Name: leukodepletion filters-derived cd34+ cells as a cell source to study megakaryocyte differentiation and platelet formation
Uploaded: 2021-05-20T14:00:00
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Diese Arbeit wurde von ANR (Agence National de la Recherche) Grant ANR- 17-CE14-0001-1 unterstützt.

Kontrollproben von menschlichen Kontrollproben wurden von Freiwilligenblutspendern erhalten, die eine schriftliche Einverständniserklärung gaben, die von dem Bluttransfusionszentrum rekrutiert wurde, in dem die Forschung durchgeführt wurde (Etablissement Français du Sang-Grand Est). Alle Verfahren wurden vom französischen Ministerium für Hochschulbildung und Forschung registriert und genehmigt und unter der Nummer AC_2015_2371 registriert.Die Spender gaben ihre Zustimmung in der CODHECO-Nummer AC- 2008 - 562 Einver...

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J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stimulation+of+megakaryocytopoiesis+and+thrombopoiesis+by+the+c-Mpl+ligand.">Stimulation of megakaryocytopoiesis and thrombopoiesis by the c-Mpl ligand.</a> Nature. 369 (6481), 533-538 (1994).</li><li>Almomani, M. 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L., Balduini, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+system+for+the+in+vitro+study+of+megakaryocytes+and+functional+platelet+production+using+silk-based+vascular+tubes.">Three-dimensional system for the in vitro study of megakaryocytes and functional platelet production using silk-based vascular tubes.</a> Tissue Engineering. Part C, Methods. 17 (12), 1223-1232 (2011).</li></ol>

Dieses Protokoll beschreibt ein Verfahren zur Herstellung von MK, das in der Lage ist, Proplatelets aus blutabgeleitetem HP zu emittieren und Blutplättchen aus dem Kulturmedium freizusetzen. HP werden aus LRF gewonnen, einem Nebenprodukt der Blutbanken, das verwendet wird, um kontaminierende Leukozyten aus zellulären Blutprodukten zu entfernen und Nebenwirkungen zu vermeiden. Obwohl diese Methode relativ einfach ist, verdienen einige Punkte besondere Aufmerksamkeit.
Die Abscheidung der Zells...

Blutplättchen stammen aus spezialisierten großen polyploiden Zellen, den Megakaryozyten (MK), die aus einem konstanten und fein abgestimmten Produktionsprozess stammen, der als Megakaryopoese (MKP) bekannt ist. An der Spitze dieses Prozesses stehen hämatopoetische Stammzellen, die in Kontakt mit der Knochenmarkumgebung (Zytokine, Transkriptionsfaktoren, hämatopoetische Nische) in der Lage sein werden, sich zu vermehren und sich zu hämatopoetischen Vorläufern (HP) zu differenzieren, die in der Lage sind, sich auf den megakaryozytären Weg zu begeben, was zu unreifen MKsführt 1. Unter dem Einfluss verschiedener Zytokine, insbesondere Thrombopoietin (TPO), das das Hauptzytokin von MKP ist; Das MK wird dann zwei Hauptreifungsstadien durchlaufen: Endomitose und die Entwicklung von Demarkationsmembranen (DMS). Dieses voll ausgereifte MK erscheint dann in der Nähe eines sinusförmigen Gefäßes, in dem es zytoplasmatische Erweiterungen, die Proplatele, emittieren kann, die unter dem Blutfluss freigesetzt und anschließend in funktionelle Blutplättchen umgewandelt werden2. Das Klonen von TPO im Jahr 19943 gab der MKP-Untersuchung einen Schub, indem es die Entwicklung von In-vitro-Kulturtechniken beschleunigte, die eine HP-Differenzierung und MK-Reifung ermöglichen.
Es gibt viele Pathologien, die Blutplättchen betreffen, sowohl in Bezug auf die Thrombozytenzahl (Zunahme oder Abnahme) als auch auf die Funktion4,5. Die Möglichkeit, MKP in vitro aus humanem HP zu rekapitulieren, könnte das Verständnis der molekularen und zellulären Mechanismen, die diesem Prozess zugrunde liegen, und letztendlich das therapeutische Management von Patienten verbessern.
Verschiedene Quellen menschlicher HP sind geeignet: Nabelschnurblut, Knochenmark und peripheres Blut6,7,8. Die Gewinnung von HP aus peripherem Blut wirft weniger logistische und ethische Probleme auf als ihre Wiederherstellung aus Nabelschnurblut oder dem Knochenmark. HP kann aus Leukapherese oder Buffy Coat gewonnen werden, aber diese Quellen sind teuer und nicht immer in Blutzentren verfügbar. Andere Protokolle, die kostengünstiger und einfacher durchzuführen sind, ermöglichen die direkte Wiederherstellung von humanen peripheren mononukleären Blutzellen (PBMCs), ohne dass eine vorherige CD34-gesteuerte Isolierungerforderlich ist 4,8. Die Reinheit der Megakaryozyten ist mit dieser Methode jedoch nicht zufriedenstellend und eine Auswahl von CD34+ Zellen aus PBMC wird für eine optimale Differenzierung in MK empfohlen. Dies führte uns dazu, eine HP-Reinigung aus Leukoreduktionsfiltern (LRF) zu implementieren, die routinemäßig in Blutbanken verwendet wird, um weiße Blutkörperchen zu entfernen und somit unerwünschte immunologische Reaktionen zu vermeiden9. Seit 1998 werden Thrombozytenkonzentrate in Frankreich automatisch leukodepleiert. Am Ende dieses Prozesses werden LRF verworfen und alle in der LRF zurückgehaltenen Zellen werden zerstört. Zellen in LRFs sind daher ohne zusätzliche Kosten leicht verfügbar. LRFs haben einen zellulären Gehalt, der dem durch Leukapherese oder in Buffy Coats erhaltenen Gehalt nahe kommt, insbesondere in ihrer Zusammensetzung von CD34 + HP, was sie zu einer bemerkenswert attraktiven Quellemacht 10. Es wurde bereits nachgewiesen, dass LRF als humane HP-Quelle Zellen mit intakten funktionellen Kapazitäten versorgt11. Diese Quelle hat den Vorteil, dass sie reichlich vorhanden und für die Laborforschung erschwinglich ist. In diesem Zusammenhang beschreibt dieser Artikel sukzessive: i) die Extraktion und Auswahl von CD34+ HP aus LRFs; ii) eine zweiphasig optimierte Kultur, die das Engagement von HP in den megakaryozytären Signalweg und die Reifung von MK, das Proplatele emittieren kann, rekapituliert; iii) ein Verfahren zur effizienten Freisetzung von Blutplättchen aus diesen MK; und iv) ein Verfahren zur Phänotypisierung von MK und kultivierten Blutplättchen.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr >
			<td >7-AAD</td>
			<td >Biolegend</td>
			<td >558819</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >ACD</td>
			<td>EFS-Alsace</td>
			<td >NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Anti-CD34-PE&#160;</td>
			<td>Miltenyi biotec</td>
			<td>130-081-002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Anti-CD34-PECy7</td>
			<td >eBioscience</td>
			<td >25-0349-42</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Anti-CD41-Alexa Fluor 488</td>
			<td >Biolegend</td>
			<td >303724</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Anti-CD42a-PE</td>
			<td >BD Bioscience</td>
			<td >559919</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Apyrase</td>
			<td >EFS-Alsace</td>
			<td >NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >BD Trucount Tubes</td>
			<td >BD Bioscience</td>
			<td>340334</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >CD34 MicroBead Kit UltraPure, human&#160;</td>
			<td>Miltenyi biotec</td>
			<td>130-100-453</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Centrifuge</td>
			<td>Heraeus</td>
			<td>Megafuge 1.OR</td>
			<td>Or equivalent material</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Compteur ADAM&#160;</td>
			<td>DiagitalBio</td>
			<td >NA</td>
			<td>Or equivalent material</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Cryotubes</td>
			<td>Dutscher</td>
			<td>55002</td>
			<td>Or equivalent material</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Dextran from leuconostoc spp&#160;</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>31392-50g</td>
			<td>Or equivalent material</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >DMSO Hybri-max&#160;</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D2650</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >EDTA 0.5 M&#160;</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15575-039</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Eppendorf 1,5 mL&#160;</td>
			<td>Dutscher</td>
			<td>616201</td>
			<td>Or equivalent material</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Filtration unit Steriflip PVDF</td>
			<td>Merck Millipore Ltd</td>
			<td>SE1M179M6</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Flow Cytometer</td>
			<td >BD Bioscience</td>
			<td >Fortessa</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Human LDL</td>
			<td>Stemcell technologies</td>
			<td>#02698</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >ILOMEDINE 0,1 mg/1 mL</td>
			<td >Bayer</td>
			<td>MA038EX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Inserts</td>
			<td>Fenwal</td>
			<td>R4R1401</td>
			<td>Or equivalent material</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Laminar flow hood&#160;</td>
			<td>Holten</td>
			<td >NA</td>
			<td>Archived product</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >LS Columms&#160;</td>
			<td>Miltenyi Biotec</td>
			<td>130-042-401&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Lymphoprep</td>
			<td>Stemcell</td>
			<td>7861</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Pen Strep Glutamine (100x)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10378-016</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >PBS (-)</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>14190-169&#160;</td>
			<td>Or equivalent material</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >PGi2</td>
			<td >Sigma</td>
			<td >P6188</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Poches de transferts 600ml&#160;</td>
			<td>Macopharma</td>
			<td>VSE4001XA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Pre-Separation Filters (30&#181;m)</td>
			<td>Miltenyi Biotec</td>
			<td>130-041-407</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >StemRegenin 1 (SR1)</td>
			<td>Stemcell technologies</td>
			<td>#72344</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >StemSpan Expansion Supplement (100x)</td>
			<td>Stemcell technologies</td>
			<td>#02696</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >StemSpan-SFEM&#160;</td>
			<td>Stemcell technologies</td>
			<td>#09650</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Stericup Durapore 0,22&#181;m PVDF</td>
			<td>Merck Millipore Ltd</td>
			<td>SCGVU05RE</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >SVF Hyclone&#160;</td>
			<td>Thermos scientific</td>
			<td>SH3007103</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Syringues 30 mL&#160;</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>SS*30ESE1</td>
			<td>Or equivalent material</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Syringe filters Millex 0,22&#181;M PVDF</td>
			<td>Merck Millipore Ltd</td>
			<td>SLGV033RB</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >TPO</td>
			<td>Stemcell technologies</td>
			<td>#02822</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Tubes 50 mL</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>62.548.004 PP</td>
			<td>Or equivalent material</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Tubes 15 mL&#160;</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>62.554.001 PP</td>
			<td>Or equivalent material</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Tubulures</td>
			<td>B Braun</td>
			<td>4055137</td>
			<td>Or equivalent material</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

leukodepletion filters-derived cd34+ cells as a cell source to study megakaryocyte differentiation and platelet formation

Die In-vitro-Expansion und Differenzierung menschlicher hämatopoetischer Vorläufer in Megakaryozyten, die in der Lage sind, Proplatelette zu verlängern und Blutplättchen freizusetzen, ermöglicht eine eingehende Untersuchung der Mechanismen, die der Thrombozytenbiogenese zugrunde liegen. Verfügbare Kulturprotokolle basieren meist auf hämatopoetischen Vorläufern, die aus Knochenmark oder Nabelschnurblut gewonnen werden, was eine Reihe ethischer, technischer und wirtschaftlicher Bedenken aufwirft. Wenn es bereits verfügbare Protokolle zur Gewinnung von CD34-Zellen aus peripherem Blut gibt, schlägt dieses Manuskript ein einfaches und optimiertes Protokoll zur Gewinnung von CD34+-Zellen aus Leukodepletionsfiltern vor, die in Blutzentren leicht verfügbar sind. Diese Zellen werden aus Leukodepletionsfiltern isoliert, die bei der Herstellung von Bluttransfusionsprodukten verwendet werden, was acht Blutspenden entspricht. Diese Filter sollen verworfen werden. Ein detailliertes Verfahren zur Entnahme hämatopoetischer Vorläufer, die als CD34+-Zellen identifiziert wurden, aus diesen Filtern wird beschrieben. Die Methode, um reife Megakaryozyten zu erhalten, die Proplatele verlängern, während ihre phänotypische Evolution diskutiert wird, wird ebenfalls detailliert beschrieben. Schließlich stellt das Protokoll eine kalibrierte Pipettiermethode vor, um Thrombozyten, die morphologisch und funktionell nativen ähnlich sind, effizient freizusetzen. Dieses Protokoll kann als Grundlage für die Bewertung pharmakologischer Verbindungen dienen, die in verschiedenen Schritten des Prozesses wirken, um die zugrunde liegenden Mechanismen zu sezieren und sich den In-vivo-Thrombozytenausbeuten zu nähern.

Extraktion und Selektion von CD34+ Zellen aus LRFs Hier beschreibt die methode, abgeleitet von Peytour et al.9, die Extraktion und Selektion von CD34+ Zellen aus verworfenen LRFs, die in Blutbanken nach Leukozytenentfernung verfügbar sind. Nach dem Rückspülverfahren werden in der Regel 1,03 x 109 ± 2,45 x10 8 Zellen/LRF (Mittelwert±SEM; n = 155) mit einer Lebensfähigkeit von 94,88 ± 0,10% gewonnen (Abbildung 2A</stron...

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Leukodepletion Filters-Derived CD34+ Cells As a Cell Source to Study Megakaryocyte Differentiation and Platelet Formation

Dieses Protokoll beschreibt detailliert alle Schritte zur Gewinnung von Leukofilter-abgeleiteten CD34+ hämatopoetischen Vorläufern und deren In-vitro-Differenzierung und Reifung zu proplatlettragenden Megakaryozyten, die in der Lage sind, Blutplättchen im Kulturmedium freizusetzen. Dieses Verfahren ist nützlich für die eingehende Analyse zellulärer und molekularer Mechanismen, die die Megakaryopoese kontrollieren.

Leukodepletion Filter-abgeleitete CD34+ Zellen als Zellquelle zur Untersuchung der Megakaryozytendifferenzierung und Thrombozytenbildung

The in vitro expansion and differentiation of human hematopoietic progenitors into megakaryocytes capable of elongating proplatelets and releasing ...

Dieses Protokoll schlägt eine einfache Methode zur Gewinnung menschlicher hämatopoetischer Vorläuferzellen und zur Induktion ihrer Differenzierung in Megakaryozyten vor. Es kann als Grundlage für ein besseres Verständnis der Megakaryopoese dienen Diese Technik verwendet eine Quelle, bietet aber den Vorteil, dass sie für die Laborforschung in der Hämatopoese erschwinglich und reichlich vorhanden ist. Diese Methode wird verwendet, um die Megakaryopoese besser zu verstehen, damit die Zelle, die in der Therapie verwendet werden soll, unter den GMP-Bedingungen hergestellt werden muss, was derzeit nicht der Fall ist.Das Verständnis der Schritte einschließlich der PBMC-Sammlung kann nur mit einer visuellen Demonstration vollständig abgeschlossen werden. Bevor Sie mit einem Experiment beginnen, schließen Sie einen Leukoreduktionsfilter an einen leeren 600-Milliliter-Transferbeutel und an einen Schlauchsatz an. In einer Bio-Sicherheitswerkbank 25 Milliliter gefilterten Elutionspuffer pro Leukoreduktionsfilter in den leeren Beutel injizieren und den Beutelinhalt mit einer 30 Milliliter Spritze schonend durch den Filter absaugen.Übertragen Sie die gesammelten roten Blutkörperchen in ein neues 50-Milliliter-Röhrchen und verdünnen Sie die Zellsuspension um die Hälfte mit 2% Dextran. Mischen Sie gut, um die Blutzellen zu aggregieren und die Zellen 30 Minuten bei Raumtemperatur sedimentieren zu lassen. Wenn sich die roten Blutkörperchen niedergelassen haben, übertragen Sie den Überstand in ein 50-Milliliter-Röhrchen und füllen Sie das Röhrchen mit zwei Millimolaren PBS-EDTA-Lösung.Legen Sie die Hälfte des Überstandes vorsichtig auf 25 Milliliter Dichtegradientenmedium in jeweils zwei 50-Milliliter-Rohren, ohne die Gradientenoberfläche zu stören, und trennen Sie die Zellen durch Dichtegradientenzentrifugation. Verwenden Sie eine Einwegpipette, um die Zellen von jeder Schnittstelle auf ein neues 50-Milliliter-Röhrchen zu übertragen. Waschen Sie die Zellen zweimal in 50 Millilitern von zwei Millimolar PBS EDTA pro Wäsche.Nach der zweiten Wäsche resuspendieren Sie die Pellets in einem einzigen 50 Milliliter Volumen von frischem PBS EDTA zum Zählen. Hier ist es möglich, das Verfahren zu stoppen, indem die gesammelten Zellen während der Nacht bei vier Grad Celsius unter Bewegung gehalten werden. Für die CD34+ Zellselektion bestimmen Sie die Zellzahl und sammeln die Zellen durch Zentrifugation und resuspendieren Sie das Zellpellet in 300 Mikrolitern von zwei Millimolar PBS EDTA pro 10 bis zu den achten Zellen.Fügen Sie das entsprechende Volumen des FC-Rezeptor-blockierenden Reagenz und 50 Mikroliter CD34-Mikroperlen pro 10 zu den achten Zellen hinzu. Nach 30 Minuten bei vier Grad Celsius waschen Sie die Zellen mit zwei millimolaren PBS EDTA und resuspenieren Sie das Pellet in 500 Mikrolitern frischem zwei Millimollem PBS EDTA pro 10 zu den acht Zellen. Befeuchten und dimensionieren Sie die magnetische Säule mit PBS EDTA und geben Sie dann die Probe zur Säule hinzu.Waschen Sie die Säule zweimal mit drei Millilitern von zwei Millimolar PBS EDTA pro Waschgang. Vor dem Ausweichen der CD34+-Zellen mit zwei Fünf-Milliliter-Volumina von zwei Millimolaren PBS EDTA pro Elution. Um die Reinheit der ausgewählten Magnetperlenzellen zu beurteilen, fügen Sie zwei Mikroliter eines geeigneten menschlichen Anti-CD34-Antikörpers zu einem 100 Mikroliter Aliquot der isolierten Zellen hinzu und mischen Sie gut, bevor Sie 15 Minuten bei vier Grad Celsius inkubieren.Nach der Inkubation die Zellen in PBS waschen und das Pellet in 200 Mikrolitern PBS resuspendieren, um die Reinheit der Zellprobe durch Durchflusszytometrie zu analysieren. Sammeln Sie nach der Zählung die CD34 + -Zellen durch Zentrifugation und resuspendieren Sie das Pellet sofort in kalter Lösung eins bis zu einer Dichte von 10 bis zu den sechs Zellen pro Milliliter, bevor Sie die Zellsuspension schnell zu Kaltlösung zwei hinzufügen. Dann legen Sie das Kryorohr sofort für 24 Stunden in einen minus 80 Grad Celsius gefrierenden Gefrierschrank, bevor Sie das Kryorohr in die Flüssigstickstofflagerung überführen.In dieser repräsentativen Studie wurden die Zellen durch Leukoreduktionsfiltration gewonnen, wie mit einer Lebensfähigkeit von etwa 95% gezeigt wurde. Nach magnetischer Perlenauswahl wurde eine mehr als 90% reine CD34 + Zellpopulation erhalten. Die Zellproliferation nimmt typischerweise nach einer Woche der Kultur ab, jedoch ohne signifikante Veränderungen der Zelllebensfähigkeit.Am siebten Tag sollten die CD34 + -Zellen beginnen, CD41 zu exprimieren, einen spezifischen und frühen Marker oder für die Entwicklung von Megakaryozyten und Thrombozyten. Am Tag 10 entwickelt sich die Mehrheit der Zellen in der Kultur typischerweise zu reifen CD41, die Megakaryozyten exprimieren. Am Tag 13 können megakaryozyten-Pro-Thrombozyten-Erweiterung und Thrombozytenfreisetzung durch Lichtmikroskopie beobachtet werden.Die Gesamtzahl der cd41, CD42, 8 positiven Blutplättchen, die in die Kultur freigesetzt werden, kann dann mit einer kalibrierten Anzahl von fluoreszierenden Kügelchen quantifiziert werden. Diese Methode ebnet den Weg, um die zugrunde liegenden Mechanismen der Megakaryopoese zu verbessern und die Thrombozytenausbeute visuell zu erhöhen. Auch wenn diese Methode mühsam erscheint, ist es sehr einfach, dass Sie nur geduldig sein und alle Regionen im Voraus vorbereiten müssen.Obwohl unsere kritischen Bedenken Megakaryopoese sind, erhalten wir CD42-Zellen, die in überhämatopoetischen Signalwegen verwendet werden können.

Research

JoVE Journal

Biology

Testing Visual Sensitivity to the Speed and Direction of Motion in Lizards

Testen visueller Sensibilität für die Geschwindigkeit und Richtung der Bewegung in Lizards

Testing visual sensitivity in any species provides basic information regarding behaviour, evolution, and ecology. However, testing specific features of ...

Forschung

Biologie

Preparation of Pooled Human Platelet Lysate (pHPL) as an Efficient Supplement for Animal Serum-Free Human Stem Cell Cultures

Preparation of Pooled Human Platelet Lysate pHPL as an Efficient Supplement for Animal Serum-Free Human Stem Cell Cultures

Vorbereitung der gepoolten menschlichen Thrombozyten-Lysat (PHPL) als effiziente Ergänzung zum tierischen Serum-freien menschlichen Stammzell-Kulturen

Platelet derived growth factors have been shown to stimulate cell proliferation efficiently in vivo1,2 and in vitro. This effect has been reported for ...

Platelet Adhesion and Aggregation Under Flow using Microfluidic Flow Cells

Adhäsion und Aggregation unter Fluss mit Mikrofluidik-Flow-Cells

Platelet aggregation occurs in response to vascular injury where the extracellular matrix below the endothelium has been exposed. The platelet adhesion ...

Differentiation of Embryonic Stem Cells into Oligodendrocyte Precursors

Differenzierung von embryonalen Stammzellen in Oligodendrozyten Precursors

Oligodendrocytes are the myelinating cells of the central nervous system. For regenerative cell therapy in demyelinating diseases, there is significant ...

Fate Mapping of Human Embryonic Stem Cells by Teratoma Formation

Fate Mapping von humanen embryonalen Stammzellen durch Teratom Formation

Human embryonic stem cells (hESCs) have an unlimited capacity for self-renewal, and the ability to differentiate into cells derived from all three ...

Endothelial Cell Co-culture Mediates Maturation of Human Embryonic Stem Cell to Pancreatic Insulin Producing Cells in a Directed Differentiation Approach

Endothelial Cell Co-Kultur Vermittelt Reifung von humanen embryonalen Stammzellen zu Pankreas-Insulin-produzierenden Zellen in einer gerichteten Differenzierung Ansatz

Embryonic stem cells (ESC) have two main characteristics: they can be indefinitely propagated in vitro in an undifferentiated state and they are ...

Isolation and Differentiation of Stromal Vascular Cells to Beige/Brite Cells

Isolation und Differenzierung von Stroma-Vascular Cells Beige / Brite Cells

Brown adipocytes have the ability to uncouple the  respiratory chain in mitochondria and dissipate chemical energy as heat.  Development of UCP1-positive ...

Endothelial Cell Tube Formation Assay for the In Vitro Study of Angiogenesis

Endothelial Cell Tube Formation Assay for the In Vitro Study of Angiogenesis

Endothelzellen Schlauchbildung Assay für die<em&gt; In-vitro-</em&gt; Studium der Angiogenese

Angiogenesis is a vital process for normal tissue development and wound healing, but is also associated with a variety of pathological conditions. Using ...

Nephrotoxin Microinjection in Zebrafish to Model Acute Kidney Injury

Nephrotoxin Mikroinjektion in Zebrabärbling akuten Nierenschädigung zu Modell

The kidneys are susceptible to harm from exposure to chemicals they filter from the bloodstream. This can lead to organ injury associated with a rapid ...

A 3D Cartographic Description of the Cell by Cryo Soft X-ray Tomography

Eine kartographische 3D-Beschreibung der Zelle durch Kryo-Soft-Röntgentomographie

Imaging techniques are fundamental in order to understand cell organization and machinery in biological research and the related fields. Among these ...