Object Location Task giver os mulighed for at undersøge forskellige mekanismer i dannelsen eller opbevaringen af rumlig hukommelse ved at drage fordel af den spontane udforskende adfærd hos gnavere. Denne protokol giver mulighed for gentagelse af en object location task op til fire gange at bidrage til at øge den statistiske effekt og effektiviteten og produktionen af undersøgelser, der involverer kirurgiske procedurer. For at begynde at få en firkantet arena lavet af uigennemsigtig, ikke porøs hård plast med mindst 60 centimeter bredde og 50 centimeter højde.
For vellykket registrering af rottebevægelser af den automatiserede software skal du sørge for, at gulvfarven står i kontrast til rottens. Placer arenaen enten inde i en kasse eller på en platform, der er omgivet af et gardin. Hvis du vil oprette en kontekst, skal du indsætte et andet lag af kan indsatte vægge i forskellige farver eller mønstre i arenaen.
Hæng 3D rumlige signaler, der har forskellige geometriske former og farver højt nok, så rotterne ikke kan nå dem. Vedhæft forskellige par objekter, der ikke er porøse, ikke tygges, og let at rengøre med forskellige geometriske former og teksturer til gulvet i arenaen. Fyld en ikke firkantet spand med sengetøj.
Tilfældigt placere fem til 10 objekter i forskellige former og størrelser, som er forskellige fra de objekter, der skal bruges i eksperimentet i spanden. Til session et, bringe alle hjem bure til eksperimentet værelse og lad rotter habituate til rummet og nøjes i mindst 30 minutter. Sæt to til fire rotter fra samme bur sammen i spanden i ca. 20 minutter.
Rengør spanden ved at fjerne fækalt stof mellem hver gruppe rotter. Sæt alle rotter i deres hjemmebure og returnere dem til boligrummet. For session to, bringe alle bure til eksperimentet værelse og lad i mindst 30 minutter.
Sæt hver rotte individuelt i spanden i 10 minutter. Placer rotten tilbage i hjemmet bur og rense spanden efter hver rotte. Når du er færdig, skal du returnere alle bure til boligrummet.
For session fire, bringe alle bure til eksperimentet værelse og forlade i mindst 30 minutter. Placer to til fire rotter fra samme bur sammen i den tomme arena uden kontekst eller rumlige signaler i 20 minutter. Placer alle rotter tilbage i hjemmet bur og tørre arenaen med 70% ethanol efter hver gruppe af rotter.
Rediger den tomme arena for at skabe den første kontekst uden at placere objekterne i arenaen. Til session en af kontekst habituation bringe alle bure til eksperimentet værelse og lad i mindst 30 minutter. Start optageren, og placer derefter den første rotte i midten af arenaen og lad rotten udforske arenaen i 10 minutter.
Så stop optageren og placere rotten tilbage i hjemmet bur. Returner alle bure til boligrummet, når de er færdige. For hver rotte gentages denne proces for sessioner to og tre over to på hinanden følgende dage, således at der er tre sessioner af kontekstbefrugtning pr. Rotte i alt.
Bring alle bure til eksperimentet værelse og lad i mindst 30 minutter. Brug den tidsplan, der er udarbejdet på forhånd, skal du placere det første identiske par objekter på de udpegede steder ved hjælp af klæbemåtter eller dobbeltsidet tape. Start optageren og placere den første rotte i arenaen i lige afstand fra hvert objekt mod en væg eller et hjørne, der ikke er besat af noget objekt.
For svag kodning tillade rotten at udforske arenaen og objekter i 20 minutter for en enkelt retssag. For stærk kodning tillade rotten at udforske i fem minutter med tre forsøg for den samme rotte. Stop optageren.
Placer rotten tilbage i hjemmet bur, fjerne objekter og tørre arenaen med ethanol efter hver optagelse. Bring alle bure til forsøgsrummet, hvilket giver tilstrækkelig tid forud for den første test, så rotterne kan efterlades i mindst 30 minutter. Placer objekterne på de angivne placeringer.
Start optageren og placere den første rotte i arenaen mod en væg eller et hjørne, der ikke er besat af noget objekt. Lad rotten udforske arenaen og genstande i fem minutter. Læg rotten tilbage i buret.
Fjern objekterne og tør både objekterne og arenaen grundigt med 70% ethanol. Gentag optagelsen for hver rotte og derefter returnere burene tilbage til huset værelse. For hver rotte skal du score udforskningstiden for hvert objekt i både kodnings- og testforsøgene.
Score kodning forsøg for hele varigheden og til testforsøg i to minutter, for bedste diskrimination ydeevne. Beregn procentdelen af udforskning for hvert objekt eller forskelsbehandlingsindekset for hver rotte og for at beregne middelværdier for grupperne. Brug en enkelt prøve T-test til at opdage en væsentlig præference over chanceniveauet.
Den stærke kodning protokol førte til præference for objektet på den nye placering med en betydeligt højere gennemsnitlig procentdel udforskning end 50% chance niveau i test med både en time og 24 timers forsinkelser. Den svage kodning protokol produceret en betydelig stigning i præferencen for objektet på det nye sted, i forhold til chance niveau i test med en times forsinkelse, men ikke en 24 timers forsinkelse. En væsentlig fordel ved denne protokol er, at den kan udføres fire gange ved hjælp af fire forskellige sammenhænge med den samme kohorte af rotter.
Resultaterne af en mulig måde at bruge modbalancering med to eksperimentelle grupper af en times hukommelse og 24 timers hukommelse er demonstreret her. De to grupper blev opvejet i forbindelse et og to, som blev gentaget i yderligere to sammenhænge, tre og fire. Resultaterne fra disse fire sammenhænge præsenteres individuelt, hvor hukommelsen for hver eksperimentel gruppe blev vurderet ved at sammenligne præferencen til tilfældighedsniveau i hver sammenhæng.
Der blev ikke konstateret nogen signifikant forskel mellem de fire sammenhænge. For en bedre repræsentation og inden for emnesammenligning af dataene blev resultaterne fra to modvægtskontekster kombineret og sammenlignet ved hjælp af fagsammenligning, nemlig den parrede T-test. Da denne opgave er afhængig af nysgerrighed, at håndtering og habituation er afgørende, så dyret ikke er overvældet eller bange under testen.
Yderligere manipulationer såsom farmakologisk og optogenetisk intervention kan gennemføres i denne protokol, samt in vivo imaging for at studere kortsigtede og langsigtede erindringer og for at forbedre eller forringe disse erindringer.