Name: proplatelet formation dynamics of mouse fresh bone marrow explants
Uploaded: 2021-05-20T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Proplatelet Formation Dynamics of Mouse Fresh Bone Marrow Explants at JoVE.com

Os autores desejam agradecer a Jean-Yves Rinckel, Julie Boscher, Patricia Laeuffer, Monique Freund, Ketty Knez-Hippert pela assistência técnica. Este trabalho foi apoiado pela ANR (Agence National de la Recherche) Grant ANR-17-CE14-0001-01 e ANR-18-CE14-0037.

Todos os experimentos em animais foram realizados de acordo com as normas europeias 2010/63/UE e o Comitê de Ética dos Experimentos Animais da Universidade de Estrasburgo (Comité Régional d'Ethique en Matière d'Expérimentation Animale Strasbourg).
1. Preparação de reagentes
<ol><li>Prepare os reagentes conforme descrito na Tabela 1.<ol>
<li>Para o Estoque I, dissolva cada pó separadamente. Certifique-se de que a osmolaridade da preparação é superior a 295 mOsm/L....

<ol>
	<li>Thiery, J. P., Bessis, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanism+of+platelet+genesis;+in+vitro+study+by+cinemicrophotography.">Mechanism of platelet genesis; in vitro study by cinemicrophotography.</a> Reviews in Hematology. 11 (2), 162-174 (1956).</li><li>Becker, R. P., De Bruyn, P. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+transmural+passage+of+blood+cells+into+myeloid+sinusoids+and+the+entry+of+platelets+into+the+sinusoidal+circulation:+A+scanning+electron+microscopic+investigation.">The transmural passage of blood cells into myeloid sinusoids and the entry of platelets into the sinusoidal circulation: A scanning electron microscopic investigation.</a> American Journal of Anatomy. 145 (2), 183-205 (1976).</li><li>Muto, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+scanning+and+transmission+electron+microscopic+study+on+rat+bone+marrow+sinuses+and+transmural+migration+of+blood+cells.">A scanning and transmission electron microscopic study on rat bone marrow sinuses and transmural migration of blood cells.</a> Archivum Histologicum Japonicum. 39 (1), 51-66 (1976).</li><li>Cramer, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrastructure+of+platelet+formation+by+human+megakaryocytes+cultured+with+the+Mpl+ligand.">Ultrastructure of platelet formation by human megakaryocytes cultured with the Mpl ligand.</a> Blood. 89 (7), 2336-2346 (1997).</li><li>Kaushansky, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Promotion+of+megakaryocyte+progenitor+expansion+and+differentiation+by+the+c-Mpl+ligand+thrombopoietin.">Promotion of megakaryocyte progenitor expansion and differentiation by the c-Mpl ligand thrombopoietin.</a> Nature. 369 (6481), 568-571 (1994).</li><li>Strassel, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hirudin+and+heparin+enable+efficient+megakaryocyte+differentiation+of+mouse+bone+marrow+progenitors.">Hirudin and heparin enable efficient megakaryocyte differentiation of mouse bone marrow progenitors.</a> Experimental Cell Research. 318 (1), 25-32 (2012).</li><li>Aguilar, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Importance+of+environmental+stiffness+for+megakaryocyte+differentiation+and+proplatelet+formation.">Importance of environmental stiffness for megakaryocyte differentiation and proplatelet formation.</a> Blood. 128 (16), 2022-2032 (2016).</li><li>Scandola, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+electron+microscopy+to+study+megakaryocytes.">Use of electron microscopy to study megakaryocytes.</a> Platelets. 31 (5), 589-598 (2020).</li><li>Eckly, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+megakaryocyte+development+in+the+native+bone+marrow+environment.">Characterization of megakaryocyte development in the native bone marrow environment.</a> Methods in Molecular Biology. 788, 175-192 (2012).</li><li>Eckly, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Abnormal+megakaryocyte+morphology+and+proplatelet+formation+in+mice+with+megakaryocyte-restricted+MYH9+inactivation.">Abnormal megakaryocyte morphology and proplatelet formation in mice with megakaryocyte-restricted MYH9 inactivation.</a> Blood. 113 (14), 3182-3189 (2009).</li><li>Eckly, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Proplatelet+formation+deficit+and+megakaryocyte+death+contribute+to+thrombocytopenia+in+Myh9+knockout+mice.">Proplatelet formation deficit and megakaryocyte death contribute to thrombocytopenia in Myh9 knockout mice.</a> Journal of Thrombosis and Haemostasis. 8 (10), 2243-2251 (2010).</li><li>Ortiz-Rivero, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=C3G,+through+its+GEF+activity,+induces+megakaryocytic+differentiation+and+proplatelet+formation.">C3G, through its GEF activity, induces megakaryocytic differentiation and proplatelet formation.</a> Cell Communication and Signaling. 16 (1), 101 (2018).</li><li>Junt, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+visualization+of+thrombopoiesis+within+bone+marrow.">Dynamic visualization of thrombopoiesis within bone marrow.</a> Science. 317 (5845), 1767-1770 (2007).</li><li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+models+of+MYH9-related+disease:+mutations+in+nonmuscle+myosin+II-A.">Mouse models of MYH9-related disease: mutations in nonmuscle myosin II-A.</a> Blood. 119 (1), 238-250 (2012).</li><li>Malara, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracellular+matrix+structure+and+nano-mechanics+determine+megakaryocyte+function.">Extracellular matrix structure and nano-mechanics determine megakaryocyte function.</a> Blood. 118 (16), 4449-4453 (2011).</li><li>Balduini, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adhesive+receptors,+extracellular+proteins+and+myosin+IIA+orchestrate+proplatelet+formation+by+human+megakaryocytes.">Adhesive receptors, extracellular proteins and myosin IIA orchestrate proplatelet formation by human megakaryocytes.</a> Journal of Thrombosis and Haemostasis. 6 (11), 1900-1907 (2008).</li></ol>

Aqui descrevemos um método in vitro simples e de baixo custo para avaliar a eficiência dos megacaiócitos para estender proplatelets que cresceram na medula óssea. O modelo de explant de medula óssea para mouse tem quatro principais vantagens. Primeiro, não são necessárias habilidades técnicas avançadas. Em segundo lugar, o tempo necessário para obter proplatelets de prolatos de extensão de megacaito é bastante curto, apenas 6 horas para o método de explant, em comparação com um mínimo de 4 dias ...

A técnica de explant de medula óssea foi desenvolvida pela primeira vez por Thiéry e Bessis em 1956 para descrever a formação de extensões citoplasmáticas de megacariote de ratos como um evento inicial na formação de plaquetas1. Utilizando o contraste de fase e técnicas cinematográficas, esses autores caracterizaram a transformação de megacaiócitos redondos maduros em células trombocitopegênicas "semelhantes a lulas" com extensões citoplasmáticas mostrando movimentos dinâmicos de alongamento e contração. Estes braços ficam progressivamente mais finos até ficarem filiformes com pequenos inchaços ao longo dos braços e nas pontas. Estes alongamentos típicos de megacaiócitos, obtidos in vitro e em mídia líquida, têm certas semelhanças com plaquetas observadas em medula óssea fixa, onde megacariócitos se projetam extensões longas através das paredes sinusoides na circulação sanguínea2,3. A descoberta e clonagem de TPO em 1994 permitiu diferenciar megacariócitos na cultura capaz de formar extensões proplateletas semelhantes às descritas nas explantas de medula óssea4,5,6. No entanto, o amadurecimento do megacaito é muito menos eficiente em condições culturais, notadamente a extensa rede interna de membrana de megacariócitos amadurecidos de medula óssea é subdesenvolvida em megacaiócitos cultivados, dificultando estudos sobre os mecanismos da biogênese plaqueta7,8.
Detalhamos aqui o modelo de explante de medula óssea, baseado em Thiéry e Bessis, para seguir em formação proplatelet em tempo real de megacariócitos de camundongos, que amadureceram totalmente em seu ambiente nativo, contornando assim possíveis artefatos in vitro e interpretações erradas. Os resultados obtidos em camundongos adultos do tipo selvagem são apresentados para ilustrar a capacidade do megacariote de estender proplatelets, sua morfologia e a complexidade dos proplatelets. Também introduzimos uma estratégia de quantificação rápida para validação da qualidade para garantir a precisão e robustez dos dados durante o processo de gravação de megacariote. O protocolo aqui apresentado é a versão mais recente do método publicado como um capítulo de livro anteriormente9.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>5 mL syringes</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>SS+05S1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>21-gauge needles</td>
			<td>BD Microlance</td>
			<td>301155</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCl2.6H2O</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>21108</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coverwall Incubation Chambers</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>70324-02</td>
			<td>Depth : 0,2 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H-3375</td>
			<td>pH adjusted to 7.5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human serum albumin</td>
			<td>VIALEBEX</td>
			<td>authorized medication : n&#176; 3400956446995</td>
			<td>20% (200mg/mL -100mL)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KCl</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P9333</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MgCl2.6H2O</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>BVBW8448</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Cover Glass</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>72200-40</td>
			<td>22 mm x 55 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope</td>
			<td>Leica Microsystems SA, Westlar, Germany</td>
			<td>DMI8 - 514341</td>
			<td>air lens</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>microscope camera</td>
			<td>Leica Microsystems SA, Westlar, Germany</td>
			<td>K5 CMS GmbH -14401137</td>
			<td>image resolution : 4.2 megapixel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse serum</td>
			<td>BioWest</td>
			<td>S2160-010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S7653</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaH2PO4.H2O</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S9638</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaHCO3</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S5761</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PSG 100x</td>
			<td>Gibco, Life Technologies</td>
			<td>1037-016</td>
			<td>10,000 units/mL penicillin, 10,000 &#956;g/mL streptomycin and 29.2 mg/mL glutamine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Razor blade</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>72000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sucrose D (+)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>G8270</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

proplatelet formation dynamics of mouse fresh bone marrow explants

A última etapa da megacaripoiese leva a extensões citoplasmáticas de megacaiócitos maduros, os chamados proplatelets. Muito se tem aprendido sobre a formação proplatelet usando megacariócitos in vitro-diferenciados; no entanto, há uma evidência crescente de que os sistemas de cultura convencionais não recapitulem fielmente o processo de diferenciação/maturação que ocorre dentro da medula óssea. Neste manuscrito, apresentamos um método de explanta inicialmente descrito em 1956 por Thiéry e Bessis para visualizar megacaiócitos que amadureceram em seu ambiente nativo, contornando assim artefatos potenciais e interpretações erradas. As medulas ósseas frescas são coletadas lavando os fêmures de camundongos, fatiadas em seções transversais de 0,5 mm e colocadas em uma câmara de incubação a 37 °C contendo um tampão fisiológico. Megacariócitos tornam-se gradualmente visíveis na periferia explant e são observados até 6 horas sob um microscópio invertido acoplado a uma câmera de vídeo. Com o tempo, os megacaiócitos mudam de forma, com algumas células tendo uma forma esférica e outras desenvolvendo extensões grossas ou estendendo muitas proplatelets finas com ramificações extensas. Tanto investigações qualitativas quanto quantitativas são realizadas. Este método tem a vantagem de ser simples, reproduzível e rápido, pois numerosos megacaiócitos estão presentes, e classicamente metade deles forma proplatelets em 6 horas em comparação com 4 dias para megacariócitos de camundongos cultivados. Além do estudo de camundongos mutantes, uma aplicação interessante desse método é a avaliação direta dos agentes farmacológicos no processo de extensão proplatelet, sem interferir no processo de diferenciação que pode ocorrer nas culturas.

Resultados qualitativos. No início do experimento, todas as células são compactadas na seção de medula óssea. Leva 30 minutos para as células se tornarem claramente visíveis na periferia das explantas. Os megacaiócitos são então reconhecíveis pelo seu grande tamanho e sua evolução pode então ser estudada ao longo do tempo (tamanho, forma, extensão dinâmica, extensão de proplato e liberação de plaquetas)(Figura 2A). Pequenos megacaiócitos têm um diâmetr...

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Proplatelet Formation Dynamics of Mouse Fresh Bone Marrow Explants

Aqui, detalhamos o método de explanta da medula óssea, desde a preparação da amostra até a análise de slides microscópicas, para avaliar a capacidade de megacaiócitos que se diferenciaram em seu ambiente fisiológico para formar proplatelets.

Dinâmica de formação de propulato de plantas de medula óssea fresca

The last stage of megakaryopoiesis leads to cytoplasmic extensions from mature megakaryocytes, the so-called proplatelets. Much has been learned about the ...

O objetivo geral deste procedimento é acompanhar em tempo real a formação de proplatelet a partir de megacariócitos de camundongos, que amadureceram em seu ambiente nativo. Este método tem a vantagem de ser simples, reproduzível e rápido. Pode-se analisar muitos megacaiócitos e visualizar a formação de proplatelets em apenas seis horas, em vez de esperar pelo primeiro dia de cultura quanto aos megacaiócitos de rato in vitro.Uma aplicação interessante deste método é a possibilidade de estudar o efeito do tratamento farmacêutico ou da mutação genética, especificamente na etapa de extensão proplatelet. Aqui não há interferência no processo de diferenciação, como no caso da cultura in vitro. Este vídeo ajuda a garantir esses passos-chave de descarga e corte da medula óssea.Também é explicado como classificar a morfologia e os megacaiócitos, o que é realmente útil para a caracterização de defeitos na doença trombofílica. Para começar, aqueça o tampão de Tyrode a 37 graus Celsius, e ligue a câmara de aquecimento do microscópio para levar a temperatura a 37 graus Celsius. Prepare todas as ferramentas necessárias, como um temporizador, câmaras de incubação, cinco seringas de calibre 21 mililitro, fórceps, uma lâmina de barbear, pipetas Pasteur, lâminas de vidro e tubo de centrífuga de 15 mililitros.Lave a medula óssea com dois mililitros do tampão de Tyrode introduzindo uma agulha de calibre 21 na abertura do fêmur no lado do joelho, e pressione lentamente o êmbolo para recuperar um cilindro de medula intacto. Use uma pipeta de plástico de três minutos para transferir cuidadosamente e suavemente a medula óssea intacta para uma lâmina de vidro. Corte as extremidades da medula que podem ter sido compactadas no momento da descarga.Em seguida, corte seções transversais finas de 0,5 milímetros de espessura usando uma lâmina afiada para evitar danificar os megacaiócitos. Usando uma pipeta de plástico, colete 10 seções em um tubo de um mililitro contendo o tampão de Tyrode. Transfira cuidadosamente as seções para uma câmara de incubação com um diâmetro de 13 milímetros.Aspire o buffer e ajuste o volume para 30 microliters do buffer de Tyrode complementados com 5% de soro do mouse. Posicione as seções à distância. Sele a câmara autoadesiva com um deslizamento de cobertura de 22 por 55 milímetros, inclinando o deslizamento de cobertura para evitar a formação de bolhas de ar.Coloque a câmara na câmara de aquecimento a 37 graus Celsius. Inicie o cronômetro e execute o experimento por seis horas a 37 graus Celsius, faça vídeos para registrar a transformação dos megacaiócitos. Após 30 minutos, as células de medula migram gradualmente para a periferia da explanta formando uma camada mono.Após uma hora de incubação, megacariócitos podem ser identificados pelo seu grande tamanho e núcleos polilobulados. O número de megacaiócitos aumenta após três horas de incubação, e alguns têm extensões longas. Desenhe um mapa para localizar cada seção na câmara de incubação.Após uma hora, identifique os megacaiócitos visíveis, que são células polilobuladas gigantes na periferia de cada seção, e plote suas posições no desenho. Repita este procedimento após três e seis horas. Os megacariócitos são contados manualmente e classificados de acordo com sua morfologia em três e seis horas após a vedação da câmara de incubação.Eles são classificados como pequenos, grandes com intenção grossa, e proplatelet estendendo. Com a ajuda do mapeamento, sua evolução pode ser seguida ao longo do tempo. Os resultados são expressos em uma porcentagem de cada classe em cada momento de observação.Clássicamente, metade dos megacaiócitos visíveis na periferia estendem proplatelets em seis horas para medula óssea de camundongos de tipo selvagem. O destino dos megacaiócitos redondos foi seguido pela captura de imagens sequenciais ao longo do tempo para imaginar como eles formam proplatelets. Uma coisa importante a se lembrar ao tentar este procedimento é manter as explantas a 37 graus Celsius durante a duração do experimento.Uma temperatura diferente pode mudar os resultados. Curiosamente, o protocolo de explant pode ser usado após experimentos de microscopia introvertidos. No final, os megacaiócitos nas explantas de medula óssea serão naturalmente fluorescentes, e seu comportamento pode ser facilmente investigado.Isso possibilita combinar tratamento diferente nos mesmos animais e, assim, reduzir o número de camundongos. Em conclusão, o método de explant é rápido, simples e fornece muitas informações sobre a capacidade de megacaiócitos naturais para proplatelets externos. O achado qualitativo e quantitativo resultante é fundamental para nossa compreensão da doença trombofílica.em um contexto fisiológico ou patológico.

Research

JoVE Journal

Biology

Culture of myeloid dendritic cells from bone marrow precursors

Cultura de células dendríticas mielóides a partir de precursores da medula óssea

Myeloid dendritic cells (DCs) are frequently used to study the interactions between innate and adaptive immune mechanisms and the early response to ...

Biologia

Generation of Bone Marrow Derived Murine Dendritic Cells for Use in 2-photon Imaging

Geração de Medula Óssea Derivado Células Dendríticas murino para uso em dois fótons de imagem

Several methods for the preparation of murine dendritic cells can be found in the literature. Here, we present a method that produces greater than 85% ...

The Preparation of Primary Hematopoietic Cell Cultures From Murine Bone Marrow for Electroporation

Elaboração de culturas de células primárias hematopoéticas de medula óssea de camundongos para Eletroporação

It is becoming increasingly apparent that electroporation is the most effective way to introduce plasmid DNA or siRNA into primary cells. The Gene Pulser ...

Homing of Hematopoietic Cells to the Bone Marrow

Homing das células hematopoiéticas da medula óssea

Homing is the phenomenon whereby transplanted hematopoietic cells are able to travel to and engraft or establish residence in the bone marrow.  Various ...

In Vivo 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

In Vivo 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

In Vivo Rastreamento 4-Dimensional de tronco hematopoéticas e células progenitoras em adultos mouse na calota craniana de Medula Óssea

Through a delicate balance between quiescence and proliferation, self renewal and production of differentiated progeny, hematopoietic stem cells (HSCs) ...

Osteoclast Derivation from Mouse Bone Marrow

Osteoclastos Derivação do mouse Medula Óssea

Osteoclasts are highly specialized cells that are derived from the monocyte/macrophage lineage of the bone marrow. Their unique ability to resorb both the ...

Expression of Fluorescent Fusion Proteins in Murine Bone Marrow-derived Dendritic Cells and Macrophages

Expressão de proteínas da fusão fluorescente em murino derivadas da medula óssea as células dendríticas e macrófagos

Dendritic cells and macrophages are crucial cells that form the first line of defense against pathogens. They also play important roles in the initiation ...

Isolation, Purification, and Differentiation of Osteoclast Precursors from Rat Bone Marrow

Isolamento, purificação e diferenciação de precursores de osteoclast da medula óssea de ratos

Osteoclasts are large, multinucleated, and bone-resorbing cells of the monocyte-macrophage lineage that are formed by the fusion of monocytes or ...

In Vivo Two-photon Imaging of Megakaryocytes and Proplatelets in the Mouse Skull Bone Marrow

In Vivo Two-photon Imaging of Megakaryocytes and Proplatelets in the Mouse Skull Bone Marrow

In Vivo Imagem de dois fótons de megacariócitos e proplatelets na medula óssea do crânio do rato

Platelets are produced by megakaryocytes, specialized cells located in the bone marrow. The possibility to image megakaryocytes in real time and their ...

Flow Cytometry Analysis of Murine Bone Marrow Hematopoietic Stem and Progenitor Cells and Stromal Niche Cells

Análise por Citometria de Fluxo de Medula Óssea Purina, Células-Tronco e Progenitoras Hematopoéticas e Células de Nicho Estromal

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