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•
09:48 min
April 22nd, 2022
DOI :
10.3791/62534-v
Chapters
0:06
Introduction
1:51
Nuclei Isolation
4:22
Antibody Incubation
6:15
Transposase Incubation
7:24
Tagmentation
7:52
DNA Extraction and NGS Library Construction
8:19
Representative Results
9:25
Conclusion
Transcript
実験の全体的な目標は、クロマチンの状態を反映したゲノム全体のタンパク質関連DNA断片を同定することでした。この目標を達成するために、3つの特別な操作が行われました。まず、植物細胞から無傷の核を単離した。
第二に、クロマチンへの修飾は、その場で特定の抗体によって認識された。第三に、プロテインA-トランスポザーゼ融合タンパク質であるTn5トランスポザーゼを連結する抗体は、マグネシウムイオンの活性化下でその場でクロマチンを切断する。次いで、DNA断片およびクロマチン修飾結合部位をアダ
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Summary
標的下での切断とタグ付け(CUT&Tag)は、効率的なクロマチンエピゲノムプロファイリング戦略です。このプロトコルは、植物におけるヒストン修飾のプロファイリングのための洗練されたCUT&Tag戦略を提示する。
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