Objektplasseringsoppgaven lar oss undersøke ulike mekanismer for dannelsen eller oppbevaringen av romlig minne ved å dra nytte av den spontane utforskende oppførselen hos gnagere. Denne protokollen gjør det mulig å gjenta en objektplasseringsoppgave opptil fire ganger, noe som bidrar til å øke statistisk kraft og effektiviteten og produksjonen av studier som involverer kirurgiske prosedyrer. For å begynne å oppnå en firkantet arena laget av ugjennomsiktig, ikke porøs hard plast med minst 60 centimeter bredde og 50 centimeter høyde.
For vellykket opptak av rottebevegelser av den automatiserte programvaren, sørg for at gulvfargen står i kontrast til rottens. Plasser arenaen enten inne i en boks eller på en plattform som er omsluttet av et gardin. Hvis du vil opprette en kontekst, setter du inn et ekstra lag med innsettingsvegger i forskjellige farger eller mønstre i arenaen.
Heng 3D romlige signaler som har distinkte geometriske former og farger høyt nok slik at rottene ikke kan nå dem. Fest forskjellige par objekter som ikke er porøse, ikke tyggebare og enkle å rengjøre med distinkte geometriske former og teksturer til gulvet på arenaen. Fyll en ikke-firkantet bøtte med sengetøy.
Plasser tilfeldig fem til ti objekter av forskjellige former og størrelser, som er forskjellige fra objektene som skal brukes i eksperimentet i bøtte. For økt en, ta alle hjemmeburene til eksperimentrommet og la rottene habituate til rommet og bosette seg i minst 30 minutter. Sett to til fire rotter fra samme bur sammen i bøtte i ca 20 minutter.
Rengjør bøtte ved å fjerne fekal materie mellom hver gruppe rotter. Legg alle rotter i deres hjemmebur og returner dem til boligrommet. For økt to, ta alle burene til eksperimentrommet og la det stå i minst 30 minutter.
Sett hver rotte individuelt i bøtte i 10 minutter. Plasser rotten tilbake i hjemmeburet og rengjør bøtte etter hver rotte. Når du er ferdig, returner alle burene til boligrommet.
For økt fire, ta alle burene til eksperimentrommet og la det stå i minst 30 minutter. Plasser to til fire rotter fra samme bur sammen i den tomme arenaen uten kontekst eller romlige signaler i 20 minutter. Plasser alle rotter tilbake i hjemmeburet og tørk arenaen med 70% etanol etter hver gruppe rotter.
Endre den tomme arenaen for å skape den første konteksten uten å sette objektene i arenaen. For økt en av kontekst habituation bringe alle bur til eksperimentrommet og forlate i minst 30 minutter. Start opptakeren, plasser deretter den første rotten i midten av arenaen og la rotten utforske arenaen i 10 minutter.
Stopp deretter opptakeren og legg rotten tilbake i hjemmeburet. Returner alle bur til boligrommet når du er ferdig. For hver rotte, gjenta denne prosessen for økter to og tre over to påfølgende dager, slik at det er tre økter med kontekst habituation per rotte totalt.
Ta alle burene til eksperimentrommet og la det stå i minst 30 minutter. Bruk tidsplanen som er utarbeidet på forhånd, plasser det første identiske paret med objekter på de angitte stedene ved hjelp av klissete matter eller dobbeltsidig tape. Start opptakeren og plasser den første rotten i arenaen i like avstand fra hvert objekt som vender mot en vegg eller et hjørne som ikke er okkupert av noe objekt.
For svak koding tillater rotten å utforske arenaen og objekter i 20 minutter for en enkelt prøve. For sterk koding la rotten utforske i fem minutter med tre forsøk for samme rotte. Stopp opptakeren.
Plasser rotten tilbake i hjemmeburet, fjern gjenstandene og tørk arenaen med etanol etter hver innspilling. Ta alle burene til eksperimentrommet, og la det være tilstrekkelig tid før den første testen, slik at rottene kan stå i minst 30 minutter. Plasser objektene på de angitte stedene.
Start opptakeren og plasser den første rotten i arenaen vendt mot en vegg eller et hjørne som ikke er okkupert av noe objekt. La rotten utforske arenaen og gjenstandene i fem minutter. Plasser rotten tilbake i hjemmeburet.
Fjern gjenstandene og tørk både gjenstandene og arenaen grundig med 70% etanol. Gjenta opptaket for hver rotte og returner deretter burene tilbake til boligrommet. For hver rotte scorer du letetiden for hvert objekt i både kodings- og testforsøkene.
Score koding forsøk for hele varigheten og til testforsøkene i to minutter, for best diskriminering ytelse. Beregn leteprosenten for hvert objekt eller diskrimineringsindeksen for hver rotte og for å beregne gjennomsnittsverdier for gruppene. Bruk en prøve T-test for å oppdage en betydelig preferanse over sjansenivået.
Den sterke kodingsprotokollen førte til preferanse for objektet på den nye plasseringen med en betydelig høyere gjennomsnittlig prosentvis utforskning enn 50% sjansenivået i tester med både en time og 24 timers forsinkelser. Den svake kodingsprotokollen ga en betydelig økning i preferansen for objektet på den nye plasseringen, sammenlignet med tilfeldighetsnivå i tester med en times forsinkelse, men ikke en 24-timers forsinkelse. En betydelig fordel med denne protokollen er at den kan utføres fire ganger ved hjelp av fire forskjellige sammenhenger med samme kohort av rotter.
Resultatene av en mulig måte å bruke tellerbalansering med to eksperimentelle grupper på en times minne og 24 timers minne er demonstrert her. De to gruppene ble motvektet over sammenhenger en og to, som ble gjentatt i to ekstra sammenhenger, tre og fire. Resultatene fra disse fire kontekstene presenteres individuelt der minnet for hver eksperimentell gruppe ble vurdert ved å sammenligne preferansen med tilfeldighetsnivå i hver kontekst.
Det ble ikke oppdaget noen signifikant forskjell mellom de fire kontekstene. For en bedre representasjon og innenfor subjektsammenligning av dataene ble resultatene fra to motvektede kontekster kombinert og sammenlignet med bruk i subjektsammenligning, nemlig den sammenkoblede T-testen. Siden denne oppgaven er avhengig av nysgjerrighet, er håndtering og habituation avgjørende slik at dyret ikke blir overveldet eller redd under testen.
Ytterligere manipulasjoner som farmakologisk og optogenetisk intervensjon kan implementeres i denne protokollen, samt in vivo-avbildning for å studere kortsiktige og langsiktige minner og for å forbedre eller svekke disse minnene.