Name: minimizing post-infusion portal vein bleeding during intrahepatic islet transplantation in mice
Uploaded: 2021-05-10T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Minimizing Post-Infusion Portal Vein Bleeding during Intrahepatic Islet Transplantation in Mice at JoVE.com

Denna studie stöddes av Institutionen för veteranfrågor (VA-ORD BLR&D Merit I01BX004536) och National Institute of Health grants # 1R01DK105183, DK120394, DK118529, till HW. Vi vill tacka er Mr. Michael Lee och Ms Lindsay Swaby för språkredigering

Alla procedurer genomfördes med godkännande av Institutional Animal Care and Use Committees vid Medical University of South Carolina och Ralph H Johnson Medical Center i Charleston.
1. Diabetesinduktion med streptozotocin (STZ)
<ol><li>Mottagarmösspreparat:<ol>
<li>Väg alla möss individuellt.</li>
		<li>Kontrollera blodsockernivåerna från ett svansve blodprov med hjälp av en glucometer.</li>
	</ol>
</li>
	<li>STZ-dosbestämning för tre olika scenarier:<ol>
<li>För möss med fettlev...

<ol>
	<li>Pellegrini, S., Cantarelli, E., Sordi, V., Nano, R., Piemonti, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+state+of+the+art+of+islet+transplantation+and+cell+therapy+in+type+1+diabetes.">The state of the art of islet transplantation and cell therapy in type 1 diabetes.</a> Acta Diabetology. 53 (5), 683-691 (2016).</li><li>Ballinger, W. F., Lacy, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transplantation+of+intact+pancreatic+islets+in+rats.">Transplantation of intact pancreatic islets in rats.</a> Surgery. 72 (2), 175-186 (1972).</li><li>Wright, J. R., Hauptfeld, V., Lacy, P. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+Ia+antigen+expression+on+murine+islet+parenchymal+cells+does+not+diminish+islet+allograft+survival.">Induction of Ia antigen expression on murine islet parenchymal cells does not diminish islet allograft survival.</a> American Journal of Pathology. 134 (2), 237-242 (1989).</li><li>Toyofuku, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Natural+killer+T-cells+participate+in+rejection+of+islet+allografts+in+the+liver+of+mice.">Natural killer T-cells participate in rejection of islet allografts in the liver of mice.</a> Diabetes. 55 (1), 34-39 (2006).</li><li>Goss, J. A., Nakafusa, Y., Finke, E. H., Flye, M. W., Lacy, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+tolerance+to+islet+xenografts+in+a+concordant+rat-to-mouse+model.">Induction of tolerance to islet xenografts in a concordant rat-to-mouse model.</a> Diabetes. 43 (1), 16-23 (1994).</li><li>Hara, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+mouse+model+for+studying+intrahepatic+islet+transplantation.">A mouse model for studying intrahepatic islet transplantation.</a> Transplantation. 78 (4), 615-618 (2004).</li><li>Shapiro, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Islet+transplantation+in+seven+patients+with+type+1+diabetes+mellitus+using+a+glucocorticoid-free+immunosuppressive+regimen.">Islet transplantation in seven patients with type 1 diabetes mellitus using a glucocorticoid-free immunosuppressive regimen.</a> New England Journal of Medicine. 343 (4), 230-238 (2000).</li><li>Wang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alpha-1+antitrypsin+enhances+islet+engraftment+by+suppression+of+instant+blood-mediated+inflammatory+reaction.">Alpha-1 antitrypsin enhances islet engraftment by suppression of instant blood-mediated inflammatory reaction.</a> Diabetes. 66 (4), 970-980 (2017).</li><li>Gou, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alpha-1+antitrypsin+suppresses+macrophage+activation+and+promotes+islet+graft+survival+after+intrahepatic+islet+transplantation.">Alpha-1 antitrypsin suppresses macrophage activation and promotes islet graft survival after intrahepatic islet transplantation.</a> American Journal of Transplantation. , (2020).</li><li>Contreras, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activated+protein+C+preserves+functional+islet+mass+after+intraportal+transplantation:+A+novel+link+between+endothelial+cell+activation,+thrombosis,+inflammation,+and+islet+cell+death.">Activated protein C preserves functional islet mass after intraportal transplantation: A novel link between endothelial cell activation, thrombosis, inflammation, and islet cell death.</a> Diabetes. 53 (11), 2804-2814 (2004).</li><li>Moberg, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Production+of+tissue+factor+by+pancreatic+islet+cells+as+a+trigger+of+detrimental+thrombotic+reactions+in+clinical+islet+transplantation.">Production of tissue factor by pancreatic islet cells as a trigger of detrimental thrombotic reactions in clinical islet transplantation.</a> Lancet. 360 (9350), 2039-2045 (2002).</li><li>Melzi, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intrahepatic+islet+transplant+in+the+mouse:+functional+and+morphological+characterization.">Intrahepatic islet transplant in the mouse: functional and morphological characterization.</a> Cell Transplantation. 17 (12), 1361-1370 (2008).</li><li>Wang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Donor+treatment+with+carbon+monoxide+can+yield+islet+allograft+survival+and+tolerance.">Donor treatment with carbon monoxide can yield islet allograft survival and tolerance.</a> Diabetes. 54 (5), 1400-1406 (2005).</li><li>Desai, C. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+liver+histopathology+on+islet+cell+engraftment+in+the+model+mimicking+autologous+islet+cell+transplantation.">Effect of liver histopathology on islet cell engraftment in the model mimicking autologous islet cell transplantation.</a> Islets. 9 (6), 140-149 (2017).</li><li>Cui, W., Angsana, J., Wen, J., Chaikof, E. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Liposomal+formulations+of+thrombomodulin+increase+engraftment+after+intraportal+islet+transplantation.">Liposomal formulations of thrombomodulin increase engraftment after intraportal islet transplantation.</a> Cell Transplantation. 19 (11), 1359-1367 (2010).</li><li>Cui, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thrombomodulin+improves+early+outcomes+after+intraportal+islet+transplantation.">Thrombomodulin improves early outcomes after intraportal islet transplantation.</a> American Journal of Transplantation. 9 (6), 1308-1316 (2009).</li><li>Proto, C., Grasso, G., Fassio, P. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hepatoparenchymal+clearance+of+indocyanine+green+in+infectious+hepatitis.">Hepatoparenchymal clearance of indocyanine green in infectious hepatitis.</a> Giornale di Malattie Infettive e Parassitarie. 20 (9), 845-851 (1968).</li><li>Cabral, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Purification+of+hepatocytes+and+sinusoidal+endothelial+cells+from+mouse+liver+perfusion.">Purification of hepatocytes and sinusoidal endothelial cells from mouse liver perfusion.</a> Journal of Visualized Experiments. (132), e56993 (2018).</li><li>Khatri, R., Hussmann, B., Rawat, D., Gurol, A. O., Linn, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraportal+transplantation+of+pancreatic+islets+in+mouse+model.">Intraportal transplantation of pancreatic islets in mouse model.</a> Journal of Visualized Experiments. (135), e57559 (2018).</li><li>Wang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autologous+mesenchymal+stem+cell+and+islet+cotransplantation:+Safety+and+efficacy.">Autologous mesenchymal stem cell and islet cotransplantation: Safety and efficacy.</a> Stem Cells Translational Medicine. 7 (1), 11-19 (2018).</li></ol>

I denna studie har två förbättrade förfaranden som kan förhindra blödning och kan minska musdödligheten under musen IIT visats. Denna studie gör det möjligt för forskare att visualisera holmetransplantationsmodellen som är unik för att studera det omedelbara blodmedierade inflammatoriska svaret efter transplantation. IIT-modellen är en distinkt modell för att studera holmecellens överlevnad och lever ischemiska skador som svar på holmetransplantation19. Här förfinade vi förfaran...

Intraportal holmetransplantation (IIT) via portalvenen är den vanligaste metoden för human holmetransplantation i kliniska miljöer. Musen IIT-modellen erbjuder ett utmärkt tillfälle att studera holmetransplantation och testa lovande interventionella metoder som kan förbättra effekten av holmetransplantation1. IIT beskrevs första gången på 1970-talet och användes av flera grupper1,2,3,4,5. Det återfick popularitet efter genombrottet i människa holmetransplantation i året 20006,7. Emellertid, de flesta holme transplantation studier använde njurkapseln som en föredragen plats för experimentell holme transplantation på grund av dess lätt framgång. Tvärtom är IIT mer tekniskt utmanande och används mindre ofta för holmetransplantationsstudier8,9. Till skillnad från IIT lider dock holmar transplanterade under njurkapseln inte av den omedelbara blodmedierade inflammatoriska reaktionen som kännetecknas av trombos, inflammation och levervävnad ischemi, och har därmed bättre funktion än holmar transplanterade i levern. Njurkapselmodellen kanske därför inte helt efterliknar de påfrestningar som holmar möter i human holmetransplantation10,11,12.
En av de stora komplikationerna av IIT hos möss är blödning från injektionsstället efter transplantation, vilket kan orsaka 10-30% av dödligheten bland olika musstammar12. I detta dokument har två raffinerade metoder utvecklats för att stoppa blödning snabbare och säkrare och för att minska musdödligheten efter en IIT. Visuell demonstration av dessa raffinerade detaljer kommer att hjälpa forskare att identifiera de viktigaste stegen i denna tekniskt utmanande procedur. Dessutom fastställdes placeringen av holmetransplantat i mottagarens lever genom histologisk undersökning av Hematoxylin och Eosin (H&E) färgade levervävnad (hela sektionen) med transplanterade holmar.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>10% Neutral buffered formalin v/v</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>23426796</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 mL Syringe with needle</td>
			<td>AHS</td>
			<td>AH01T</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20 mL Syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>301031</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>25G x 5/8&#34; hypodermic needles</td>
			<td>BD</td>
			<td>305122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alcohol prep pads, sterile</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>22-363-750</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Animal Anesthesia system</td>
			<td>VetEquip, Inc.</td>
			<td>901806</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine hydrochloride, injection</td>
			<td>Par Sterile Products, LLC</td>
			<td>NDC 42023-179-05</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge tubes, 15 mL</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>0553859A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CMRL-1066</td>
			<td>Corning</td>
			<td>15110CV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>Corning</td>
			<td>10013CV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol, absolute (200 proof), molecular biology grade</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP2818500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Extra fine Micro Dissecting scissors 4&#8221; straight sharp</td>
			<td>Roboz Surgical Instrument Co.</td>
			<td>RS-5882</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum (FBS)</td>
			<td>Corning</td>
			<td>35011CV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FreeStyle&#160; Glucose meter</td>
			<td>Abbott</td>
			<td>Lite</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FreeStyle Blood Glucose test strips</td>
			<td>Abbott</td>
			<td>Lite</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gelfoam (absorbable gelatin sponge, USP)</td>
			<td>Pharmacia &#38; Upjohn Company</td>
			<td>34201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Graefe forceps 4&#8221; extra delicate tip</td>
			<td>Roboz Surgical Instrument Co.</td>
			<td>RS-5136</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heated pad</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>B07HMKMBKM</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hegar-Baumgartner Needle Holder 5.25&#8221;</td>
			<td>Roboz Surgical Instrument Co.</td>
			<td>RS-7850</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin syringe with 27-gauge needle</td>
			<td>BD</td>
			<td>879588</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iodine prep pads</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>19-027048</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Piramal Critical Care</td>
			<td>NDC 66794-017-25</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin/streptomycin (P/S)</td>
			<td>HyClone</td>
			<td>SV30010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polypropylene Suture 4-0</td>
			<td>Med-Vet International</td>
			<td>MV-8683</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polypropylene Suture 5-0</td>
			<td>Med-Vet International</td>
			<td>MV-8661</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium chloride, 0.9% intravenous solution</td>
			<td>VWR</td>
			<td>2B1322Q</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Streptozocin (STZ)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S0130</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical drape, sterile</td>
			<td>Med-Vet International</td>
			<td>DR1826</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue Cassette</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>22-272416</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

minimizing post-infusion portal vein bleeding during intrahepatic islet transplantation in mice

Även om levern för närvarande accepteras som den primära transplantation platsen för mänskliga holmar i kliniska miljöer, holmar transplanteras under njurkapseln i de flesta gnagare prekliniska holme transplantation studier. Denna modell används ofta eftersom murin intrahepatic holme transplantation är tekniskt utmanande, och en hög andel möss kan dö av kirurgiska komplikationer, särskilt blödning från injektionsstället efter transplantation. I denna studie, två förfaranden som kan minimera förekomsten av post-infusion portal ven blödning visas. Den första metoden applicerar en absorberbar hemostatisk gelatinsvamp på injektionsstället, och den andra metoden innebär att man tränger in isinjektionsnålen genom fettvävnaden först och sedan in i portalvenen genom att använda fettvävnaden som en fysisk barriär för att stoppa blödningen. Båda metoderna kan effektivt förhindra blödning-inducerad mus död. Hela lever delen visar holme distribution och bevis på holme blodpropp efter transplantation, en typisk egenskap för intrahepatic holme transplantation, presenterades. Dessa förbättrade protokoll förfinar de intrahepatiska holmetransplantationsförfarandena och kan hjälpa laboratorier att inrätta förfarandet för att studera holmes överlevnad och funktion i prekliniska miljöer.

Vi utförde syngeneic och xenogeneic holme transplantationer via portal ven. Holme graft funktion observerades på ett dosberoende sätt i båda holme transplantation modeller. I den syngeneiska holme transplantation modellen med C57BL/6 möss, transplantation av 250 holmar ledde till övergående normoglykemi innan möss återvände till hyperglykemi. Möss som fick 500 holmar nådde och bibehöll normoglykemi efter 30 dagar efter transplantation (figur 2A). Möss i båda grupperna visade ?...

Watch this Scientific Journal Video about Minimizing Post-Infusion Portal Vein Bleeding during Intrahepatic Islet Transplantation in Mice at JoVE.com

Minimizing Post-Infusion Portal Vein Bleeding during Intrahepatic Islet Transplantation in Mice

Här presenterar vi raffinerade kirurgiska ingrepp på framgångsrikt utföra intraportal holme transplantation, en kliniskt relevant men tekniskt utmanande kirurgiska ingrepp, hos möss.

Minimera post-infusion portal ven blödning under intrahepatic holme transplantation hos möss

Although the liver is currently accepted as the primary transplantation site for human islets in clinical settings, islets are transplanted under the ...

Lever är en primär plats för transplantation i den kliniska miljön på den mänskliga ön. Mus intrahepatic holme transplantation är tekniskt utmanande, och en hög andel möss kan dö av kirurgiska komplikationer, särskilt blödning. I denna studie kunde de två metoderna vi visade båda effektivt förhindra blödning-inducerad musdöd.Vår metod kan tillämpas på forskning inom levercancer och andra leversjukdomar genom att tillåta injektion av cancerceller, mesenkymala stamceller och hepatocyt direkt till levern. Till att börja med lossa en mänsklig holmekultur med mild repor. Använd en 1 kubikcentimeter spruta för att plocka 300 till 350 holmar i sterila 1,5 milliliter mikrocentrifugerör på is.När alla holmar har plockats, centrifugera rören i 10 sekunder för att sedimentera cellerna. Kassera alla utom en liten volym supernatant för att förhindra pelletsförlust och återanvända holmarna i 200 mikroliter HBSS som innehåller 5%BSA. Ladda de återsuspenderade holmarna i en 5 ml insulinspruta och vrid sprutans nål-slut i 1 minut för att låta holmarna sätta sig vid kolven.Tryck ner kolven för att avlägsna eventuella bubblor, håll cirka 100 till 150 mikroliter lösning i sprutan och invertera sprutan med mild tappning för att fördela holmarna jämnt. Efter att ha bekräftat brist på svar på pedalreflex, applicera salva på ögonen för att förhindra torkning. Raka buken på den sövda musen för att ta bort pälsen och desinficera operationsområdet med tre alternerande våtservetter av 2% jod och 75%alkohol.Gör därefter ett 1 till 1,5 centimeter snitt i buken och öppna peritonealhålan. Placera en steril bit gasväv runt snittet och använd tång eller bomullsspetsar för att försiktigt överföra tarmen till gasväven. Täck sedan tarmarna med en bit saltlösning-blöt gasväv och exponera portalvenen.För att stoppa isöverföringsinducerad blödning med gelskum, håll nålen med avfasningen vänd nedåt och placera nålspetsen med öppningen parallellt med portalvenväggen innan du sätter in nålen i portalvenen. Dra in kolven för att dra 20 till 50 mikroliter blod i sprutan för att blandas med holmarna innan du infunderar holmarna i portalvenen samtidigt som du upprepade gånger deprimerar och drar tillbaka kolven. När alla holmar har levererats, placera en cirka 5 med 5 centimeter gelskum över injektionsstället.Använd en bomullsspets för att trycka ner gelskummet samtidigt som du tar bort nålen från portalvenen. Håll gelén på plats i ca 2 minuter och rulla gelskummet för att se till att det täcker portalvenen. När blödningen har stoppats, återför försiktigt tarmen till bukhålan i ursprunglig position och injicera 500 mikroliter varm saltlösning i bukhålan.Använd suturer för att stänga muskel- och hudlagren. Placera sedan musen i en ren bur på en värmeplatta med övervakning tills fullständig återhämtning från anestesi, administrera analgesi var 12: e timme och värm i 48 timmar. För att stoppa isöverföringsinducerad blödning med hjälp av en fettkudde, efter att ha exponerat portalvenen som visats, använd två bomullsspetsar för att hålla den exponerade venen på vänster och höger sida och lokalisera fettvävnadskudden mellan tolvfingertarmen och portalvenen.Penetrera fettkudden med nålspetsen innan du förs in i portalvenen. Ingjuta holmarna i portalvenen som visats. När alla holmar har levererats, tryck fettvävnaden med en bomullsspets i ca 1 minut medan du tar bort nålen från venen.Återvänd sedan tarmarna till bukhålan och utför resten av de postsurgical vårdprocedurerna som visats. Effekterna av holmetransplantationen är dosberoende, eftersom normal glykemi observeras 30 dagar efter syngenetisk holmetransplantation när 500 holmar överförs, men endast övergående normoglykemi observeras när 250 holmar levereras, med mössen som återgår till hyperglykemi vid 10 dagar efter transplantation. En ökad kroppsvikt observeras i båda grupperna och identiska svar observeras när mänskliga holmar transplanteras till diabetiker NOD-SCID möss, med normoglykemi observeras när högre antal holmeekvivalenter transplanteras men inte mindre antal.Majoriteten av mössen som har blödning efter överföringen dör efter operationen, medan mössen utan blödning överlever. Vid 28 dagar efter transplantation avslöjar insulinfärgning en jämn fördelning av den mänskliga ön i hela levern, mestadels nära blodkärlen. Förutom insulin observeras fibrin och polymorfonukleär cellfiltrering också inom de transplanterade mänskliga holmarna.Intrahepatisk holmetransplantation kommer att generera ett stort hål i portalvenen som kan orsaka blödning. Att använda våra två förbättrade förfaranden kan förhindra blödning och minska dödligheten efter holme transplantation. Intraportal holme transplantation modell kan efterlikna kliniska mänskliga holme transplantation.Våra förfinade procedurer kan leda till högre överlevnad för mottagare, vilket möjliggör ytterligare holmefunktionsstudie efter transplantation.

Research

JoVE Journal

Medicine

A Method for Murine Islet Isolation and Subcapsular Kidney Transplantation

En metod för Murine Islet Isolering och subkapsulär Kidney Transplantation

Since the early pioneering work of Ballinger and Reckard demonstrating that transplantation of islets of Langerhans into diabetic rodents could normalize ...

3-Dimensional Resin Casting and Imaging of Mouse Portal Vein or Intrahepatic Bile Duct System

3-dimensionell hartsgjutdel och avbildning av mus portvenen eller Intrahepatisk Bile Duct System

In  organs, the correct architecture of vascular and ductal structures is  indispensable for proper physiological function, and the formation and  ...

Direct Pressure Monitoring Accurately Predicts Pulmonary Vein Occlusion During Cryoballoon Ablation

Direkt Pressure Monitoring förutsäger noggrant Pulmonell venocklusion Under Cryoballoon Ablation

Cryoballoon  ablation (CBA) is an established therapy for atrial fibrillation (AF).  Pulmonary vein (PV) occlusion is essential for achieving antral ...

Generation of Subcutaneous and Intrahepatic Human Hepatocellular Carcinoma Xenografts in Immunodeficient Mice

Generering av subkutan och Intrahepatisk Human hepatocellulär cancer implanterad i möss med immunbrist

In  vivo experimental models of hepatocellular carcinoma (HCC) that recapitulate  the human disease provide a valuable platform for research into disease  ...

Heterotopic Auxiliary Rat Liver Transplantation With Flow-regulated Portal Vein Arterialization in Acute Hepatic Failure

Heterotopisk Hjälp Rat Levertransplantation med Flow-reglerade Portal Vein Arterialization i akut leversvikt

In acute hepatic failure auxiliary liver transplantation is an interesting alternative approach. The aim is to provide a temporary support until the ...

Heterotopic Cervical Heart Transplantation in Mice

Heterotopisk Cervical hjärttransplantation i möss

The heterotopic cervical heart transplantation in mice is a valuable tool in transplant and cardiovascular research. The cuff technique greatly simplifies ...

Using the Sleeve Technique in a Mouse Model of Aortic Transplantation - An Instructional Video

Med ärm-tekniken i en musmodell av aorta Transplantation - en instruktionsvideo

Orthotopic aortic transplantation using the sleeve technique reduces injury to the aorta with failure rate of only 10-20%. The time to anastomose the ...

Rat Model of the Associating Liver Partition and Portal Vein Ligation for Staged Hepatectomy (ALPPS) Procedure

Rat Model of the Associating Liver Partition and Portal Vein Ligation for Staged Hepatectomy ALPPS Procedure

Råtta modell av associera lever Partition och portalen ven Ligation stegvis Hepatectomy (ALPPS) förfarandet för

Recent clinical data support an aggressive surgical approach to both primary and metastatic liver tumors. For some indications, like colorectal liver ...

Intrasplenic Transplantation of Hepatocytes After Partial Hepatectomy in NOD.SCID Mice

Intrasplenic Transplantation av hepatocyter efter partiell Hepatectomy i NOD. SCID möss

Partial hepatectomy is a versatile and reproducible method to study liver regeneration and the effect of cell based therapeutics in various pathological ...

Blood Collection Through Subclavian Vein Puncture in Mice

Blod insamling genom subclavia vein punktering hos möss

The mouse is the foremost mammalian model for studying human disease and human health. However, blood sample collection from mice is challenging in ...