjellige halvautomaterte analyser for raskt å kvantifisere C.elegans lokomotorisk aktivitet i flytende medium, og har potensial til å bli brukt til narkotikascreening i C.elegans sykdomsmodeller. De viktigste fordelene ved disse to teknikkene er deres brukervennlighet og brukervennlighet. Begge teknikkene har potensial til å evaluere legemiddeleffekter på ormadferd med variabel gjennomstrømning.Disse motilitetsanalysene er nyttige for å evaluere den lokomotoriske aktiviteten til C.elegans mitokondrie sykdomsmodeller der dyrenes nevromuskulære system er svekket. For å analysere C.elegans lokomotorisk aktivitet i flytende medium på glasssklier etter synkronisering av kontroll i mutante ormer stammer på NGM-plater med og uten legemiddelbehandlinger av interesse for L4-scenen, bruk et ormplukk og et stereomikroskop for å plukke fem ormer per belastning og tilstand i individuelle 20 mikroliterdråper av S.basal løsning på en glasssklie. Legg til ormer fra samme eksperimentelle tilstand fra forskjellige NGM-plater til flere dråper på samme lysbilde for å få flere tekniske replikeringer.Når alle ormene er samlet inn, la dyrene akklimatisere seg på lysbildet i ett minutt ved romtemperatur før du registrerer ormenes svømmeaktivitet i hvert fall i ett minutt ved 15 bilder per sekund per dråpe. For å analysere den innspilte C.elegans lokomotoriske aktiviteten ved hjelp av ZebraLab-programvaren, bruk ZEBRALAB AVI-alternativet for å laste opp videoer til programvaren. Klikk alternativet Kvantisering med AVI-filer.Hvis du vil opprette en ny protokoll, velger du Parametere, Protokollparametere og Klokkeslett og setter eksperimentvarigheten til ett minutt. Velg Ingen tidsskuff og fjern merket for Integrasjonsperiode i henhold til ønsket datautgang, og velg Fil og åpne en film for å laste opp hver enkelt tidligere innspilte videofil. Hvis du vil bygge ett enkelt deteksjonsområde, bruker du sirkelverktøyet til å opprette et område rundt hele væskedråpen der ormene er plassert.Aktiviteten til alle ormene i det valgte området vil bli oppdaget. Hvis du vil angi avstanden som skal kalibreres, tegner du en vannrett linje fra venstre til høyre for videoområdet og velger Kalibrering, Tegn og Bruk på gruppe. Hvis du vil tillate at gjenkjenning av alle de forskjellige C.elegans-ormstammene analyseres, fjerner du merket for Område-ikonet og justerer deteksjonsfølsomheten i aktivitetsterskelen.Hvis du vil visualisere sporene som dyrene har laget mens aktivitetsanalysen pågår, setter du visningsskalaen til 70 og velger Bruk på gruppe. Hvis du vil analysere videoene, klikker du Spill av og velger Eksperimenter og Kjør for å skrive inn et filnavn for videoen. Etter lagring vises et vindu som spør om videoen skal analyseres med maksimal datamaskinhastighet.Klikk Ja. Det kjørende eksperimentvinduet åpnes. Klikk Start.Når innspillingsanalysen er fullført, klikker du Eksperimenter og stopper for å lagre aktiviteten som analyseres i slipplet i et regneark. For å analysere C.elegans lokomotorisk aktivitet i flytende medium i et 96-brønns plateformat, når ormene nådde L4-trinnet, tilsett 50 mikroliter 2% vekt per volum E.coli OP50 og S.basal medium til hver brønn av en klar 96-brønns flat bunnmikroplate. Bruk stereomikroskopet til manuelt å velge 15 synkroniserte ormer per brønn på 96-brønnsplaten og la ormene akklimatisere seg i 20 minutter.På slutten av akklimatiseringsperioden bruker du en standard planskanner til å skanne hver mikroplate to ganger med mindre enn 10 sekunder mellom skanningene For å analysere skanningene, bruk programvare med åpen kildekode til å justere de to sekvensielle skanningene og hente pikselendringsdataene mellom de to bildene og den relative skanningspoengsummen for ormen for å bestemme endringene i lokomotorisk respons basert på lysintensiteten som produseres av skanneren når den er satt til en piksel terskelen på fem. I denne analysen av C.elegans lokomotorisk aktivitet i en enkelt dråpe flytende medium, viste mitokondriekomplekset I sykdom ormer en betydelig 38% reduksjon i deres lokomotoriske aktivitet på L4-stadiet sammenlignet med wild-type ormer. På samme måte viste ormer skanneanalyse av de samme populasjonene en betydelig reduksjon i lokomotorisk aktivitet for L4-stadium sykdomsmodell ormer sammenlignet med N2 Bristol wild-type ormer.Dette lokomotivaktivitetstapet ble også observert på voksen dag en stadium mitokondriekompleks I sykdom ormer som vurdert ved ormskanningsanalyse. Det er viktig å huske å bruke riktig antall ormer når du setter opp hver analyse. Etter denne prosedyren utfører laboratoriet vårt ofte en narkotikascreening.Disse to teknikkene brukes i vårt laboratorium for å evaluere effekten av medikamenter av interesse for ormaktivitet i prekliniske dyremodeller av mitokondriesykdom.

Research

JoVE Journal

Behavior

Comparative Analysis of Experimental Methods to Quantify Animal Activity in Caenorhabditis elegans Models of Mitochondrial Disease

Assessment of Sensorimotor Function in Mouse Models of Parkinson's Disease

Vurdering av sensorisk funksjon i mus modeller av Parkinsons sykdom

Sensitive and  reliable behavioral outcome measures are essential to the evaluation of  potential therapeutic treatments in preclinical trials for many  ...

Nest Building as an Indicator of Health and Welfare in Laboratory Mice

The minimization and alleviation of  suffering has moral and scientific implications. In order to mitigate this  negative experience one must be able to ...

Measurement of Fronto-limbic Activity Using an Emotional Oddball Task in Children with Familial High Risk for Schizophrenia

Måling av Fronto-limbiske aktivitet Bruke en emosjonell Oddball Task hos barn med familiær høy risiko for schizofreni

Adolescence is a critical developmental period where the early symptoms of schizophrenia frequently emerge. First-degree relatives of people with ...

A Computational Method to Quantify Fly Circadian Activity

En datametode å kvantifisere Fly Circadian aktivitet

In most animals and plants, circadian clocks orchestrate behavioral and molecular processes and synchronize them to the daily light-dark cycle. ...

Swimming Induced Paralysis to Assess Dopamine Signaling in Caenorhabditis elegans

Swimming Induced Paralysis to Assess Dopamine Signaling in Caenorhabditis elegans

Svømming indusert lammelse å vurdere dopamin signalering i Caenorhabditis elegans

The swimming assay described in this protocol is a valid tool to identify proteins regulating the dopaminergic synapses. Similar to mammals, dopamine (DA) ...

Use of a Wireless Video-EEG System to Monitor Epileptiform Discharges Following Lateral Fluid-Percussion Induced Traumatic Brain Injury

Bruk av en Wireless video-EEG system for å overvåke epileptiform utslipp etter lateral Fluid-perkusjon indusert Traumatisk Brain skade

The lateral fluid percussion injury (FPI) model is well established and has been used to study TBI and post-traumatic epilepsy (PTE). However, ...

Low-Cost Gait Analysis for Behavioral Phenotyping of Mouse Models of Neuromuscular Disease

Lav-bekostning gange analyse for opptreden bestemmelse av fenotype av musen modeller av nevromuskulær sykdommen

Measurement of animal locomotion is a common behavioral tool used to describe the phenotype of a given disease, injury, or drug model. The low-cost method ...

Sampling and Analysis of Animal Scent Signals

Prøvetaking og analyse av animalske duftsignaler

We have developed an effective methodology for sampling and analysis of odor signals, by using headspace solid-phase microextraction coupled with gas ...

Calcium Imaging in Freely Behaving Caenorhabditis elegans with Well-Controlled, Nonlocalized Vibration

Calcium Imaging in Freely Behaving Caenorhabditis elegans with Well-Controlled, Nonlocalized Vibration

Kalsiumavbildning i fritt oppførende caenorhabditt elegans med godt kontrollert, ikke-lokalisert vibrasjon

Nonlocalized mechanical forces, such as vibrations and acoustic waves, influence a wide variety of biological processes from development to homeostasis. ...

Generating Acute and Chronic Experimental Models of Motor Tic Expression in Rats

Generere akutte og kroniske eksperimentelle modeller av motorisk tic uttrykk hos rotter

Motor tics are sudden, rapid, recurrent movements that are the key symptoms of Tourette syndrome and other tic disorders. The pathophysiology of tic ...