Name: circulating tumor cell lines: an innovative tool for fundamental and translational research
Uploaded: 2021-12-25T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Circulating Tumor Cell Lines: an Innovative Tool for Fundamental and Translational Research at JoVE.com

Este projeto de pesquisa no laboratório Pannequin foi apoiado por uma bolsa de pesquisa do SIRIC: Grant « INCa-DGOS-Inserm 6045 ». As teses de doutorado de Guillaume Belthier e Zeinab Homayed foram apoiadas pela liga anticâncoma/Ligue contre le Cancer. O salário de Céline Bouclier foi financiado pela "região Occitanie". Obrigado a Julian Venables pela edição em inglês.

Todos os protocolos in vivo foram aprovados pelos órgãos de ética animal.
1. Amplificação CTC em Condições de Cultura 3D
<ol><li>Para cultivar CTCs em suspensão, os primeiros CTCs de sementes em poços de uma placa de 24 poços de anexo ultra-baixo (ULA) na concentração máxima de 5 células/μL e em 1 mL de m12 médio (ou seja, DMEM-F12 avançado suplementado com 2 mM l-glutamina, penicilina de 100 Unidade/mL e estreptomicina, suplemento N2, 20 ng/mL fator de cres...

<ol>
	<li>Wittekind, C., Neid, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cancer+invasion+and+metastasis.">Cancer invasion and metastasis.</a> Oncology. 69, 14-16 (2005).</li><li>Eger, A., Mikulits, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Models+of+epithelial-mesenchymal+transition.">Models of epithelial-mesenchymal transition.</a> Drug Discovery Today: Disease Models. 2, 57-63 (2005).</li><li>Palmirotta, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Liquid+biopsy+of+cancer:+a+multimodal+diagnostic+tool+in+clinical+oncology.">Liquid biopsy of cancer: a multimodal diagnostic tool in clinical oncology.</a> Therapeutic Advances in Medical Oncology. 10, (2018).</li><li>Hong, B., Zu, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detecting+circulating+tumor+cells:+current+challenges+and+new+trends.">Detecting circulating tumor cells: current challenges and new trends.</a> Theranostics. 3, 377-394 (2013).</li><li>vander Toom, E. E., Verdone, J. E., Gorin, M. A., Pienta, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Technical+challenges+in+the+isolation+and+analysis+of+circulating+tumor+cells.">Technical challenges in the isolation and analysis of circulating tumor cells.</a> Oncotarget. 7, 62754-62766 (2016).</li><li>Jin, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+the+diagnostic+value+of+circulating+tumor+cells+with+CytoSorter&#174;+CTC+capture+system+in+patients+with+breast+cancer.">Evaluation of the diagnostic value of circulating tumor cells with CytoSorter&#174; CTC capture system in patients with breast cancer.</a> Cancer Medicine. 9, 1638-1647 (2020).</li><li>Huang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relationship+between+circulating+tumor+cells+and+tumor+response+in+colorectal+cancer+patients+treated+with+chemotherapy:+a+meta-analysis.">Relationship between circulating tumor cells and tumor response in colorectal cancer patients treated with chemotherapy: a meta-analysis.</a> BMC Cancer. 14, 976 (2014).</li><li>Yu, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ex+vivo+culture+of+circulating+breast+tumor+cells+for+individualized+testing+of+drug+susceptibility.">Ex vivo culture of circulating breast tumor cells for individualized testing of drug susceptibility.</a> Science. 345, 216-220 (2014).</li><li>Aceto, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Circulating+Tumor+Cell+Clusters+are+Oligoclonal+Precursors+of+Breast+Cancer+Metastasis.">Circulating Tumor Cell Clusters are Oligoclonal Precursors of Breast Cancer Metastasis.</a> Cell. 158, 1110-1122 (2014).</li><li>Grillet, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Circulating+tumour+cells+from+patients+with+colorectal+cancer+have+cancer+stem+cell+hallmarks+in+ex+vivo+culture.">Circulating tumour cells from patients with colorectal cancer have cancer stem cell hallmarks in ex vivo culture.</a> Gut. 66, 1802-1810 (2017).</li><li>Lee, W. Y., Hong, H. K., Ham, S. K., Kim, C. I., Cho, Y. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+Colorectal+Cancer+in+Differentially+Established+Liver+Metastasis+Models.">Comparison of Colorectal Cancer in Differentially Established Liver Metastasis Models.</a> Anticancer Research. 34, 3321-3328 (2014).</li><li>Giraud, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progastrin+production+transitions+from+Bmi1+/Prox1++to+Lgr5high+cells+during+early+intestinal+tumorigenesis.">Progastrin production transitions from Bmi1+/Prox1+ to Lgr5high cells during early intestinal tumorigenesis.</a> Translational Oncology. 14, (2020).</li><li>Xu, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimization+and+Evaluation+of+a+Novel+Size+Based+Circulating+Tumor+Cell+Isolation+System.">Optimization and Evaluation of a Novel Size Based Circulating Tumor Cell Isolation System.</a> PLoS One. 10, 0138032 (2015).</li><li>Beije, N., Jager, A., Sleijfer, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Circulating+tumor+cell+enumeration+by+the+CellSearch+system:+the+clinician's+guide+to+breast+cancer+treatment.">Circulating tumor cell enumeration by the CellSearch system: the clinician's guide to breast cancer treatment.</a> Cancer Treatment Reviews. 41, 144-150 (2015).</li><li>Karabacak, N. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microfluidic,+marker-free+isolation+of+circulating+tumor+cells+from+blood+samples.">Microfluidic, marker-free isolation of circulating tumor cells from blood samples.</a> Nature Protocols. 9, 694-710 (2014).</li><li>Ozkumur, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inertial+Focusing+for+Tumor+Antigen-Dependent+and+-Independent+Sorting+of+Rare+Circulating+Tumor+Cells.">Inertial Focusing for Tumor Antigen-Dependent and -Independent Sorting of Rare Circulating Tumor Cells.</a> Science Translational Medicine. 5, (2013).</li></ol>

O protocolo descrito acima foi utilizado inicialmente para caracterização funcional ctc colorretal, mas pode ser usado para outros tipos de câncer, como o câncer de mama e pode ser adaptado para modelos de camundongos.
O verdadeiro fator limitante é o número de CTCs presentes na amostra de sangue e a eficiência da técnica utilizada para isolá-las e expandi-las. Várias técnicas de isolamento CTC foram descritas com base em propriedades específicas de CTC, como o Parsortix, um dispos...

Apesar das recentes melhoras no diagnóstico precoce do câncer e na estratégia terapêutica, mais de noventa por cento da morbidade do câncer ainda se deve à metástase1. O processo metastático é uma cascata de várias etapas que começa com o descolamento local das células do tumor primário e sua entrada na corrente sanguínea onde se tornam células tumorais circulantes (CTCs) para finalmente colonizar locais distantes como fígado e pulmões, no caso do câncer colorretal (CRC)2. Recentemente, tem-se aumentado a atenção para biópsias líquidas, que são uma ferramenta não invasiva para detectar e enumerar CTCs de amostras de sangue de pacientes. A heterogeneidade genética intratumor é uma das principais causas de resistência a medicamentos; assim, isolar células representativas do material tumoral constitui uma ferramenta promissora para a medicina personalizada3.
Apesar da baixa frequência de CTCs no sangue (1 CTC por 106 - 107 leucócitos)4, várias técnicas de detecção e isolamento foram desenvolvidas com base em diferenças de propriedade entre CTCs e outros componentes do sangue5. O número de CTCs em amostras de sangue do paciente, sozinho, pode fornecer informações sobre o estágio de malignidade, resposta ao tratamento e progressão da doença6,7. Assim, o isolamento do CTC é uma ferramenta crucial para estudos translacionais avaliarem a heterogeneidade genética ou realizarem o rastreamento de medicamentos, bem como para estudos fundamentais para caracterizar essas células invasoras, pois são os principais atores da indução metastática8,9. De fato, em comparação com as linhas de células cancerígenas estabelecidas comercialmente que acumularam milhares de mutações ao longo do tempo, os CTCs frescos compartilham as principais características do tumor primário original, incluindo uma capacidade potente de metástase, e eles são um melhor reflexo da doença. Essas características fazem deles uma ferramenta robusta para estudos fundamentais, especialmente em experimentos eliminatórios de fatores-chave previstos envolvidos na metástase. O resultado desses experimentos pode ser validado in vivo, emcamundongos, conforme descrito abaixo.
Uma vez que os CTCs são isolados, eles podem ser expandidos em condições de cultura não aderentes e, em seguida, eles podem ser manipulados assim como qualquer linha de células cancerígenas disponíveis, ou seja, eles podem ser igualmente cultivados em condições aderentes ou incorporados em Matrigel, dependendo da questão científica10. Por exemplo, para testar a expressão e localização de uma proteína de interesse, as esferas CTC podem ser cultivadas em condições de suspensão e serem incorporadas em Histogel para realizar imunofluorescência em seções de esferas. Além disso, se a proteína é membranous, sua expressão em células vivas pode ser medida por citometria.
Para estudos funcionais, para testar o papel de uma proteína de interesse que pode desempenhar um papel na colonização hepática, os CTCs com genes editados, por shRNA ou CRISPR/Cas9, podem ser injetados no baço de camundongos imunodeficientes. Este último experimento é um modelo poderoso para imitar a colonização da metástase hepática11.
A capacidade dos CTCs de iniciar tumores pode ser avaliada injetando um número muito pequeno de células em camundongos imuno-deficientes. Como a iniciação tumoral é uma marca registrada das células-tronco cancerígenas (CSCs) este ensaio indicará a porcentagem de CSCs dentro das linhas CTC. Este fenótipo de células-tronco torna as linhas de células tumorais circulantes resistentes a algumas terapias de câncer padrão-ouro. Os CTCs expandidos podem, portanto, ser usados para triagem de medicamentos e identificar o melhor tratamento potencial eficiente para o paciente; A resposta ctc ao tratamento pode ser testada in vitro usando um ensaio de viabilidade de luminescência, por exemplo.
Em uma perspectiva de longo prazo, o rastreamento de medicamentos em CTCs recém-isolados e amplificados poderia ser usado como uma nova ferramenta para a medicina personalizada para ajudar na escolha do tratamento mais eficiente e adaptado para os pacientes.
No presente artigo, são detalhados protocolos para a cultura de linhas CTC, para coloração de proteínas específicas via imunostaining e citometria, para a realização de ensaios de citotoxicidade, bem como experimentos in vivo xenoenxerto com CTC.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Accumax solution</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A7089</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Advanced DMEM/F-12</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>12634028</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CellTiter-Glo Luminescent Cell Viability Assay</td>
			<td>Promega</td>
			<td>G7570</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corning Matrigel Growth Factor Reduced (GFR) Basement Membrane Matrix</td>
			<td>Corning</td>
			<td>354230</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Costar 24-well Clear Flat Bottom Ultra-Low Attachment Multiple Well Plates,</td>
			<td>Corning</td>
			<td>3473</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Histiogel Specimen Medium</td>
			<td>LabStorage</td>
			<td>HG-4000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human EGF, premium grade</td>
			<td>Miltenyi Biotec</td>
			<td>130-097-751</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human FGF-2, premium grade</td>
			<td>Miltenyi Biotec</td>
			<td>130-093-564</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-Glutamine (200 mM)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>25030081</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N-2 Supplement</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>17502048</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-Streptomycin (5,000 U/mL)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15070063</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

circulating tumor cell lines: an innovative tool for fundamental and translational research

A metástase é a principal causa de morte por câncer. Apesar da melhora nas estratégias de tratamento, o câncer metastático tem um prognóstico ruim. Enfrentamos, portanto, uma necessidade urgente de compreender os mecanismos por trás do desenvolvimento da metástase e, assim, propor tratamentos eficientes para o câncer avançado. Cânceres metastáticos são difíceis de tratar, pois biópsias são invasivas e inacessíveis. Recentemente, houve um interesse considerável em biópsias líquidas, incluindo o ácido desoxiribonucleico circulante livre de células (DNA) e as células tumorais circulantes do sangue periférico e estabelecemos várias linhas de células tumorais circulantes de pacientes com câncer colorretal metastático para participar de sua caracterização. De fato, para caracterizar funcionalmente essas células raras e mal descritas, o passo crucial é expandi-las. Uma vez estabelecidas, as linhas de células tumorais circulantes (CTC) podem então ser cultivadas em condições de suspensão ou aderentes. No nível molecular, as linhas CTC podem ser utilizadas para avaliar a expressão de marcadores específicos de interesse (como diferenciação, células-tronco epiteliais ou cancerígenas) por imunofluorescência ou análise de citometria. Além disso, as linhas CTC podem ser usadas para avaliar a sensibilidade medicamentosa a quimioterapias padrão-ouro, bem como a terapias-alvo. A capacidade das linhas CTC para iniciar tumores também pode ser testada por injeção subcutânea de CTCs em camundongos imunodeficientes.
Finalmente, é possível testar o papel de genes específicos de interesse que possam estar envolvidos na disseminação do câncer editando genes CTC, por ácido ribonucleico de pinos curtos (shRNA) ou Crispr/Cas9. Os CTCs modificados podem, assim, ser injetados em baços de camundongos imunodeficientes, para imitar experimentalmente parte do processo de desenvolvimento metastático in vivo.
Em conclusão, as linhas CTC são uma ferramenta preciosa para futuras pesquisas e para medicina personalizada, onde permitirão a previsão da eficiência do tratamento utilizando as próprias células que são originalmente responsáveis pela metástase.

Ambas as expressões EpCAM e CD26 observadas por IF (Figura 1A painel direito) e FACS ( Figura1B), respectivamente, indicam que a linha CTC é epitelial e exibem uma das marcas do CSC10. Este traço epitelial pode ser ainda caracterizado pela coloração com anticorpos direcionados contra outros marcadores epiteliais e mesenquimais. Assim, seria possível saber aproximadamente onde está a linha CTC ao longo do eixo epite...

Watch this Scientific Journal Video about Circulating Tumor Cell Lines: an Innovative Tool for Fundamental and Translational Research at JoVE.com

Circulating Tumor Cell Lines: an Innovative Tool for Fundamental and Translational Research

Os CTCs de cultivo permitem uma caracterização funcional mais profunda do câncer, através do ensaio de expressão específica do marcador, e da avaliação da resistência medicamentosa e da capacidade de colonizar o fígado entre outras possibilidades. No geral, a cultura CTC pode ser uma ferramenta clínica promissora para a medicina personalizada para melhorar o resultado do paciente.

Linhas celulares tumorais circulantes: uma ferramenta inovadora para pesquisa fundamental e translacional

Metastasis is a leading cause of cancer death. Despite improvements in treatment strategies, metastatic cancer has a poor prognosis. We thus face an ...

A metástase é uma das principais causas de mortes relacionadas ao câncer. Esse fenômeno ocorre quando as células cancerígenas se desprendem do tumor primário, entram na circulação sanguínea para finalmente atingir um órgão alvo distante. Uma vez que essas células separadas vão para o sangue, nós as chamamos de células tumorais secundárias.Eles representam um material variável porque, por um lado, eles são os principais culpados da formação de metástase e, por outro lado, são mais fáceis do que biópsias tumorais. Na verdade, eles podem ser coletados por uma simples punção sanguínea. Apesar do baixo número dessas células na amostra de sangue, somos os primeiros a estabelecer várias linhas de células tumorais circulantes do sangue do paciente com maior preocupação usando a condição controlada em 3D.Esta linha celular pode ser usada em qualquer linha de células comerciais para experimentos de rotina. Por exemplo, para a triagem genética de medicamentos, para proteína de interesse, mas também para o experimento in vivo para testar a capacidade de iniciação do tumor e seu potencial metastático. CTC, circulando linhas de células tumorais, deve ser cultivado em condições 3D em hipóxia.Uma vez que o CTC tenha formado esferas, podemos colocá-la no meio e centrífugar-a por cinco minutos a 300 RCF. Descarte o supernatante e adicione 500 microliters de Accumax. Suspendemos um e incubamos a solução 20 minutos a 37 graus.Em seguida, lave esferas dissociadas com PBS e pelota as células. Resuspenque a pelota com um DMEM/F12 recém-suplementado e veja as células na densidade de cinco células por microliter em uma nova placa de 24 Low Attachment. As esferas de CTCs de centrifugação eliminam o supernasce e lavam a pelota duas vezes com PBS.A 500 microliter de PFE misture bem e incuba o tubo no gelo por 20 minutos. Em seguida, centrifugar as esferas fixas e lavar a pelota duas vezes com PBS, eliminando o volume máximo de PBS e adicionar 20 microliter de HistoGel formado. Leve-o para a suspensão e faça uma gota no vaso de cultura, deixe-o secar por 10 minutos e desprender-o usando um bisturi.Agora você pode processar para qualquer desejado, a fim de CTCs visando uma proteína desejada de interesse. Coletar CTCs e desassociar as esferas com a Accumax como descrito anteriormente. Elimine o Accumax e resuspenja a pelota com três mL de tampão de bloqueio e transfira a suspensão através de um coador de células de 14 micrômetros para obter uma solução celular única.Conte as células e envie em tubos e adicione um volume de 200.000 células, centrifugue os tubos e descarte o sobrenante. De acordo com a folha de dados de anticorpos, adicione em um tubo, o volume desejado do anticorpo e em outro tubo seu isótipo e continue os passos seguindo a orientação do fabricante. O tubo restante não será rotulado e o uso de um mercado de viabilidade é fortemente sugerido neste experimento.No cítmetro, comece com o tubo não rotulado para definir a tensão na área negativamente rotulada. Depois disso, coloque o tubo de isótipo. O isótipo serviria como um controle negativo para distinguir entre o sinal positivo e o sinal não específico.E termine o experimento com as células rotuladas com o anticorpo de interesse onde você deve ver uma mudança no portão rotulado positivamente, se a proteína de interesse for expressa. Isso suspende ctcs dissociados em meio suplementado na densidade de 200.000 células por mL. Em um ultra baixo acessório 96, placa bem, selar o volume de 50 microliter e incubar a placa 24 horas em hipóxia.No dia seguinte, adicione 50 microliter de diferente concentração da droga testada e adicione o mesmo volume de DMEM/F12 apenas para determinar ainda mais a base de viabilidade celular e incubar a placa por mais 48 horas. No terceiro dia, reconstitua o agente e adicione 70 microliter da mistura em cada poço. Coloque a placa em um agitador orbital por 20 minutos e, em seguida, meça a luminescência.Este ensaio é uma ferramenta útil para testar um grande número de medicamentos, a fim de avaliar seus efeitos no crescimento celular do CTC. Em Eppendorf, células resuspend em 100 microliter de PBS beliscam a pele na parte de trás do mouse e inserem a agulha sob a pele. Injete lentamente todo o volume no mesmo local e monitore o crescimento do tumor a cada segundo dia e sacrifique os camundongos se o tumor excedesse um tamanho de 1,5 centímetros cúbicos.Antes da cirurgia, injete subcutâneamente um analgésico, no lado ventral dorsal do camundongo, faça uma pequena incisão abaixo da 10ª costela. Levante suavemente o baço e coloque-o em uma gaze estéril. Usando uma seringa de insulina, injete 50 microliteres de CTCs resuspended em PBS e espere por três minutos sem remover a agulha.Ligate o vaso arterial de um lado e o vaso venal do outro lado. Em seguida, remova o baço cortando diretamente acima das duas ligaduras. Costure o peritônio abdominal e a pele e desinfete bem a área.O objetivo deste experimento é testar a capacidade de CTCs derivados de pacientes com câncer colorretal para colonizar o fígado induzindo a previsão metastática visível. Isolar e estabelecer a linha celular tumoral clínica é uma ferramenta emergente para estudos fundamentais e translacionais. Por exemplo, se você tem um gene de interesse onde os estudos in vivo demonstraram que esse gene está envolvido na migração e capacidade de invasão de linhas de células cancerígenas colorretais, derrubar esse gene em linhas de células tumorais circulantes antes da injeção no baço de camundongos, deixá-los colonizar o fígado pode ser uma boa ferramenta para confirmar seu resultado in vivo.Para estudos translacionais, nossa principal perspectiva de isolar linhas de células tumorais circulantes é usar esse precioso material em medicina personalizada. A partir das amostras de sangue do paciente, isolaríamos e amplificamos CTCs na cultura por duas ou três semanas, a fim de ter material suficiente para examinar o painel de medicamentos que está disponível e avaliar sua citotoxicidade para finalmente atribuir

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Capture and Release of Viable Circulating Tumor Cells from Blood

Captura e libertação de viáveis ​​circulantes células tumorais do sangue

We demonstrate a method for size based capture of viable circulating tumor cell (CTC) from whole blood, along with the release of these cells from chip ...

Pesquisa do câncer

Isolation of Circulating Tumor Cells in an Orthotopic Mouse Model of Colorectal Cancer

Isolamento de células tumorais circulantes em um modelo de rato ortotópico de câncer colorretal

Despite the advantages of easy applicability and cost-effectiveness, subcutaneous mouse models have severe limitations and do not accurately simulate ...

The Establishment of a Lung Colonization Assay for Circulating Tumor Cell Visualization in Lung Tissues

O estabelecimento de um ensaio de colonização de pulmão para visualização de células de Tumor nos tecidos do pulmão de circulação

Metastasis is the major cause of cancer death. The role of circulating tumor cells (CTCs) in promoting cancer metastasis, in which lung colonization by ...

Characterization of Tumor Cells Using a Medical Wire for Capturing Circulating Tumor Cells: A 3D Approach Based on Immunofluorescence and DNA FISH

Caracterização de células tumorais, usando um fio de médico para a captura de células tumorais de circulação: uma abordagem 3D baseado no DNA peixe e imunofluorescência

Circulating tumor cells (CTCs) are associated with poor survival in metastatic cancer. Their identification, phenotyping, and genotyping could lead to a ...

Paramyxoviruses for Tumor-targeted Immunomodulation: Design and Evaluation Ex Vivo

Paramyxoviruses para imunomodulação Tumor-alvo: Design e avaliação Ex Vivo

Successful cancer immunotherapy has the potential to achieve long-term tumor control. Despite recent clinical successes, there remains an urgent need for ...

Patient-derived Orthotopic Xenograft Models for Human Urothelial Cell Carcinoma and Colorectal Cancer Tumor Growth and Spontaneous Metastasis

Modelos de xenoenxertos Ortotópicos derivados do paciente para Carcinoma de células urotelial humana e crescimento do tumor do câncer colorretal e metástase espontânea

Cancer patients have poor prognoses when lymph node (LN) involvement is present in both high-grade urothelial cell carcinoma (HG-UCC) of the bladder and ...

Establishment and Characterization of Three Afatinib-resistant Lung Adenocarcinoma PC-9 Cell Lines Developed with Increasing Doses of Afatinib

Estabelecimento e caracterização de três linhagens de células PC-9 de adenocarcinoma de pulmão resistentes ao Afatinib desenvolvidas com doses crescentes de Afatinib

Acquired resistance to molecular target inhibitors is a severe problem in cancer therapy. Lung cancer remains the leading cause of cancer-related death in ...

Micromanipulation of Circulating Tumor Cells for Downstream Molecular Analysis and Metastatic Potential Assessment

Micromanipulação de células tumorais circulantes para análise molecular a jusante e avaliação do potencial metastático

Blood-borne metastasis accounts for&#160;most cancer-related deaths and involves circulating tumor cells (CTCs) that are successful in establishing new ...

Detection and Monitoring of Tumor Associated Circulating DNA in Patient Biofluids

Deteção e monitoração do ADN de circulação associado do tumor em Biofluids pacientes

Complications associated with upfront and repeat surgical tissue sampling present the need for minimally invasive platforms capable of molecular ...

Radiosensitivity of Cancer Stem Cells in Lung Cancer Cell Lines

Radiosensibilidade de células-tronco cancerosas em linhas celulares de câncer de pulmão

The presence of cancer stem cells (CSCs) has been associated with relapse or poor outcomes after radiotherapy. Studying radioresistant CSCs may provide ...