Name: minimizing post-infusion portal vein bleeding during intrahepatic islet transplantation in mice
Uploaded: 2021-05-10T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Minimizing Post-Infusion Portal Vein Bleeding during Intrahepatic Islet Transplantation in Mice at JoVE.com

Denne undersøgelse blev støttet af Institut for Veterananliggender (VA-ORD BLR&D Merit I01BX004536) og National Institute of Health bevillinger # 1R01DK105183, DK120394, DK118529, til HW. Vi vil gerne takke dig Mr. Michael Lee og fru Lindsay Swaby for sprogredigering

Alle procedurer blev udført med godkendelse fra Institutional Animal Care and Use Committees ved Medical University of South Carolina og Ralph H Johnson Medical Center i Charleston.
1. Diabetes induktion ved hjælp af streptozotocin (STZ)
<ol><li>Forberedelse af modtagermus:<ol>
<li>Vej alle mus individuelt.</li>
		<li>Kontroller blodsukkerniveauet fra en haleveneblodprøve ved hjælp af et glucometer.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Bestemmelse af STZ-dosis for tre forskellige scenarier:<ol>
<li>Fo...

<ol>
	<li>Pellegrini, S., Cantarelli, E., Sordi, V., Nano, R., Piemonti, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+state+of+the+art+of+islet+transplantation+and+cell+therapy+in+type+1+diabetes.">The state of the art of islet transplantation and cell therapy in type 1 diabetes.</a> Acta Diabetology. 53 (5), 683-691 (2016).</li><li>Ballinger, W. F., Lacy, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transplantation+of+intact+pancreatic+islets+in+rats.">Transplantation of intact pancreatic islets in rats.</a> Surgery. 72 (2), 175-186 (1972).</li><li>Wright, J. R., Hauptfeld, V., Lacy, P. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+Ia+antigen+expression+on+murine+islet+parenchymal+cells+does+not+diminish+islet+allograft+survival.">Induction of Ia antigen expression on murine islet parenchymal cells does not diminish islet allograft survival.</a> American Journal of Pathology. 134 (2), 237-242 (1989).</li><li>Toyofuku, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Natural+killer+T-cells+participate+in+rejection+of+islet+allografts+in+the+liver+of+mice.">Natural killer T-cells participate in rejection of islet allografts in the liver of mice.</a> Diabetes. 55 (1), 34-39 (2006).</li><li>Goss, J. A., Nakafusa, Y., Finke, E. H., Flye, M. W., Lacy, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+tolerance+to+islet+xenografts+in+a+concordant+rat-to-mouse+model.">Induction of tolerance to islet xenografts in a concordant rat-to-mouse model.</a> Diabetes. 43 (1), 16-23 (1994).</li><li>Hara, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+mouse+model+for+studying+intrahepatic+islet+transplantation.">A mouse model for studying intrahepatic islet transplantation.</a> Transplantation. 78 (4), 615-618 (2004).</li><li>Shapiro, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Islet+transplantation+in+seven+patients+with+type+1+diabetes+mellitus+using+a+glucocorticoid-free+immunosuppressive+regimen.">Islet transplantation in seven patients with type 1 diabetes mellitus using a glucocorticoid-free immunosuppressive regimen.</a> New England Journal of Medicine. 343 (4), 230-238 (2000).</li><li>Wang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alpha-1+antitrypsin+enhances+islet+engraftment+by+suppression+of+instant+blood-mediated+inflammatory+reaction.">Alpha-1 antitrypsin enhances islet engraftment by suppression of instant blood-mediated inflammatory reaction.</a> Diabetes. 66 (4), 970-980 (2017).</li><li>Gou, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alpha-1+antitrypsin+suppresses+macrophage+activation+and+promotes+islet+graft+survival+after+intrahepatic+islet+transplantation.">Alpha-1 antitrypsin suppresses macrophage activation and promotes islet graft survival after intrahepatic islet transplantation.</a> American Journal of Transplantation. , (2020).</li><li>Contreras, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activated+protein+C+preserves+functional+islet+mass+after+intraportal+transplantation:+A+novel+link+between+endothelial+cell+activation,+thrombosis,+inflammation,+and+islet+cell+death.">Activated protein C preserves functional islet mass after intraportal transplantation: A novel link between endothelial cell activation, thrombosis, inflammation, and islet cell death.</a> Diabetes. 53 (11), 2804-2814 (2004).</li><li>Moberg, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Production+of+tissue+factor+by+pancreatic+islet+cells+as+a+trigger+of+detrimental+thrombotic+reactions+in+clinical+islet+transplantation.">Production of tissue factor by pancreatic islet cells as a trigger of detrimental thrombotic reactions in clinical islet transplantation.</a> Lancet. 360 (9350), 2039-2045 (2002).</li><li>Melzi, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intrahepatic+islet+transplant+in+the+mouse:+functional+and+morphological+characterization.">Intrahepatic islet transplant in the mouse: functional and morphological characterization.</a> Cell Transplantation. 17 (12), 1361-1370 (2008).</li><li>Wang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Donor+treatment+with+carbon+monoxide+can+yield+islet+allograft+survival+and+tolerance.">Donor treatment with carbon monoxide can yield islet allograft survival and tolerance.</a> Diabetes. 54 (5), 1400-1406 (2005).</li><li>Desai, C. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+liver+histopathology+on+islet+cell+engraftment+in+the+model+mimicking+autologous+islet+cell+transplantation.">Effect of liver histopathology on islet cell engraftment in the model mimicking autologous islet cell transplantation.</a> Islets. 9 (6), 140-149 (2017).</li><li>Cui, W., Angsana, J., Wen, J., Chaikof, E. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Liposomal+formulations+of+thrombomodulin+increase+engraftment+after+intraportal+islet+transplantation.">Liposomal formulations of thrombomodulin increase engraftment after intraportal islet transplantation.</a> Cell Transplantation. 19 (11), 1359-1367 (2010).</li><li>Cui, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thrombomodulin+improves+early+outcomes+after+intraportal+islet+transplantation.">Thrombomodulin improves early outcomes after intraportal islet transplantation.</a> American Journal of Transplantation. 9 (6), 1308-1316 (2009).</li><li>Proto, C., Grasso, G., Fassio, P. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hepatoparenchymal+clearance+of+indocyanine+green+in+infectious+hepatitis.">Hepatoparenchymal clearance of indocyanine green in infectious hepatitis.</a> Giornale di Malattie Infettive e Parassitarie. 20 (9), 845-851 (1968).</li><li>Cabral, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Purification+of+hepatocytes+and+sinusoidal+endothelial+cells+from+mouse+liver+perfusion.">Purification of hepatocytes and sinusoidal endothelial cells from mouse liver perfusion.</a> Journal of Visualized Experiments. (132), e56993 (2018).</li><li>Khatri, R., Hussmann, B., Rawat, D., Gurol, A. O., Linn, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraportal+transplantation+of+pancreatic+islets+in+mouse+model.">Intraportal transplantation of pancreatic islets in mouse model.</a> Journal of Visualized Experiments. (135), e57559 (2018).</li><li>Wang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autologous+mesenchymal+stem+cell+and+islet+cotransplantation:+Safety+and+efficacy.">Autologous mesenchymal stem cell and islet cotransplantation: Safety and efficacy.</a> Stem Cells Translational Medicine. 7 (1), 11-19 (2018).</li></ol>

I denne undersøgelse er der påvist to forbedrede procedurer, der kan forhindre blødning og kan reducere musens dødelighed under musens IIT. Denne undersøgelse gør det muligt for forskere at visualisere ø-transplantationsmodellen, der er unik ved at studere det øjeblikkelige blodmedierede inflammatoriske respons efter transplantation. IIT-modellen er en karakteristisk model til undersøgelse af øcelleoverlevelse og leveriskæmiske skader som reaktion på ø-transplantation19. Her forfinede...

Intraportal ø-transplantation (IIT) via portalvenen er den mest anvendte metode til transplantation af humane øer i kliniske omgivelser. Musens IIT-model giver en fantastisk mulighed for at studere ø-transplantation og teste lovende interventionsmetoder, der kan øge effektiviteten af ø-transplantation1. IIT blev først beskrevet i 1970'erne og brugt af flere grupper1,2,3,4,5. Det genvandt popularitet efter gennembruddet i menneskelig ø-transplantation i år 20006,7. Imidlertid brugte de fleste ø-transplantationsundersøgelser nyrekapslen som et foretrukket sted for eksperimentel ø-transplantation på grund af dens lette succes. Tværtimod er IIT mere teknisk udfordrende og mindre hyppigt anvendt til holmtransplantationsundersøgelser8,9. I modsætning til IIT lider øer, der transplanteres under nyrekapslen, imidlertid ikke af den umiddelbare blodmedierede inflammatoriske reaktion, der er karakteriseret ved trombose, betændelse og levervævsiskæmi, og har således bedre funktion end øer, der transplanteres i leveren. Nyrekapselmodellen kan derfor ikke fuldt ud efterligne de belastninger, som holme støder på ved transplantation af menneskelige øer10,11,12.
En af de største komplikationer ved IIT hos mus er blødning fra injektionsstedet efter transplantation, hvilket kan forårsage 10-30 % af dødeligheden blandt forskellige musestammer12. I dette papir er der udviklet to raffinerede tilgange til at stoppe blødning hurtigere og mere sikkert og for at reducere musens dødelighed efter en IIT. Visuel demonstration af disse raffinerede detaljer vil hjælpe forskere med at identificere de vigtigste trin i denne teknisk udfordrende procedure. Desuden blev placeringen af ø-transplantaterne i modtagerens lever bestemt ved histologisk undersøgelse af hematoxylin og Eosin (H&E) farvet levervæv (hele sektionen), der bærer transplanterede øer.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>10% Neutral buffered formalin v/v</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>23426796</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 mL Syringe with needle</td>
			<td>AHS</td>
			<td>AH01T</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20 mL Syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>301031</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>25G x 5/8&#34; hypodermic needles</td>
			<td>BD</td>
			<td>305122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alcohol prep pads, sterile</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>22-363-750</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Animal Anesthesia system</td>
			<td>VetEquip, Inc.</td>
			<td>901806</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine hydrochloride, injection</td>
			<td>Par Sterile Products, LLC</td>
			<td>NDC 42023-179-05</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge tubes, 15 mL</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>0553859A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CMRL-1066</td>
			<td>Corning</td>
			<td>15110CV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>Corning</td>
			<td>10013CV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol, absolute (200 proof), molecular biology grade</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP2818500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Extra fine Micro Dissecting scissors 4&#8221; straight sharp</td>
			<td>Roboz Surgical Instrument Co.</td>
			<td>RS-5882</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum (FBS)</td>
			<td>Corning</td>
			<td>35011CV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FreeStyle&#160; Glucose meter</td>
			<td>Abbott</td>
			<td>Lite</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FreeStyle Blood Glucose test strips</td>
			<td>Abbott</td>
			<td>Lite</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gelfoam (absorbable gelatin sponge, USP)</td>
			<td>Pharmacia &#38; Upjohn Company</td>
			<td>34201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Graefe forceps 4&#8221; extra delicate tip</td>
			<td>Roboz Surgical Instrument Co.</td>
			<td>RS-5136</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heated pad</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>B07HMKMBKM</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hegar-Baumgartner Needle Holder 5.25&#8221;</td>
			<td>Roboz Surgical Instrument Co.</td>
			<td>RS-7850</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin syringe with 27-gauge needle</td>
			<td>BD</td>
			<td>879588</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iodine prep pads</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>19-027048</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Piramal Critical Care</td>
			<td>NDC 66794-017-25</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin/streptomycin (P/S)</td>
			<td>HyClone</td>
			<td>SV30010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polypropylene Suture 4-0</td>
			<td>Med-Vet International</td>
			<td>MV-8683</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polypropylene Suture 5-0</td>
			<td>Med-Vet International</td>
			<td>MV-8661</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium chloride, 0.9% intravenous solution</td>
			<td>VWR</td>
			<td>2B1322Q</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Streptozocin (STZ)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S0130</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical drape, sterile</td>
			<td>Med-Vet International</td>
			<td>DR1826</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue Cassette</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>22-272416</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

minimizing post-infusion portal vein bleeding during intrahepatic islet transplantation in mice

Selvom leveren i øjeblikket accepteres som det primære transplantationssted for humane øer i kliniske omgivelser, transplanteres holme under nyrekapslen i de fleste prækliniske ø-transplantationsundersøgelser af gnavere. Denne model er almindeligt anvendt, fordi murine intrahepatisk ø-transplantation er teknisk udfordrende, og en høj procentdel af mus kan dø af kirurgiske komplikationer, især blødning fra injektionsstedet efter transplantation. I denne undersøgelse demonstreres to procedurer, der kan minimere forekomsten af veneblødning efter infusionsportalen. Den første metode anvender en absorberbar hæmostatisk gelatinesvamp på injektionsstedet, og den anden metode indebærer at trænge ind i ø-injektionsnålen gennem fedtvævet først og derefter ind i portalvenen ved at bruge fedtvævet som en fysisk barriere for at stoppe blødning. Begge metoder kunne effektivt forhindre blødningsinduceret musedød. Hele leversektionen, der viser ø-fordeling og tegn på ø-trombose efter transplantation, et typisk træk ved intrahepatisk ø-transplantation, blev præsenteret. Disse forbedrede protokoller forfiner de intrahepatiske ø-transplantationsprocedurer og kan hjælpe laboratorier med at etablere proceduren for at studere ø-overlevelse og -funktion i prækliniske omgivelser.

Vi udførte syngeneiske og xenogene ø-transplantationer via portalvenen. Islet graft funktion blev observeret på en dosisafhængig måde i begge ø transplantationsmodeller. I den syngeneiske ø-transplantationsmodel ved hjælp af C57BL/6-mus førte transplantation af 250 øer til forbigående normoglykæmi, før mus vendte tilbage til hyperglykæmi. Mus, der fik 500 øer, nåede og opretholdt normoglykæmi ud over 30 dage efter transplantationen (figur 2A). Mus i begge grupper viste øget...

Watch this Scientific Journal Video about Minimizing Post-Infusion Portal Vein Bleeding during Intrahepatic Islet Transplantation in Mice at JoVE.com

Minimizing Post-Infusion Portal Vein Bleeding during Intrahepatic Islet Transplantation in Mice

Her præsenterer vi raffinerede kirurgiske procedurer for vellykket udførelse af intraportal ø-transplantation, en klinisk relevant, men teknisk udfordrende kirurgisk procedure, hos mus.

Minimering af postinfusionsportal veneblødning under intrahepatisk ø-transplantation hos mus

Although the liver is currently accepted as the primary transplantation site for human islets in clinical settings, islets are transplanted under the ...

Lever er et primært sted for transplantation i den menneskelige ø kliniske indstilling. Mus intrahepatisk ø-transplantation er teknisk udfordrende, og en høj procentdel af mus kan dø af kirurgiske komplikationer, især blødning. I denne undersøgelse kunne de to metoder, vi viste begge, effektivt forhindre blødningsinduceret musedød.Vores metode kan anvendes til forskning i leverkræft og andre leversygdomme ved at tillade injektion af kræftceller, mesenkymale stamceller og hepatocyt direkte til leveren. Til at begynde med skal du løsne en menneskelig ø-kultur med blid ridser. Brug en 1 kubikcentimeter sprøjte til at plukke 300 til 350 øer i sterile 1,5 ml mikrocentrifugerør på is.Når alle holmene er plukket, centrifugeres rørene i 10 sekunder for at sedimentere cellerne. Kassér alle undtagen et lille volumen supernatant for at forhindre pelletstab og resuspend holmene i 200 mikroliter HBSS indeholdende 5% BSA. Læg de resuspenderede øer i en 5 ml insulinsprøjte, og vend sprøjtenålens ende i 1 minut for at lade øerne sætte sig ved stemplet.Tryk på stemplet for at fjerne eventuelle bobler, og hold ca. 100 til 150 mikroliter opløsning i sprøjten, og inverter sprøjten med blid tapning for at fordele holmene jævnt. Efter at have bekræftet manglende reaktion på pedalrefleks, skal du anvende salve på øjnene for at forhindre tørring. Barber maven på den abestede mus for at fjerne pelsen og desinficere det kirurgiske område med tre skiftevis klude på 2% jod og 75% alkohol.Lav derefter et snit på 1 til 1,5 centimeter i maven og åbn bughulen. Placer et sterilt stykke gasbind omkring snittet og brug tang eller bomuldsspidser til forsigtigt at overføre tarmen til gasbindet. Derefter dækkes tarmen med et stykke saltvandsgennemblødt gasbind og udsætter portalvenen.For at stoppe ø-overførselsinduceret blødning ved hjælp af gelskum skal du holde nålen med skråningen nedad og placere nålespidsen med åbningen parallelt med portalvenevæggen, før nålen indsættes i portalvenen. Træk stemplet tilbage for at trække 20 til 50 mikroliter blod ind i sprøjten for at blande med holmene, før øerne infunderes i portalvenen, mens stemplet gentagne gange deprimeres og trækkes tilbage. Når alle holmene er leveret, anbringes et ca. 5 gange 5 centimeter stykke gelskum over injektionsstedet.Brug en bomuldsspids til at trykke gelskummet ned, mens du fjerner nålen fra portalvenen. Hold gelen på plads i ca. 2 minutter, og rul gelskummet for at sikre, at det dækker portalvenen. Når blødningen er stoppet, skal du forsigtigt returnere tarmen til bughulen i den oprindelige position og injicere 500 mikroliter varmt saltvand i bukhulen.Brug suturer til at lukke muskel- og hudlagene. Placer derefter musen i et rent bur på en varmepude med overvågning indtil fuldstændig genopretning fra anæstesi, administration af analgesi hver 12. time og opvarm i 48 timer. For at stoppe ø-overførselsinduceret blødning ved hjælp af en fedtpude, efter at have udsat portalvenen som demonstreret, skal du bruge to bomuldsspidser til at holde den udsatte vene på venstre og højre side og lokalisere fedtvævspuden mellem tolvfingertarmen og portalvenen.Penetrer fedtpuden med nålespidsen inden indsættelse i portalvenen. Holmene tilføres portalvenen som påvist. Når alle holmene er leveret, skal du trykke på fedtvævet med en bomuldsspids i ca. 1 minut, mens nålen fjernes fra venen.Derefter returneres tarmen til bughulen og udføres resten af de postkirurgiske plejeprocedurer som påvist. Virkningerne af ø-transplantationen er dosisafhængige, da normal glykæmi observeres 30 dage efter syngeneisk ø-transplantation, når 500 holme overføres, men kun forbigående normoglykæmi observeres, når 250 øer leveres, hvor musene vender tilbage til hyperglykæmi 10 dage efter transplantationen. En øget kropsvægt observeres i begge grupper og identiske reaktioner observeres, når humane øer transplanteres i diabetiske NOD-SCID-mus, med normoglykæmi observeret, når højere antal ø-ækvivalenter transplanteres, men ikke mindre antal.Størstedelen af de mus, der har blødning efter overførslen, dør efter operationen, mens musene uden blødning overlever. 28 dage efter transplantationen afslører insulinfarvning en jævn fordeling af den menneskelige ø i hele leveren, for det meste tæt på blodkarrene. Ud over insulin observeres også fibrin og polymorfonuklear cellefiltrering inden for de transplanterede humane øer.Intrahepatisk ø-transplantation vil generere et stort hul i portalvenen, der kan forårsage blødning. Brug af vores to forbedrede procedurer kan forhindre blødning og reducere dødeligheden efter ø-transplantation. Intraportal ø-transplantationsmodellen kan efterligne klinisk human ø-transplantation.Vores raffinerede procedurer kan føre til højere overlevelsesrater for modtagere, hvilket muliggør yderligere øfunktionsundersøgelse efter transplantation.

Research

JoVE Journal

Medicine

A Method for Murine Islet Isolation and Subcapsular Kidney Transplantation

Since the early pioneering work of Ballinger and Reckard demonstrating that transplantation of islets of Langerhans into diabetic rodents could normalize ...

3-Dimensional Resin Casting and Imaging of Mouse Portal Vein or Intrahepatic Bile Duct System

3-dimensionelt Resin Støbning og Imaging of Mouse Portal Vein eller Intrahepatisk galdegang System

In  organs, the correct architecture of vascular and ductal structures is  indispensable for proper physiological function, and the formation and  ...

Direct Pressure Monitoring Accurately Predicts Pulmonary Vein Occlusion During Cryoballoon Ablation

Direkte trykmålekomponenter nøjagtigt Forudsiger lungevene okklusion under Cryoballoon Ablation

Cryoballoon  ablation (CBA) is an established therapy for atrial fibrillation (AF).  Pulmonary vein (PV) occlusion is essential for achieving antral ...

Generation of Subcutaneous and Intrahepatic Human Hepatocellular Carcinoma Xenografts in Immunodeficient Mice

Generering af Subkutan og Intrahepatisk Menneskelige hepatocellulært carcinom xenotransplantater i immunsvækkede mus

In  vivo experimental models of hepatocellular carcinoma (HCC) that recapitulate  the human disease provide a valuable platform for research into disease  ...

Heterotopic Auxiliary Rat Liver Transplantation With Flow-regulated Portal Vein Arterialization in Acute Hepatic Failure

Heterotop Auxiliary Rat levertransplanterede patienter med Flow-regulerede portåren Arterialization i akut leversvigt

In acute hepatic failure auxiliary liver transplantation is an interesting alternative approach. The aim is to provide a temporary support until the ...

Heterotopic Cervical Heart Transplantation in Mice

Heterotopisk Livmoderhalskræft hjertetransplantation i mus

The heterotopic cervical heart transplantation in mice is a valuable tool in transplant and cardiovascular research. The cuff technique greatly simplifies ...

Using the Sleeve Technique in a Mouse Model of Aortic Transplantation - An Instructional Video

Ved hjælp af ærmet teknik i en musemodel af aorta Transplantation - en instruktions Video

Orthotopic aortic transplantation using the sleeve technique reduces injury to the aorta with failure rate of only 10-20%. The time to anastomose the ...

Rat Model of the Associating Liver Partition and Portal Vein Ligation for Staged Hepatectomy (ALPPS) Procedure

Rat Model of the Associating Liver Partition and Portal Vein Ligation for Staged Hepatectomy ALPPS Procedure

Rotte Model af inddrage fiskelever Partition og Portal vene ligatur procedure, iscenesatte Hepatectomy (ALPPS)

Recent clinical data support an aggressive surgical approach to both primary and metastatic liver tumors. For some indications, like colorectal liver ...

Intrasplenic Transplantation of Hepatocytes After Partial Hepatectomy in NOD.SCID Mice

Intrasplenic Transplantation af hepatocytter efter delvis Hepatectomy i NOD. SCID mus

Partial hepatectomy is a versatile and reproducible method to study liver regeneration and the effect of cell based therapeutics in various pathological ...

Blood Collection Through Subclavian Vein Puncture in Mice

Blod opsamling gennem subclavian venepunktur i mus

The mouse is the foremost mammalian model for studying human disease and human health. However, blood sample collection from mice is challenging in ...