Name: minimizing post-infusion portal vein bleeding during intrahepatic islet transplantation in mice
Uploaded: 2021-05-10T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Minimizing Post-Infusion Portal Vein Bleeding during Intrahepatic Islet Transplantation in Mice at JoVE.com

Denne studien ble støttet av Department of Veterans Affairs (VA-ORD BLR&D Merit I01BX004536), og National Institute of Health grants # 1R01DK105183, DK120394, DK118529, til HW. Vi vil takke deg Mr. Michael Lee og Ms. Lindsay Swaby for språkredigering

Alle prosedyrer ble utført med godkjenning fra Institutional Animal Care and Use Committees ved Medical University of South Carolina og Ralph H Johnson Medical Center i Charleston.
1. Diabetesinduksjon ved bruk av streptozotocin (STZ)
<ol><li>Forberedelse av mottakermus:<ol>
<li>Vei alle mus individuelt.</li>
		<li>Sjekk blodsukkernivået fra en blodprøve med halevener ved hjelp av et glukometer.</li>
	</ol>
</li>
	<li>STZ dosebestemmelse for tre forskjellige scenarier:<ol>
<li>For mus med...

<ol>
	<li>Pellegrini, S., Cantarelli, E., Sordi, V., Nano, R., Piemonti, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+state+of+the+art+of+islet+transplantation+and+cell+therapy+in+type+1+diabetes.">The state of the art of islet transplantation and cell therapy in type 1 diabetes.</a> Acta Diabetology. 53 (5), 683-691 (2016).</li><li>Ballinger, W. F., Lacy, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transplantation+of+intact+pancreatic+islets+in+rats.">Transplantation of intact pancreatic islets in rats.</a> Surgery. 72 (2), 175-186 (1972).</li><li>Wright, J. R., Hauptfeld, V., Lacy, P. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+Ia+antigen+expression+on+murine+islet+parenchymal+cells+does+not+diminish+islet+allograft+survival.">Induction of Ia antigen expression on murine islet parenchymal cells does not diminish islet allograft survival.</a> American Journal of Pathology. 134 (2), 237-242 (1989).</li><li>Toyofuku, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Natural+killer+T-cells+participate+in+rejection+of+islet+allografts+in+the+liver+of+mice.">Natural killer T-cells participate in rejection of islet allografts in the liver of mice.</a> Diabetes. 55 (1), 34-39 (2006).</li><li>Goss, J. A., Nakafusa, Y., Finke, E. H., Flye, M. W., Lacy, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+tolerance+to+islet+xenografts+in+a+concordant+rat-to-mouse+model.">Induction of tolerance to islet xenografts in a concordant rat-to-mouse model.</a> Diabetes. 43 (1), 16-23 (1994).</li><li>Hara, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+mouse+model+for+studying+intrahepatic+islet+transplantation.">A mouse model for studying intrahepatic islet transplantation.</a> Transplantation. 78 (4), 615-618 (2004).</li><li>Shapiro, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Islet+transplantation+in+seven+patients+with+type+1+diabetes+mellitus+using+a+glucocorticoid-free+immunosuppressive+regimen.">Islet transplantation in seven patients with type 1 diabetes mellitus using a glucocorticoid-free immunosuppressive regimen.</a> New England Journal of Medicine. 343 (4), 230-238 (2000).</li><li>Wang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alpha-1+antitrypsin+enhances+islet+engraftment+by+suppression+of+instant+blood-mediated+inflammatory+reaction.">Alpha-1 antitrypsin enhances islet engraftment by suppression of instant blood-mediated inflammatory reaction.</a> Diabetes. 66 (4), 970-980 (2017).</li><li>Gou, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alpha-1+antitrypsin+suppresses+macrophage+activation+and+promotes+islet+graft+survival+after+intrahepatic+islet+transplantation.">Alpha-1 antitrypsin suppresses macrophage activation and promotes islet graft survival after intrahepatic islet transplantation.</a> American Journal of Transplantation. , (2020).</li><li>Contreras, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activated+protein+C+preserves+functional+islet+mass+after+intraportal+transplantation:+A+novel+link+between+endothelial+cell+activation,+thrombosis,+inflammation,+and+islet+cell+death.">Activated protein C preserves functional islet mass after intraportal transplantation: A novel link between endothelial cell activation, thrombosis, inflammation, and islet cell death.</a> Diabetes. 53 (11), 2804-2814 (2004).</li><li>Moberg, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Production+of+tissue+factor+by+pancreatic+islet+cells+as+a+trigger+of+detrimental+thrombotic+reactions+in+clinical+islet+transplantation.">Production of tissue factor by pancreatic islet cells as a trigger of detrimental thrombotic reactions in clinical islet transplantation.</a> Lancet. 360 (9350), 2039-2045 (2002).</li><li>Melzi, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intrahepatic+islet+transplant+in+the+mouse:+functional+and+morphological+characterization.">Intrahepatic islet transplant in the mouse: functional and morphological characterization.</a> Cell Transplantation. 17 (12), 1361-1370 (2008).</li><li>Wang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Donor+treatment+with+carbon+monoxide+can+yield+islet+allograft+survival+and+tolerance.">Donor treatment with carbon monoxide can yield islet allograft survival and tolerance.</a> Diabetes. 54 (5), 1400-1406 (2005).</li><li>Desai, C. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+liver+histopathology+on+islet+cell+engraftment+in+the+model+mimicking+autologous+islet+cell+transplantation.">Effect of liver histopathology on islet cell engraftment in the model mimicking autologous islet cell transplantation.</a> Islets. 9 (6), 140-149 (2017).</li><li>Cui, W., Angsana, J., Wen, J., Chaikof, E. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Liposomal+formulations+of+thrombomodulin+increase+engraftment+after+intraportal+islet+transplantation.">Liposomal formulations of thrombomodulin increase engraftment after intraportal islet transplantation.</a> Cell Transplantation. 19 (11), 1359-1367 (2010).</li><li>Cui, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thrombomodulin+improves+early+outcomes+after+intraportal+islet+transplantation.">Thrombomodulin improves early outcomes after intraportal islet transplantation.</a> American Journal of Transplantation. 9 (6), 1308-1316 (2009).</li><li>Proto, C., Grasso, G., Fassio, P. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hepatoparenchymal+clearance+of+indocyanine+green+in+infectious+hepatitis.">Hepatoparenchymal clearance of indocyanine green in infectious hepatitis.</a> Giornale di Malattie Infettive e Parassitarie. 20 (9), 845-851 (1968).</li><li>Cabral, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Purification+of+hepatocytes+and+sinusoidal+endothelial+cells+from+mouse+liver+perfusion.">Purification of hepatocytes and sinusoidal endothelial cells from mouse liver perfusion.</a> Journal of Visualized Experiments. (132), e56993 (2018).</li><li>Khatri, R., Hussmann, B., Rawat, D., Gurol, A. O., Linn, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraportal+transplantation+of+pancreatic+islets+in+mouse+model.">Intraportal transplantation of pancreatic islets in mouse model.</a> Journal of Visualized Experiments. (135), e57559 (2018).</li><li>Wang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autologous+mesenchymal+stem+cell+and+islet+cotransplantation:+Safety+and+efficacy.">Autologous mesenchymal stem cell and islet cotransplantation: Safety and efficacy.</a> Stem Cells Translational Medicine. 7 (1), 11-19 (2018).</li></ol>

I denne studien er to forbedrede prosedyrer som kan forhindre blødning og kan redusere musedødeligheten under mus-IIT, demonstrert. Denne studien gjør det mulig for forskere å visualisere holmetransplantasjonsmodellen som er unik for å studere øyeblikkelig blodmediert inflammatorisk respons etter transplantasjon. IIT-modellen er en særegen modell for å studere inntakscelleoverlevelse og leveriske iskemiske skader som svar på holmetransplantasjon19. Her raffinerte vi prosedyren basert på ...

Intraportal holmetransplantasjon (IIT) via portalvenen er den mest brukte metoden for human holmetransplantasjon i kliniske omgivelser. Mus IIT-modellen gir en flott mulighet til å studere holmetransplantasjon og teste lovende intervensjonsmetoder som kan forbedre effekten av holmetransplantasjon1. IIT ble først beskrevet på 1970-tallet og brukt av flere grupper1,2,3,4,5. Det gjenvant populariteten etter gjennombruddet i human holmetransplantasjon i år 20006,7. Imidlertid brukte de fleste holmetransplantasjonsstudier nyrekapselen som et foretrukket sted for eksperimentell holmetransplantasjon på grunn av sin enkle suksess. Tvert imot er IIT mer teknisk utfordrende og sjeldnere brukt til holmetransplantasjonsstudier8,9. I motsetning til IIT lider imidlertid holmer transplantert under nyrekapselen ikke av den umiddelbare blodmedierte inflammatoriske reaksjonen preget av trombose, betennelse og levervevs iskemi, og har dermed bedre funksjon enn holmer transplantert i leveren. Nyrekapselmodellen kan derfor ikke fullt ut etterligne belastningene som oppstår av holmer i human holmetransplantasjon10,11,12.
En av de største komplikasjonene ved IIT hos mus er blødning fra injeksjonsstedet etter transplantasjon, noe som kan forårsake 10-30% av dødeligheten blant forskjellige musestammer12. I dette dokumentet er det utviklet to raffinerte tilnærminger for å stoppe blødning raskere og sikrere og for å redusere musedødelighet etter en IIT. Visuell demonstrasjon av disse raffinerte detaljene vil hjelpe forskere med å identifisere de viktigste trinnene i denne teknisk utfordrende prosedyren. I tillegg ble plasseringen av holmetransplantasjonene i mottakerens lever bestemt av histologisk undersøkelse av Hematoxylin og Eosin (H&E) farget levervev (hele delen) som bærer transplanterte holmer.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>10% Neutral buffered formalin v/v</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>23426796</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 mL Syringe with needle</td>
			<td>AHS</td>
			<td>AH01T</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20 mL Syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>301031</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>25G x 5/8&#34; hypodermic needles</td>
			<td>BD</td>
			<td>305122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alcohol prep pads, sterile</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>22-363-750</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Animal Anesthesia system</td>
			<td>VetEquip, Inc.</td>
			<td>901806</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine hydrochloride, injection</td>
			<td>Par Sterile Products, LLC</td>
			<td>NDC 42023-179-05</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge tubes, 15 mL</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>0553859A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CMRL-1066</td>
			<td>Corning</td>
			<td>15110CV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>Corning</td>
			<td>10013CV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol, absolute (200 proof), molecular biology grade</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP2818500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Extra fine Micro Dissecting scissors 4&#8221; straight sharp</td>
			<td>Roboz Surgical Instrument Co.</td>
			<td>RS-5882</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum (FBS)</td>
			<td>Corning</td>
			<td>35011CV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FreeStyle&#160; Glucose meter</td>
			<td>Abbott</td>
			<td>Lite</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FreeStyle Blood Glucose test strips</td>
			<td>Abbott</td>
			<td>Lite</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gelfoam (absorbable gelatin sponge, USP)</td>
			<td>Pharmacia &#38; Upjohn Company</td>
			<td>34201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Graefe forceps 4&#8221; extra delicate tip</td>
			<td>Roboz Surgical Instrument Co.</td>
			<td>RS-5136</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heated pad</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>B07HMKMBKM</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hegar-Baumgartner Needle Holder 5.25&#8221;</td>
			<td>Roboz Surgical Instrument Co.</td>
			<td>RS-7850</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin syringe with 27-gauge needle</td>
			<td>BD</td>
			<td>879588</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iodine prep pads</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>19-027048</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Piramal Critical Care</td>
			<td>NDC 66794-017-25</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin/streptomycin (P/S)</td>
			<td>HyClone</td>
			<td>SV30010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polypropylene Suture 4-0</td>
			<td>Med-Vet International</td>
			<td>MV-8683</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polypropylene Suture 5-0</td>
			<td>Med-Vet International</td>
			<td>MV-8661</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium chloride, 0.9% intravenous solution</td>
			<td>VWR</td>
			<td>2B1322Q</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Streptozocin (STZ)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S0130</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical drape, sterile</td>
			<td>Med-Vet International</td>
			<td>DR1826</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue Cassette</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>22-272416</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

minimizing post-infusion portal vein bleeding during intrahepatic islet transplantation in mice

Selv om leveren for tiden er akseptert som det primære transplantasjonsstedet for menneskelige holmer i kliniske omgivelser, blir holmer transplantert under nyrekapselen i de fleste gnagere prekliniske holmetransplantasjonsstudier. Denne modellen brukes ofte fordi murin intrahepatisk holmetransplantasjon er teknisk utfordrende, og en høy prosentandel mus kan dø av kirurgiske komplikasjoner, spesielt blødning fra injeksjonsstedet etter transplantasjon. I denne studien er to prosedyrer som kan minimere forekomsten av postinfusjonsportal veneblødning demonstrert. Den første metoden bruker en absorberbar hemostatisk gelatinsvamp på injeksjonsstedet, og den andre metoden innebærer å trenge inn i holmeinjeksjonsnålen gjennom fettvevet først og deretter inn i portalvenen ved å bruke fettvevet som en fysisk barriere for å stoppe blødningen. Begge metodene kan effektivt forhindre blødningsindusert musedød. Hele leverseksjonen som viser holmefordeling og bevis på holmetrombose etter transplantasjon, en typisk funksjon for intrahepatisk holmetransplantasjon, ble presentert. Disse forbedrede protokollene foredler prosedyrene for intrahepatisk holmetransplantasjon og kan hjelpe laboratorier med å sette opp prosedyren for å studere holmeoverlevelse og funksjon i prekliniske omgivelser.

Vi utførte syngeneiske og xenogene holmetransplantasjoner via portalvenen. Islet graft funksjon ble observert på en doseavhengig måte i begge holmetransplantasjonsmodeller. I den syngeneiske holmetransplantasjonsmodellen ved hjelp av C57BL/6 mus førte transplantasjon av 250 holmer til forbigående normoglysemi før mus returnerte til hyperglykemi. Mus som fikk 500 holmer nådde og opprettholdt normoglysemi utover 30 dager etter transplantasjon (figur 2A). Mus i begge gruppene viste økte...

Watch this Scientific Journal Video about Minimizing Post-Infusion Portal Vein Bleeding during Intrahepatic Islet Transplantation in Mice at JoVE.com

Minimizing Post-Infusion Portal Vein Bleeding during Intrahepatic Islet Transplantation in Mice

Her presenterer vi raffinerte kirurgiske prosedyrer for vellykket utførelse av intraportal holmetransplantasjon, en klinisk relevant, men teknisk utfordrende kirurgisk prosedyre, hos mus.

Minimere postinfusjonsportal veneblødning under intrahepatisk holmetransplantasjon hos mus

Although the liver is currently accepted as the primary transplantation site for human islets in clinical settings, islets are transplanted under the ...

Lever er et primært sted for transplantasjon i den kliniske innstillingen for humane holmer. Mus intrahepatisk holmetransplantasjon er teknisk utfordrende, og en høy prosentandel mus kan dø av kirurgiske komplikasjoner, spesielt blødning. I denne studien kunne de to metodene vi viste begge effektivt forhindre blødningsindusert musedød.Vår metode kan brukes på forskning på leverkreft og andre leversykdommer ved å tillate injeksjon av kreftceller, mesenchymale stamceller og hepatocytt direkte til leveren. Til å begynne med løsner du en menneskelig holmekultur med mild riper. Bruk en 1 kubikkcentimeter sprøyte til å plukke 300 til 350 holmer i sterile 1,5 milliliter mikrocentrifuge rør på is.Når alle holmene er plukket, sentrifugerer rørene i 10 sekunder for å sedimentere cellene. Kast alle unntatt et lite volum supernatant for å forhindre pelletstap og resuspender holmene i 200 mikroliter HBSS som inneholder 5%BSA. Legg de resuspenderte holmene i en 5 milliliter insulinsprøyte og vri sprøytenålen i 1 minutt for å la holmene slå seg ned ved stempelet.Trykk stempelet for å fjerne eventuelle bobler, hold ca. 100 til 150 mikroliter oppløsning i sprøyten og snu sprøyten med skånsom tapping for å fordele holmene jevnt. Etter å ha bekreftet mangel på respons på pedal refleks, bruk salve på øynene for å forhindre tørking. Barber underlivet til den bedøvede musen for å fjerne pelsen og desinfisere det kirurgiske området med tre vekslende våtservietter på 2% jod og 75% alkohol.Deretter gjør du et 1 til 1,5 centimeter snitt i magen og åpner bukhulen. Legg et sterilt stykke gasbind rundt snittet og bruk tang eller bomullsspisser for å forsiktig overføre tarmen til gasbindet. Deretter dekker tarmen med et stykke saltvanns-gjennomvåt gasbind og eksponer portalvenen.For å stoppe holmeoverføringsindusert blødning ved hjelp av gelskum, hold nålen med skråkanten vendt ned og plasser nålespissen med åpningen parallelt med portalveneveggen før du setter nålen inn i portalvenen. Trekk stempelet tilbake for å trekke 20 til 50 mikroliter blod inn i sprøyten for å blande med holmene før du tilfører holmene i portalvenen mens du gjentatte ganger deprimerer og trekker stempelet tilbake. Når alle holmene er levert, legg et omtrent 5 x 5 centimeter stykke gelskum over injeksjonsstedet.Bruk en bomullsspiss til å trykke gelskummet ned mens du fjerner nålen fra portalvenen. Hold gelen på plass i ca 2 minutter, rull gelskummet for å sikre at det dekker portalvenen. Når blødningen er stoppet, returner tarmen forsiktig til bukhulen i original posisjon og injiser 500 mikroliter varm saltvann i bukhulen.Bruk suturer for å lukke muskel- og hudlagene. Plasser deretter musen i et rent bur på en varmepute med overvåking til fullstendig gjenoppretting fra anestesi, administrering av analgesi hver 12. For å stoppe holmeoverføringsindusert blødning ved hjelp av en fettpute, etter å ha eksponert portalvenen som demonstrert, bruk to bomullsspisser for å holde den eksponerte venen på venstre og høyre side og finne fettvevsputen mellom tolvfingertarmen og portalvenen.Penetrer fettputen med nålespissen før du setter den inn i portalvenen. Tilsett holmene i portalvenen som vist. Når alle holmene er levert, trykk på fettvevet med en bomullsspiss i ca. 1 minutt mens du fjerner nålen fra venen.Deretter returnerer tarmen til bukhulen og utfører resten av de postsurgiske omsorgsprosedyrene som demonstrert. Effektene av holmetransplantasjonen er doseavhengige, da normal glykemi observeres 30 dager etter at 500 holmer overføres, men bare forbigående normoglysemi observeres når 250 holmer leveres, med musene tilbake til hyperglykemi med 10 dager etter transplantasjon. En økt kroppsvekt observeres i begge grupper og identiske responser observert når menneskelige holmer transplanteres til diabetiske NOD-SCID-mus, med normoglysemi observert når høyere antall holmeekvivalenter transplanteres, men ikke mindre tall.De fleste musene som har blødning etter overføringen dør etter operasjonen, mens musene uten blødning overlever. Ved 28 dager etter transplantasjon avslører insulinfarging en jevn fordeling av den menneskelige holmen gjennom hele leveren, for det meste nær blodårene. I tillegg til insulin observeres også fibrin og polymorforukær cellefiltrering i de transplanterte menneskelige holmene.Intrahepatisk holmetransplantasjon vil generere et stort hull i portalvenen som kan forårsake blødning. Bruk av våre to forbedrede prosedyrer kan forhindre blødning og redusere dødelighet etter holmetransplantasjon. Intraportal holmetransplantasjonsmodellen kan etterligne klinisk human holmetransplantasjon.Våre raffinerte prosedyrer kan føre til høyere overlevelsesrate for mottakere, noe som tillater videre holmefunksjonsstudie etter transplantasjon.

Research

JoVE Journal

Medicine

A Method for Murine Islet Isolation and Subcapsular Kidney Transplantation

Since the early pioneering work of Ballinger and Reckard demonstrating that transplantation of islets of Langerhans into diabetic rodents could normalize ...

3-Dimensional Resin Casting and Imaging of Mouse Portal Vein or Intrahepatic Bile Duct System

3-dimensjonale Resin Casting og bildebehandling av Mouse Portal Vein eller intrahepatiske kanalsystem

In  organs, the correct architecture of vascular and ductal structures is  indispensable for proper physiological function, and the formation and  ...

Direct Pressure Monitoring Accurately Predicts Pulmonary Vein Occlusion During Cryoballoon Ablation

Direkte Pressure Monitoring Spår Nøyaktig Pulmonal Vein Okklusjon Under Cryoballoon Ablasjon

Cryoballoon  ablation (CBA) is an established therapy for atrial fibrillation (AF).  Pulmonary vein (PV) occlusion is essential for achieving antral ...

Generation of Subcutaneous and Intrahepatic Human Hepatocellular Carcinoma Xenografts in Immunodeficient Mice

Generering av Subkutan og Intrahepatisk menneskeleverkreft xenografts i immunodeficient Mus

In  vivo experimental models of hepatocellular carcinoma (HCC) that recapitulate  the human disease provide a valuable platform for research into disease  ...

Heterotopic Auxiliary Rat Liver Transplantation With Flow-regulated Portal Vein Arterialization in Acute Hepatic Failure

Heterotop Hjelpe Rat levertransplantasjon Med Flow-regulert Portal Vein Arterialization i Akutt leversvikt

In acute hepatic failure auxiliary liver transplantation is an interesting alternative approach. The aim is to provide a temporary support until the ...

Heterotopic Cervical Heart Transplantation in Mice

Heterotop Cervical hjertetransplantasjon i Mus

The heterotopic cervical heart transplantation in mice is a valuable tool in transplant and cardiovascular research. The cuff technique greatly simplifies ...

Using the Sleeve Technique in a Mouse Model of Aortic Transplantation - An Instructional Video

Ved hjelp av ermet teknikk i en musemodell av aorta transplantasjon - en Instruksjonsvideo Video

Orthotopic aortic transplantation using the sleeve technique reduces injury to the aorta with failure rate of only 10-20%. The time to anastomose the ...

Rat Model of the Associating Liver Partition and Portal Vein Ligation for Staged Hepatectomy (ALPPS) Procedure

Rat Model of the Associating Liver Partition and Portal Vein Ligation for Staged Hepatectomy ALPPS Procedure

Rotte modell av den knytte leveren partisjonen og portalen blodåre Ligation for trinnvis Hepatectomy (ALPPS)-prosedyre

Recent clinical data support an aggressive surgical approach to both primary and metastatic liver tumors. For some indications, like colorectal liver ...

Intrasplenic Transplantation of Hepatocytes After Partial Hepatectomy in NOD.SCID Mice

Intrasplenic transplantasjon av hepatocytter etter delvis Hepatectomy i NIKK. SCID mus

Partial hepatectomy is a versatile and reproducible method to study liver regeneration and the effect of cell based therapeutics in various pathological ...

Blood Collection Through Subclavian Vein Puncture in Mice

Blood Collection gjennom arteria vene punktering i mus

The mouse is the foremost mammalian model for studying human disease and human health. However, blood sample collection from mice is challenging in ...